2. 第四军医大学西京医院药剂科, 陕西 西安 710032
2. Dept of Pharmacy, Xijing Hospital, the Fourth Military Medical University,Xi’an 710032, China
二至丸由女贞子、墨旱莲组成[1]。女贞子中裂环环烯醚萜苷(即女贞总苷)[2]，具有保肝作用。本实验主要研究女贞总苷对急性肝损伤小鼠保护效果，为揭示二至丸保肝作用机制提供依据。
1 材料 1.1 药物和试剂PTG(90 %，西安斯诺特有限公司)； ALT、AST、MDA、SOD、Elisa检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；联苯双酯滴丸(浙江万邦药业股份有限公司)；CCl4(上海凌峰化学试剂有限公司)
1.2 动物Kunming小鼠，SPF级♂，体质量(20±2)g，第四军医大学动物中心，许可证SCXK(军) 2007-007
1.3 仪器高速离心机(艾本德，5804R)、电子天平(北京赛多利斯天平有限公司，BS110S)、酶标仪(THERMO，MULTISKAN GO)、显微镜(奥林巴斯，IX71+DP72)、超低温冰箱(Thermo，700Series)
2 方法 2.1 分组小鼠分为6组：空白组、模型组、阳性药组(75 mg·kg-1)、女贞总苷高、中、低剂量组(0.2、0.4、0.8 g·kg-1)，空白组、模型组给予NS，连续给药7 d，末次给药1 h后，除空白组，腹腔注射0.2 % CCl4溶液20 mL·kg-1，造急性肝损伤。16 h后眼底取血，得血清，取肝组织制成10%匀浆，福尔马林溶液固定，包埋。
2.2 指标检测测定血清ALT、AST活性，IL-1β、IL-6、TNF-α含量，匀浆MDA含量、蛋白含量及 SOD活性，肝指数(肝重/体重)及肝组织病理学变化。
2.3 统计学分析所有数据分析由SPSS 16.0软件完成，各组数据用x ± s表示，组间比较采用t检验。
3 结果 3.1 女贞总苷对肝药酶影响女贞总苷组血清ALT、AST活性低于模型组，差异有显著性(P＜0.05)，见Tab 1。
| Group | Dose | ALT/U·L-1 | AST/U·L-1 |
| ##P < 0.01 vs control; *P < 0.05 vs model | |||
| Control | NS | 39.80±11.36 | 33.95±15.04 |
| Model | NS | 305.16±19.83## | 348.01±20.34## |
| Bifendate | 75 mg·kg-1 | 72.90±29.27* | 62.47±28.24* |
| PTG(low) | 0.2 g·kg-1 | 66.88±26.98* | 58.67±45.12* |
| PTG(middle) | 0.4 g·kg-1 | 137.50±34.03* | 131.59±25.61* |
| PTG(high) | 0.8 g·kg-1 | 226.52±24.28* | 327.08±57.76 |
女贞总苷组MDA含量、SOD活性及肝脏指数与模型组比较差异有显著性(P＜0.05)，见Tab 2。
| Group | MDA/μmol·g-1 | SOD/kU·g-1 | Liver index/mg·g-1 |
| #P < 0.05 vs control; *P < 0.05 vs model | |||
| Control | 384.64±42.95 | 133.24±9.89 | 53.65±3.95 |
| Model | 936.54±19.72# | 58.03±5.82# | 86.42±7.28# |
| Bifendate | 484.15±25.55* | 85.14±8.31* | 61.53±5.62* |
| PTG(low) | 473.39±31.12* | 101.67±7.39* | 59.15±4.87* |
| PTG(middle) | 549.65±16.95* | 81.52±6.30* | 66.19±5.74* |
| PTG(high) | 708.75±28.65* | 69.82±8.84 | 79.25±8.81 |
女贞总苷组血清TNF-α、IL-1β、IL-6与模型组比较差异有显著性(P＜0.05)。见Tab 3。
| Group | TNF-α/mmol·L-1 | IL-1β/μg·L-1 | IL-6/ng·L-1 |
| ##P < 0.01 vs control; *P < 0.05 vs model | |||
| Control | 3.567±0.099 | 0.497±0.064 | 473.33±49.02 |
| Model | 22.59±0.505## | 1.653±0.322## | 1893.53±93.28## |
| Bifendate | 8.65±0.249* | 0.868±0.029* | 914.80±44.18* |
| PTG(low) | 6.77±0.57* | 0.771±0.055* | 793.77±45.33* |
| PTG(middle) | 7.94±0.255* | 0.954±0.078* | 959.32±50.49* |
| PTG(high) | 9.14±0.167* | 1.22±0.204* | 1230.93±48.75* |
急性肝损伤时脂质过氧化终产物MDA是反映组织过氧化损伤程度重要指标[4]。SOD作为抗氧化酶对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用。TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因子等的释放加重肝脏损伤程度[5]。以上指标随女贞总苷剂量升高，对应呈现升高或降低，说明女贞总苷能有效缓解急性肝损伤，并具有剂量依赖关系。其作用机制可能与提高SOD抗氧化酶活性，清除自由基，防止脂质过氧化，降低炎症因子的表达、释放有关。
| [1] | 中国药典.一部[S]. 北京:中国医药科技出版社, 2010:412. Chinese Pharmacopoeia. Volume Ⅰ[S]. Beijing:China Medical Science and Technology Press, 2010: 412. |
| [2] | 王 丹,吕亚丽,刘春生,等.女贞子中裂环环烯醚萜总苷的含量测定[J].药学服务与研究,2012,12(1): 52-4. Wang D, Lyu Y L, Liu C S, et al. Content determination of tatal secoriridoid glucosides in Fructus Ligusti Lucidi[J]. Pharm Care Res, 2012,12(1): 52-4. |
| [3] | Zhang H. Amelioration of rats acute liver injury model induced by carbon tetrach loride[J]. China J Mod Med, 2004, 14 (17): 40-4. |
| [4] | CoUetti L M, Green M. Lung and liver injury following hepatic ischemia/ reperfusion in the rat is increased by exogenous lipopolysaccharide which also increases hepatic TNF production in vivo and in vitro [J]. Shock, 2001, 16(4): 312-9. |