2. 河北以岭医药研究院,河北 石家庄 050035;
3. 国家中医药管理局重点研究室(心脑血管络病),河北 石家庄 050035;
4. 河北省络病重点实验室,河北 石家庄 050035;
5.河北医科大学,河北 石家庄 050017
2. Hebei Yiling Medical Research Institute,Shijiazhuang 050035, China;
3. Key Research Centre of State Administration of Traditional Chinese Medicine (Cardiovascular Collateral Disease), Shijiazhuang 050035, China;
4. Key Laboratory of Collateral Disease of Hebei Province, Shijiazhuang 050035, China;
5. Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017,China
肥胖常并发糖脂代谢紊乱等疾病，体脂堆积引起的代谢紊乱严重影响人类健康[1]。通心络胶囊由人参、水蛭等中药组成，具有益气活血的功效，研究报道通心络胶囊具有调节大鼠血脂的作用[2]，本研究观察通心络对高脂饮食喂养大鼠糖脂代谢及糖脂代谢相关蛋白的影响，以探讨其调节糖脂代谢的相关机制。
1 材料 1.1 实验动物SD大鼠，180~220克，♂，SPF级，购自中国食品药品检定研究院，许可证编号：SCXK(京)2009-0017。
1.2 药品与试剂通心络胶囊，石家庄以岭药业股份有限公司提供，批号：20120512；吡格列酮，杭州中美华东制药有限公司生产，批号：20131202；油红O染色试剂、肝糖原试剂盒，购于南京建成科技有限公司；PPARα、AMPKα、p-AMPKα、ACCα、p-ACCα、PEPCK抗体，购于Abcam公司。
1.3 实验饲料普通饲料，购于河北医科大学实验动物中心；高脂饲料自行配制，配方：面粉10%、豆粕33%、豆粉20%、猪油30%、鱼粉2%、麦麸2%、骨粉3%。
2 方法 2.1 分组与给药10只♂SD大鼠设为正常组(NF)，给予普通饲料；30只♂SD大鼠，给予高脂饲料，6周后分为：模型组(HF组)、通心络组(TXL)、吡格列酮组(PLZ)。通心络及吡格列酮均以纯水配制，分别以大鼠体重0.4 g·kg-1·d-1、10 mg·kg-1·d-1灌胃。NF组及HF组给予纯水灌胃，高脂饲料喂养及给药6周。
2.2 油红O染色新鲜肝脏组织冰冻切片，油红O方法染色。
2.3 生化指标及肝糖原检测全自动生化分析仪检测血清中血脂四项(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、空腹血糖(FBG)、游离脂肪酸(NEFA)；蒽酮法检测肝糖原含量。
2.4 肝脏糖脂代谢相关蛋白表达检测根据参考文献[3]，检测肝脏组织PPARα、AMPKα、p-AMPKα、ACCα、p-ACCα、PEPCK蛋白表达。
2.5 统计学处理采用SPSS 13.0统计软件分析，数据均用
± s表示，组间比较采用单因素方差分析。
HF组大鼠较NF组大鼠肝脏脂肪蓄积增加，TXL组较HF组大鼠肝脏脂肪蓄积减轻。
3.2 通心络对大鼠血清生化指标及肝糖原的影响HF组大鼠较NF组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、NEFA升高，HDL-C、肝糖原降低(P < 0.01)。TXL组大鼠较HF组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C及NEFA下降，肝糖原增加(P < 0.05)。见Tab 1。
± s,n=6)
| Group | TC/ mmol·L-1 | TG/ mmol·L-1 | LDL-C/ mmol·L-1 | HDL-C/ mmol·L-1 | NEFA/ mmol·L-1 | FBG/ mmol·L-1 | Hepatic glycogen/ mg·L-1 |
| **P < 0.01 vs NF group；#P < 0.05,##P < 0.01 vs HF group | |||||||
| NF | 0.97±0.16 | 0.45±0.05 | 0.17±0.07 | 1.05±0.34 | 0.20±0.08 | 5.36±0.71 | 24.82±4.10 |
| HF | 2.66±0.74** | 2.10±1.06** | 0.36±0.07** | 0.63±0.13** | 0.80±0.17** | 10.39±0.31** | 14.56±2.12** |
| TXL | 1.02±0.19## | 0.87±0.20# | 0.24±0.07# | 0.78±0.21 | 0.59±0.15# | 9.05±0.95 | 18.82±0.19# |
| PLZ | 1.58±0.31# | 0.97±0.19# | 0.24±0.01## | 0.59±0.18# | 0.6±0.16## | 8.32±0.83# | 19.23±0.84# |
HF组较NF组大鼠肝脏PPARα、p-AMPKα、p-ACCα下降，PEPCK表达升高(P <0.01)；TXL组较HF组大鼠肝脏PPARα、p-AMPK、p-ACC表达升高、PEPCK表达减少(P < 0.05)。见Tab 2。
± s,n=3)
| Group | PEPCK | PPARα | p-AMPK | AMPK | p-ACC | ACC | |
| **P < 0.01 vs NF group；#P < 0.05,##P < 0.01 vs HF group | |||||||
| NF | 1.32±0.15 | 0.87±006 | 0.88±0.04 | 0.99±0.05 | 0.68±0.04 | 0.78±0.01 | |
| HF | 3.07±0.32** | 0.40±0.11** | 0.67±0.03** | 0.96±0.02 | 0.30±0.02** | 0.71±0.05 | |
| TXL | 1.64±0.26# | 0.75±0.04# | 0.76±0.02## | 1.00±0.02 | 0.45±0.01## | 0.78±0.06 | |
| PLZ | 1.86±0.18# | 0.70±0.08# | 0.76±0.03## | 0.99±0.03 | 0.47±0.02## | 0.77±0.03 | |
高脂饮食是造成糖脂代谢紊乱的主要原因之一[4]，可造成血脂异常，并刺激肝脏磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PEPCK)表达，促进肝糖异生[5]。腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)可抑制肝脏糖异生，并通过使乙酰辅酶A羧化酶(ACC)磷 酸化，抑制脂肪酸的合成[6]。过氧化物酶增殖激活受体α(PPARα)在肝脏脂质代谢中起到重要作用，可调节脂类的摄取和氧化[7]。通心络胶囊调节糖脂代谢的机制可能与干预肝脏PPARα、PEPCK表达及AMPK、ACC磷酸化有关，这也可能是益气活血类中药调整糖脂代谢的可能机制之一。
(致谢：本实验由河北以岭医药研究院、国家中医药管理局重点研究室指导，于河北省络病重点实验室完成，感谢以上科室对本实验提供的技术指导及资金支持。)
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