2.河北大学附属医院消化内科, 河北 保定 071000;
3.河北省易县人民医院,河北 保定 074200
鲁素彩(1963-),女,硕士,教授,研究方向:肝脏及胃肠疾病,通讯作者,E-mail:lsc3065123@sina.com;
2.Dept of Gastroenterology, the Affiliated Hospital of Hebei University, Baoding Hebei 071000,China;
3.People's Hospital of Yi County, Baoding Hebei
芒果苷属双苯吡酮类化合物,是芒果叶的主要活性成分,具有抗炎作用[3]。炎症是缺血/再灌注(I/R)损伤发生的重要机制[1, 2],但是芒果苷对肝脏I/R损伤的保护作用尚未见报道。本研究观察了芒果苷对I/R大鼠肝脏炎症反应以及损伤的影响。
1 材料与方法 1.1 仪器生化自动分析仪(购自德国Bayer公司),实时定量PCR仪(购自美国Thermo公司)。
1.2 方法 1.2.1 实验分组将SD大鼠(由河北大学实验动物中心提供)随机分为假手术组、I/R组、芒果苷预处理组、芒果苷-ZnPP联合预处理组。假手术组大鼠肝脏血流不被阻断,其余3组均在缺血45 min后血流再灌注8 h。其中芒果苷预处理组于缺血前4 h给予芒果苷(5 mg·kg-1)腹腔注射,而芒果苷-ZnPP联合预处理组则于缺血前4 h同时给予芒果苷(5 mg·kg-1)与ZnPP(10 μmol·kg-1)腹腔注射。
1.2.2 血清转氨酶检测抽取大鼠下腔静脉血,分离血清,利用血生化仪测定ALT和AST水平。
1.2.3 髓过氧化物酶(MPO)含量测定取肝组织匀浆,严格按照试剂说明书(恒大百盛生物公司)提供的实验步骤操作。
1.2.4 实时定量PCR分析TRIzol法提取肝总RNA,并反转录为cDNA。用MxPro QPCR系统进行定量PCR检测IL-1β及TNF-α表达情况。
1.2.5 统计学处理数据以表示,用SPSS 12.0软件进行统计分析。采用单因素方差分析。
2 结果 2.1 肝组织损伤情况再灌注8 h后,I/R组与假手术组相比,可见血清ALT、AST水平增高(P<0.01)。与I/R组相比,芒果苷预处理组ALT、AST水平明显降低(P<0.05)。而血红素氧合酶-1(HO-1)的抑制剂——ZnPP则逆转了芒果苷对转氨酶的抑制作用。
2.2 肝组织白细胞浸润及炎症因子表达情况利用实时定量PCR方法检测肝组织IL-1β及TNF-α表达变化,以相关试剂盒检测MPO水平。在再灌注后8 h,I/R组与假手术组相比可见肝组织IL-1β、TNF-α表达及MPO水平上升(P<0.01)。与I/R组相比,芒果苷预处理组IL-1β、TNF-α表达以及MPO水平明显降低(P<0.05)。而芒果苷-ZnPP联合使用则逆转了芒果苷的作用。
3 讨论肝脏I/R损伤指组织缺血后血流再灌注导致损伤反而加重,常见于休克、肝移植术等过程中,其机制复杂,而炎症反应在其中的作用越来越受到重视。本研究证实芒果苷预处理明显降低了ALT与AST水平,同时还降低了I/R大鼠肝脏中IL-1β、TNF-α的表达及MPO水平下降。IL-1β、TNF-α是在I/R损伤中发挥重要作用的炎症介质,而MPO存在于中性粒细胞、单核巨噬细胞等炎症细胞中,是炎症细胞激活的标志。因此,芒果苷在I/R损伤中发挥了抗炎作用。HO-1为诱导性表达,是血红素代谢过程中的限速酶,与I/R关系密切[4]。本研究表明,抑制HO-1可以逆转芒果苷抗炎、抗I/R损伤的作用。
(感谢河北大学附属医院实验中心提供实验条件。)
[1] | Matsushima S, Tsutsui H, Sadoshima J.Physiological and pathological functions of NADPH oxidases during myocardial ischemia-reperfusion[J].Trends Cardiovasc Med,2014,24(5):202-5. |
[2] | 王阳阳, 马幼敏, 田 媛, 等.sEH抑制剂对大鼠肝缺血/再灌注损伤的影响及其机制[J].中国药理学通报,2013,29(4): 590-1. Wang Y X, Ma Y M, Tian Y, et al.Effect of sEH inhibitor on hepatic I/R injury in rats and its mechanisms[J].Chin Pharmacol Bull, 2013, 29(4):590-1. |
[3] | Telang M, Dhulap S, Mandhare A, et al.Therapeutic and cosmetic applications of mangiferin: a patent review[J].Expert Opin Ther Pat, 2013,23(12):1561-80. |
[4] | Anatoliotakis N, Deftereos S, Bouras G, et al.Myeloperoxidase: expressing inflammation and oxidative stress in cardiovascular disease[J].Curr Top Med Chem,2013,13(2):115-38. |