2. 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室, 江苏省优势学科, 江苏 南京 210023
2. Jiangsu Key Laboratory for Pharmacology and Safety Evaluation of Chinese Materia Medicine, Nanjing 210023, China
心血管疾病是一种严重威胁人类健康的疾病，该病具有“发病率高、致残率高、死亡率高”等特点[1]，目前已成为导致人类死亡的头号病因。因此，寻找能够有效治疗心血管病的药物成为了临床面临的首要问题。传统的活血化瘀中药丹参，因其具有祛瘀止痛、活血通经的功效[2, 3]，目前已被广泛用于心血管疾病的治疗。研究发现，丹酚酸(salvianolic acids)是丹参(拉丁学名：salvia miltiorrhiza bunge)中含量最丰富的水溶性物质，而丹酚酸B则是丹酚酸中含量最多、生物活性最强的化合物[4]。研究表明，丹酚酸不仅对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用[5, 6]，同时对心肌梗死[7, 8]及心肌细胞肥大[9]均有保护作用。本文就近年来丹酚酸B在心血管疾病中的药理研究进展进行综述，重点探讨丹酚酸B介导调控心血管疾病的药理作用机制及其与心血管疾病治疗的关系，为丹酚酸B的临床应用及后续研究提供参考。
1 丹酚酸B在心血管疾病中药理作用研究进展 1.1 丹酚酸B对心肌梗死的保护作用He等[10]采用冠状动脉结扎方法构建大鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型，考察丹酚酸B对MI的保护作用。结果显示，与对照组相比，丹酚酸B能够对MI发挥明显的心脏保护作用。机制研究表明，丹酚酸B主要通过抑制瘦素和内皮素-活性氧簇(endothelin-reactive oxygen species,ET-ROS)的上调以及恢复心肌中心肌细胞肌浆网钙ATP酶2a(sarco/endoplasmic reticulum ATPase 2a,SERCA2a)和受磷蛋白的正常表达，进而发挥保护心脏的作用。
1.2 丹酚酸B对MI/R损伤的保护作用MI/R时会产生大量自由基，使得细胞膜脂质过氧化反应增强，膜流动性和通透性发生改变，进而导致电生理活动异常，诱发和促进心律失常的产生。由于心肌细胞脂质过氧化反应增强，致使心肌缺血区的过氧化产物如丙二醛(malondialdehyde,MDA) 含量增多；冠脉流出液中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)和肌酸磷酸激酶(creatine phosphokinase,CPK) 升高以及心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 减少[11]。研究发现，丹酚酸B能够明显提高MI/R损伤大鼠心肌组织中的SOD活力，可有效对抗氧自由基引起的毒害作用，从而减轻心肌细胞的损伤。Xue等[12]通过构建大鼠MI/R模型考察丹酚酸B对MI/R损伤的保护作用，发现与对照组相比，给予丹酚酸B能够明显增加血浆中肌钙蛋白(troponins,CTn)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)的含量，同时明显降低血浆中一氧化氮(nitric oxide,NO)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)的水平，表明丹酚酸B对大鼠MI/R损伤有明显的保护作用。进一步研究发现，丹酚酸B能够缓解氧化应激、减少钙超载以及改善内皮功能。Yang等[13]考察了兔MI/R过程中丹酚酸B对血小板活化和血管内皮细胞功能的影响，发现缺血/再灌注过程中，内皮细胞功能失调，同时血小板被活化；给予丹酚酸B后可保护血管内皮细胞免受MI/R损伤，同时丹酚酸B也能够抑制MI/R引起的血小板活化。
1.3 丹酚酸B具有抑制心肌细胞肥大的作用Liu等[9]考察丹酚酸B对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞肥大的影响，结果表明，丹酚酸B能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞的肥大，同时发现心钠素和脑钠素mRNA表达下降及细胞表面积减少。机制研究发现，丹酚酸B能够抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]的活性；同时发现过表达PARP-1能够减弱丹酚酸B抗心肌细胞肥大的效应，这些研究表明丹酚酸B具有很好的抑制心肌细胞肥大的作用。
1.4 丹酚酸B能够抑制动脉粥样硬化的形成Lee等[14]通过实验考察了丹酚酸B对动脉粥样硬化的作用，结果表明用丹酚酸B处理血管平滑肌细胞可有效抑制血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导的细胞增殖和迁移，同时可明显增加血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达；与此同时，丹酚酸可明显减少活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的产生及降低烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP/NADPH)的比率。用人脐静脉内皮细胞研究发现，丹酚酸B能够明显诱导HO-1的产生，同时有效的抑制肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor,TNF-α)诱导的nuclear factor-κB (NF-κB)的激活；而采用siRNA抑制HO-1的表达可消除丹酚酸对血管内皮细胞的保护作用，同时阻断了HO-1缺失细胞的增殖、迁移和炎症。进一步的机制研究表明，丹酚酸B是通过活化核因子E2相关因子(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)，进而诱导HO-1的表达，从而抑制血管细胞的增殖、迁移和炎症，进而发挥抗动脉粥样硬化的作用。
1.5 丹酚酸B能够有效降低门静脉高压Tian等[15]采用内皮素1(endothelin-1,ET-1)诱导小鼠门静脉高血压，考察丹酚酸B对门脉高压小鼠肝脏内血液微循环的影响，结果表明，与对照组相比，丹酚酸B能够明显降低门脉高压小鼠肝脏内的平均血流和微循环流速，进而发挥降低门脉高压的作用。Zhao等[16]研究表明，丹酚酸B能够降低大鼠的门静脉高压，并且研究发现丹酚酸B主要是借助大鼠肝脏内的巨噬细胞而发挥作用。
2 丹酚酸B调控心血管效应的机制 2.1 Akt-eNOS信号介导丹酚酸B对MI/R损伤的保护作用研究发现，Akt-eNOS是再灌注损伤补救酶(reperfusion injury salvage kinase,RISK)信号转导通路的组成之一，通过影响下游相关蛋白的表达，进而对心脏产生保护作用。在这一通路中，Akt处在中心环节，也是最主要的靶酶，只有磷酸化的Akt才能发挥一系列的生物 活性[17]。周丹等[18]通过结扎冠状动脉制备大鼠MI/R损伤模型，考察丹酚酸B对MI/R损伤大鼠的保护作用，研究表明，丹酚酸B可增加Akt的磷酸化水平进而导致其活化，活化的Akt进一步激活其下游靶标eNOS使其磷酸化，进而通过下游一系列的生物效应发挥对MI/R损伤的保护作用。
2.2 TLR4-NFκB-TNF-α炎症通路介导丹酚酸B保护心肌细胞损伤Wang等通过用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导新生大鼠心肌细胞炎症损伤，并探讨丹酚酸B对心肌细胞损伤的保护作用。结果发现，给予LPS后该组的乳酸脱氢酶和肿瘤坏死因子-α的浓度明显高于其他组，表明造模成功；而给予丹酚酸B处理后，LDH和TNF-α的浓度明显下降。与此同时，免疫组化结果显示，给予LPS后，Toll样受体4(toll-like receptors,TLR4)和NF-κB的表达明显升高；而给予丹酚酸B后，TLR4和NF-κB的表达明显下降[19]。说明在用LPS诱导新生大鼠心肌细胞损伤的早期阶段，TLR4-NF-κB-TNF-α通路被迅速激活，而丹酚酸B发挥保护心肌细胞损伤的作用，很可能是通过抑制该通路来实现的。
2.3 自噬介导丹酚酸B保护心肌细胞损伤Han等[20]通过实验考察自噬对饥饿心肌细胞的影响，同时观察丹酚酸B对饥饿心肌细胞中自噬的效应。结果发现，心肌细胞饥饿3 h后会诱发自噬，进而导致细胞损伤，并且发现饥饿细胞中的LC3-Ⅱ的表达呈现时间依赖性的增加；而给予丹酚酸B后，能够明显抑制 LC3-Ⅱ的增加，同时细胞活力及心肌细胞中ATP的水平也明显增加。该研究表明丹酚酸B能够通过阻断过度自噬，进而发挥保护作用。
2.4 线粒体凋亡途径介导丹酚酸B抑制心肌梗死后心肌细胞的凋亡张萌等[21]通过结扎冠脉左前降支构建大鼠心肌梗死模型，进而考察丹酚酸B对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响。结果表明，丹酚酸B可以明显降低心肌细胞的凋亡率。作者进一步考察丹酚酸B对凋亡相关基因表达的影响，结果发现丹酚酸B可以明显降低Bax的表达，同时发现丹酚酸B也明显降低了STAT-3及IL-6的表达。这表明线粒体凋亡途径参与调控了丹酚酸B 抑制心肌梗死后心肌细胞的凋亡。
3 针对现有研究临床开展丹酚酸B治疗心血管疾病的策略大量研究已表明，丹酚酸B能够对包括心肌梗死、心肌缺血/再灌注在内的多种心血管疾病发挥保护作用，但我们不难发现这些研究主要限于动物体内研究，其在临床的研究非常少，究其原因，一是因为丹酚酸B治疗心血管疾病的作用机制仍然没有阐释清楚；二是因为心血管本身也是一个复杂的调控网络，丹酚酸B在这一调控网络中究竟扮演怎样的角色仍需努力探索。那么，临床该如何开展丹酚酸B治疗心血管疾病的研究呢？我认为应该从以下三点入手：(1) 首先对市面上含丹酚酸B为的制剂进行临床效应筛选，找到对大部分心血管疾病患者有效的制剂类型。目前临床上应用的含丹酚酸B的制剂类型主要包括丹参冻干粉、丹酚酸胶囊及含丹酚酸B 的注射液。丹参冻干粉的优点主要是外部环境如光照、温度及临床稀释液对其所含丹酚酸B的稳定性无明显影响，有效期相对其他剂型明显延长；缺点是临床应用中无法准确的对丹酚酸B进行定量。丹酚酸胶囊的优点主要是便于吞服及掩盖药物的不适味道；缺点是生物利用度低，遇高温、热容易分解。丹酚酸B的注射液的优点主要是药物直接进入血液，可使血液药物浓度迅速到达峰值，发挥作用迅速；缺点是临床使用中其安全性及机体适应性差，易给患者带来危害。(2) 在确保含丹酚酸B制剂的剂型得到正确应用的同时，对使用含丹酚酸B制剂治疗心血管疾病的患者进行后续跟踪，对其治疗效果进行跟踪记录，并构建相关评价体系，如患者使用该药物后疾病是否得到有效缓解以及患者长期用药后有无明显不良反应等，从而对其效果进行客观评价；(3) 优化上述得到的效果评价，如发现患者有不良反应后及时调整药物的用量及用药次数，并在此基础上进一步开展丹酚酸B在临床心血管疾病治疗中的应用，以期获得最佳治疗效果。
4 小结大量研究已证实丹酚酸B对多种心血管疾病如心肌梗死、动脉粥样硬化及心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用。近些年来关于丹酚酸B调控心血管疾病的相关作用机制也不断被揭示，这为丹酚酸B在临床的推广应用提供了很多理论依据。但我们同时也看到有关丹酚酸B作用机制的研究并不深入，机理仍然不清，如Akt-eNOS信号通路是通过何种机制被激活，以及该通路活化后如何发挥心肌保护作用还有待进一步研究等等。相信随着临床研究的全面开展，有关丹酚酸B在心血管疾病中应用的研究必将产生更多、更深入的研究成果。
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