榅桲(Cydonia oblonga Mill,COM)具有降血压、调血脂、补血、补肾、止泻、利尿等功效。还有资料报道榅桲具有抗氧化、抗菌作用。其果实含有糖类、黄酮类、生物碱类、氨基酸及多肽、鞣质、有机酸、挥发油等成分[1],其中糖类含量最高。目前,在国内外尚未见到榅桲果实多糖结构及药理活性的相关报道。大量研究证明,植物多糖具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗突变、抗衰老、抗凝血、降血糖和环境治理等生物学效应[2, 3, 4, 5]。本文就榅桲果实多糖对大鼠动、静脉血栓形成的影响进行了研究,探讨其抗血栓作用及其可能的机制,为进一步筛选抗血栓有效部位提供实验依据。
1 材料 1.1 仪器台式高速离心机(KH-120M,上海安亭科技仪器厂),酶标仪(Model-680,日本),放射免疫计数器(GC-2016 γ,中国科大中佳公司),全自动血凝分析仪(德国)。
1.2 药物与动物榅桲果实多糖(自提),阿司匹林(Sigma,No2000641) ,银杏叶片(天津天士力制药有限公司,批号259);SPF 级Wistar 大鼠96只,♂,体质量220~260 g,均由新疆医科大学实验动物中心提供,许可证号: SCXK( 新)2011-0004。
2 方法 2.1 分组及给药大鼠随机分成6组,即:空白组、阿司匹林组(5 mg·kg-1)、银杏叶片组(20 mg·kg-1)、榅桲果实多糖低、中、高(50、100、200 mg·kg-1)剂量组,每组8只。灌胃给药15 d,每天1次,容积为10 mL·kg-1。
2.2 实验方法末次给药1 h 后腹腔注射3%戊巴比妥钠(5 mL·kg-1) 麻醉,参照文献[6, 7]的方法改良制作血栓模型,剪下血栓发生部位的血管,取出血栓。腹主动脉取血,枸橼酸钠1 ∶ 9 抗凝,混匀后3 000 r·min-1离心15 min,收集血浆,分装,冻存于-80℃。
2.3 指标测定称血栓重量,计算血栓抑制率,测定影响凝血、纤溶及血小板功能的指标。
2.4 统计学处理数据均用SPSS 16.0统计分析软件进行处理,各组数据以表示,各组数据比较采用t检验。
3 结果 3.1 榅桲果实多糖对血栓重量的影响中、高剂量组均能减轻动、静脉血栓重量,抑制血栓形成,差异有统计学意义(P<0.05)(Tab1)。
3.2 榅桲果实多糖对凝血功能的影响高剂量组对个别指标略有影响,而低、中剂量组均没有影响,差异无统计学意义(Tab2)。
3.3 榅桲果实多糖对纤溶功能的影响高剂量组能提高PLG含量(P<0.05),t-PA、 PAI-1均略有变化,但差异没有统计学意义(Tab3)。
3.4 榅桲果实多糖对血小板功能的影响中、高剂量组均明显升高6-keto-PGF1α含量(P<0.01);降低VWF、TXB2含量(P<0.05),差异有统计学意义(Tab4)。
4 讨论血小板参与血栓形成过程的许多环节,在血栓形成过程中起核心作用。实验结果表明,榅桲果实多糖对于凝血、纤溶系统的影响不明显;而能减轻血栓重量,抑制血栓形成;升高具有抑制血小板聚集作用的PGI2代谢产物6-keto-PGF1α含量,降低体内强效的血小板聚集剂TXA2代谢产物TXB2含量。TXB2和6-keto-PGF1α相互作用,抑制血小板聚集,从而抑制血栓形成。VWF是反映血管内皮细胞损伤的相对特异的血液学指标,是血小板黏附起点,VWF明显升高,表明内皮功能损伤,内皮损伤为血小板黏附聚集和血栓形成提供结构基础。本实验中榅桲果实多糖降低VWF含量而抑制血栓形成。实验结果提示榅桲果实多糖抗血栓作用主要与抑制血小板黏附和聚集有关。由于仅做了体内实验,而参与血栓形成的因素很多,这有待于做进一步的研究和探索论证。
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