文章信息
- 苗野, 阮强, 马艳萍
- MIAO Ye, RUAN Qiang, MA Yanping
- 不同人乳头瘤病毒亚型感染与宫颈病变的相关性
- Relationship between Infections of Different Human Papillomavirus Genotypes and Cervical Lesions
- 中国医科大学学报, 2019, 48(7): 606-610, 614
- Journal of China Medical University, 2019, 48(7): 606-610, 614
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文章历史
- 收稿日期:2018-10-31
- 网络出版时间:2019-07-15 10:59
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一, 其发病率和死亡率在世界女性肿瘤中均位居第二, 仅次于乳腺癌。据2012年全球肿瘤统计数据显示, 每年有527 600例宫颈癌新发病例和265 700例宫颈癌死亡病例[1]。宫颈癌是由宫颈上皮病变逐步发展而成, 即宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN), 其发展过程包括CIN Ⅰ期、CIN Ⅱ期和CIN Ⅲ期。人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)为一种嗜黏膜和皮肤上皮性病毒, 自1949年STRAUSSZA在电镜下首次发现HPV以来, 目前已鉴定出其有100多种亚型, 可分为高危亚型(如HPV16、HPV18、HPV31等)和低危亚型(如HPV6、HPV11、HPV42等)。各亚型与体内特定感染部位和病变有关, 且不同亚型病毒所致疾病类型也不同。目前有研究[2]显示, HPV感染尤其是高危HPV亚型持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生发展的必要条件。本研究通过分析宫颈病变与不同HPV感染亚型的关系, 以及不同年龄患者中宫颈病变与不同HPV感染亚型的关系, 探讨HPV感染与宫颈病变分布、各HPV亚型感染与宫颈病变的关系以及不同年龄段不同HPV亚型致病力的差异, 旨在为HPV感染所致宫颈癌提供防治依据, 并为HPV疫苗接种提供指导。
1 材料与方法 1.1 研究对象回顾性分析2015年5月1日至2016年5月31日期间于中国医科大学附属盛京医院妇产科就诊的1 615例宫颈病变女性患者的临床资料, 患者年龄为16~85岁, 所有患者均自愿接受HPV检测。
1.2 方法 1.2.1 标本采集和处理标本采集应在非月经期内进行, 取样前24 h内禁性行为, 3 d内未使用阴道内药物或未进行阴道冲洗。由各病房固定的妇产科医生采用配套专用宫颈刷(广东省潮州凯普生物化学有限公司), 置于宫颈口鳞柱交接处, 沿顺时针旋转3~5周获得所有受检者足够的移行区上皮细胞后取出, 放入3 mL专用细胞保存液中, 沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断, 旋紧管盖, 做好样本标记, 立即送检或放置4 ℃冰箱中, 3 d内检验。
1.2.2 检测方法采用广东省潮州凯普生物化学有限公司的HPV核酸扩增分型检测试剂盒, 应用基因扩增及导流杂交技术, 通过反向点杂交方法, 利用包被有型特异性探针的杂交膜与HPV基因组DNA扩增产物进行杂交反应, 并采用碱性磷酸酶系统定性检测。
1.2.3 结果判断肉眼观察检测结果, 阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点, 根据膜条HPV分型分布图, 判断阳性点为何种HPV亚型。对21种HPV亚型进行分类, 包括6种低危亚型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、CP8304)和15种高危亚型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68)。有2种或2种以上者为多重感染, 对多重感染者, 各亚型阳性率重复计算。
1.2.4 临床诊断以组织病理学诊断为金标准, 诊断研究对象CIN水平, 宫颈癌病变过程为初期宫颈炎、CINⅠ期、CINⅡ期、CINⅢ期及宫颈癌确诊, 由2名病理学医师重复阅片, 对诊断进行质量控制。
1.3 统计学分析采用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析, 分类资料以患病率和百分比进行描述, 采用χ2检验进行比较, P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 HPV感染情况和亚型分布1 615例女性患者中, 474例HPV检测阳性, 总感染率为29.35%。其中64例(3.96%)为低危HPV亚型感染, 436例(26.98%)为高危HPV亚型感染。
HPV各亚型阳性检出率见表 1。在所有高危HPV亚型感染中, 除HPV35亚型外, 其余高危亚型均被检出。其中以HPV16亚型阳性检出率最高, 阳性检出率为8.73%, 占高危亚型的32.34%。而HPV58、HPV53、HPV33次之, 其阳性检出率分别为4.40%、3.59%、2.79%, 分别占高危亚型的16.28%、13.30%、10.32%。低危HPV亚型感染中, CP8304亚型检出率最高, 阳性检出率为1.73%, 占低危亚型的43.75%。
HPV genotype | n | Positive detection rate (%) |
HPV6 | 13 | 0.80 |
HPV11 | 18 | 1.11 |
HPV44 | 4 | 0.25 |
CP8304 | 28 | 1.73 |
HPV16 | 141 | 8.73 |
HPV18 | 23 | 1.42 |
HPV31 | 23 | 1.42 |
HPV33 | 45 | 2.79 |
HPV39 | 29 | 1.80 |
HPV42 | 3 | 0.19 |
HPV43 | 2 | 0.12 |
HPV45 | 6 | 0.37 |
HPV51 | 35 | 2.17 |
HPV52 | 25 | 1.55 |
HPV53 | 58 | 3.59 |
HPV56 | 29 | 1.80 |
HPV58 | 71 | 4.40 |
HPV59 | 11 | 0.68 |
HPV66 | 21 | 1.30 |
HPV68 | 9 | 0.56 |
2.2 不同HPV感染亚型与不同级别宫颈病变的关系
本研究中, 宫颈炎患者共检出16种HPV亚型, 以HPV16、HPV53、HPV58为最常见。随着病情的发展, CIN Ⅰ期患者中检出19种HPV亚型, 以HPV16、HPV53、HPV33亚型为主。CIN Ⅱ期患者中检出19种HPV亚型, 以HPV16、HPV58、HPV51常见。CINⅢ型患者中检出17种HPV亚型, 以HPV16、HPV33、HPV58常见。宫颈癌患者中检出13种HPV亚型, 以HPV16、HPV18、HPV53常见。以上所有HPV亚型中, 低危亚型HPV42 (P = 0.02)和高危亚型HPV16 (P < 0.01)、HPV31 (P = 0.04)、、HPV52 (P < 0.01)、HPV53 (P < 0.01)、HPV56 (P = 0.04)、HPV58 (P = 0.01)、HPV66 (P = 0.05), 在不同级别宫颈病变中感染率的差异有统计学意义。见表 2。
HPV genotype | Cervicitis | CIN Ⅰ | CIN Ⅱ | CIN Ⅲ | Cervical cancer | χ2 | P |
HPV42 | 12.26 | 0.02 | |||||
Negative | 330(100.0) | 508(100.0) | 315(99.1) | 318(100.0) | 141(100.0) | ||
Positive | 0(0.0) | 0(0.0) | 3(0.9) | 0(0.0) | 0(0.0) | ||
HPV16 | 30.69 | < 0.01 | |||||
Negative | 318(96.4) | 470(92.5) | 288(90.6) | 283(89.0) | 115(81.6) | ||
Positive | 12(3.6) | 38(7.5) | 30(9.4) | 35(11.0) | 26(18.4) | ||
HPV31 | 10.13 | 0.04 | |||||
Negative | 327(99.1) | 494(97.2) | 315(99.1) | 315(99.1) | 141(100.0) | ||
Positive | 3(0.9) | 14(2.8) | 3(0.9) | 3(0.9) | 0(0.0) | ||
HPV52 | 14.452 | < 0.01 | |||||
Negative | 328(99.4) | 492(96.9) | 316(99.4) | 313(98.4) | 141(100.0) | ||
Positive | 2(0.6) | 16(3.1) | 2(0.6) | 5(1.6) | 0(0.0) | ||
HPV53 | 13.71 | < 0.01 | |||||
Negative | 320(97.0) | 479(94.3) | 310(97.5) | 314(98.7) | 134(95.0) | ||
Positive | 10(3.0) | 29(5.7) | 8(2.5) | 4(1.3) | 7(5.0) | ||
HPV56 | 10.34 | 0.04 | |||||
Negative | 327(99.1) | 491(96.7) | 315(99.1) | 314(98.7) | 139(98.6) | ||
Positive | 3(0.9) | 17(3.3) | 3(0.9) | 4(1.3) | 2(1.4) | ||
HPV58 | 14.09 | 0.01 | |||||
Negative | 319(96.7) | 472(92.9) | 306(96.2) | 308(96.9) | 139(98.6) | ||
Positive | 11(3.3) | 36(7.1) | 12(3.8) | 10(3.1) | 2(1.4) | ||
HPV66 | 9.31 | 0.05 | |||||
Negative | 327(99.1) | 496(97.6) | 313(98.4) | 317(99.7) | 141(100.0) | ||
Positive | 3(0.9) | 12(2.4) | 5(1.6) | 1(0.3) | 0(0.0) |
2.3 不同年龄患者中HPV感染亚型与不同级别宫颈病变的关系
本研究将人群按年龄分为4个组, 分别为15~30岁、31~45岁、45~60岁及≥61岁。各年龄组患者HPV感染状况与多重感染状况见表 3。可以看出, 虽然不同年龄组间HPV感染率的差异无统计学意义(χ2=3.30, P = 0.35), 但HPV感染率随着年龄的增加呈上升趋势。见表 3。
Age group | n | Positive HPV | Multiple infections | Infection rate (%) |
15-30 years | 287 | 78 | 13 | 27.2 |
31-45 years | 839 | 241 | 53 | 28.7 |
46-60 years | 445 | 134 | 23 | 30.1 |
≥61 years | 44 | 16 | 2 | 36.4 |
调整年龄因素后, HPV感染亚型与宫颈病变的关系见表 4。15~30岁年龄组中HPV45亚型感染与不同级别宫颈病变有关, 但由于阳性患者过少, 因此不做比较。31~45岁年龄组中HPV33 (P = 0.03)、HPV56 (P = 0.02)的感染与不同级别宫颈病变有关, 且CINⅠ期(3.1%)及宫颈癌(2.6%)患者中感染率较高, 而HPV33在CINⅠ期(4.6%)、CIN Ⅲ期(2.8%)患者中的感染率较高, 但在宫颈癌患者中的感染率较HPV33降低, 表明与HPV56相比, HPV33对宫颈癌发生的危险性有所减弱。46~60岁年龄组中HPV16 (P < 0.01)、HPV18 (P = 0.02)与不同级别宫颈病变有关, 且HPV16在CIN Ⅱ期(12.0%)、CIN Ⅲ期(16.9%)和宫颈癌(25.0%)患者中的感染率明显高于其他宫颈病变患者, HPV18在宫颈癌患者中感染率(9.1%)最高。≥61岁年龄组中HPV16与不同级别宫颈病变有关(P = 0.01), 且在CINⅡ期(50.0%)及宫颈癌(57.1%)患者中的感染率高于其他宫颈病变患者。
Age group | Cervicitis | CIN Ⅰ | CIN Ⅱ | CIN Ⅲ | Cervical cancer | χ2 | P |
15-30 years | |||||||
HPV45 | 10.45 | 0.03 | |||||
Negative | 53(100.0) | 106(99.1) | 62(100.0) | 52(100.0) | 12(92.3) | ||
Positive | 0(0.0) | 1(0.9) | 0(0.0) | 0(0.0) | 1(7.7) | ||
31-45 years | |||||||
HPV33 | 10.57 | 0.03 | |||||
Negative | 163(99.4) | 250(95.4) | 158(98.8) | 171(97.2) | 77(100.0) | ||
Positive | 1(0.6) | 12(4.6) | 2(1.2) | 5(2.8) | 0(0.0) | ||
HPV56 | 11.62 | 0.02 | |||||
Negative | 163(97.6) | 254(96.9) | 160(97.5) | 175(98.7) | 77(97.4) | ||
Positive | 1(2.4) | 8(3.1) | 0(2.5) | 1(1.3) | 0(2.6) | ||
46-60 years | |||||||
HPV16 | 23.92 | < 0.01 | |||||
Negative | 99(97.1) | 123(94.6) | 81(88.0) | 64(83.1) | 33(75.0) | ||
Positive | 3(2.9) | 7(5.4) | 11(12.0) | 13(16.9) | 11(25.0) | ||
HPV18 | 12.42 | 0.02 | |||||
Negative | 101(99.0) | 128(98.5) | 91(98.9) | 76(98.7) | 40(90.9) | ||
Positive | 1(1.0) | 2(1.5) | 1(1.1) | 1(1.3) | 4(9.1) | ||
≥61 years | |||||||
HPV6 | 10.23 | 0.04 | |||||
Negative | 11(100.0) | 9(100.0) | 3(75.0) | 13(100.0) | 7(100.0) | ||
Positive | 0(0.0) | 0(0.0) | 1(25.0) | 0(0.0) | 0(0.0) | ||
HPV16 | 14.38 | 0.01 | |||||
Negative | 11(100.0) | 9(100.0) | 2(50.0) | 11(84.6) | 3(42.9) | ||
Positive | 0(0.0) | 0(0.0) | 2(50.0) | 2(15.4) | 4(57.1) | ||
HPV33 | 10.23 | 0.04 | |||||
Negative | 11(100.0) | 9(100.0) | 3(75.0) | 13(100.0) | 7(100.0) | ||
Positive | 0(0.0) | 0(0.0) | 1(25.0) | 0(0.0) | 0(0.0) |
3 讨论
HPV是一种球形无包膜的DNA病毒, 具有高度宿主细胞特异性, 可引起多种增殖性上皮病变, 包括乳头状瘤(疣)和瘤样病变, 包括宫颈、阴道、阴茎和肛门癌症以及头颈部肿瘤等一系列恶性病变。其中近100%的宫颈癌, 90%的肛门癌, 40%的外阴、阴道及阴茎癌症, 12%的口咽癌, 3%的口腔癌归因于HPV感染[3]。而CIN水平可以反映宫颈癌发展的连续过程, 本研究调查不同HPV亚型感染的分布、与不同级别宫颈病变的关系以及不同年龄段HPV亚型在不同类型宫颈病变中的感染率, 探讨各HPV亚型对宫颈病变致病性的差异以及年龄因素对HPV致病性的影响, 为HPV所致宫颈癌的治疗和预防提供帮助。
本研究结果表明, HPV感染亚型以HPV16为主, 其次是HPV58。国际癌症研究协会的研究[4]结果显示, 世界范围内最常见的亚型为HPVl6和HPV18。而我国以HPV6、HPV18、HPV52、HPV58和HPV39常见[5]。宫颈病变中, 在我国HPV16较为常见, 长江以北地区以HPV16、HPV58及HPV52常见[6], 与本研究结果一致。
本研究结果表明, HPV感染率随年龄增加呈上升趋势。有研究[7]报道, HPV随年龄增加感染率上升, 与本研究结果一致。但也有文献[8-10]报道HPV感染高峰期在18~28岁, 感染率可达25%~30%, 30岁以下妇女高危HPV亚型感染率较高, 可达15%~46%, 35岁后呈5%~10%的高危HPV亚型持续感染状态。这可能是地区差异导致的HPV感染率年龄分布不同。
HPV感染是诱发宫颈癌的启动因素, 超过92%的宫颈癌组织携带HPV病毒[11], 其中以HPV16和HPV18常见。有研究[12]显示, HPV检出率会随病变程度呈上升趋势, 但未将HPV分为不同亚型进行分析。因此, 本研究探讨了不同HPV亚型在不同级别宫颈病变的感染情况。结果显示, 低危亚型HPV42 (P = 0.02), 高危亚型HPV16 (P < 0.01)、HPV31 (P = 0.04)、HPV52 (P < 0.01)、HPV53 (P < 0.01)、HPV56 (P = 0.04)、HPV58 (P = 0.01)及HPV66 (P = 0.05)在不同级别宫颈病变中的感染率存在统计学差异, HPV16、HPV31、HPV53及HPV58感染率较其他HPV亚型高。其中, HPV16感染者宫颈癌患病率较高, 且有统计学意义; 而HPV31及HPV58感染者中CINⅠ期患病率较高, 但宫颈癌患者中的感染率较低, 提示HPV16对宫颈癌的癌前病变作用较大, 而HPV31和HPV58对宫颈炎进展为宫颈癌的作用弱于HPV16。虽然HPV53的感染率较宫颈炎和CINⅠ期患者有所降低, 但在宫颈癌患者中的感染率显著上升, 表明HPV53对宫颈癌的发展仍然具有较强的作用。HPV53对宫颈病变的致病特点值得扩大样本量进行进一步研究。
有研究[13]显示, 年龄是HPV感染与宫颈疾病的相关因素, 且随年龄增加, HPV所致不同宫颈病变类型中宫颈癌构成比逐步上升, 其中以HPV16和HPV58致癌性最高。鉴于年龄因素会影响HPV感染与宫颈疾病的关系, 本研究在调整年龄后进一步分析HPV感染与宫颈疾病的关系。按年龄分层后的结果表明, HPV16与46岁以上女性的不同宫颈病变有关, 且31~45岁与46~60岁年龄组中CIN Ⅲ期患者的感染率最高, 其次为宫颈癌患者, 而在≥61岁年龄组宫颈癌患者中HPV16感染率最高。31~45岁女性以HPV33和HPV56感染为主, HPV33和HPV56感染率较高, 但患者大多处于宫颈癌前病变阶段, 宫颈癌的患病率较低; 46~60岁年龄组中HPV16和HPV18感染与不同宫颈病变有关, 而且宫颈癌患者中的感染率最高。而61岁以上女性中仍以HPV16感染为主, HPV6与HPV33感染尚处于较低水平, 由于样本量较低, 尚无法进行对比, 但仍不能忽视其作用, 需要进行进一步的调查研究。
综上所述, 本研究比较全面地评价了高危HPV亚型感染对宫颈病变, 尤其是对不同年龄组宫颈上皮内瘤变患者宫颈病变的不良影响, 从而进一步提示加强对高危HPV亚型感染的监测、预防及控制的必要性。
[1] |
SHRESTHA AD, NEUPANE D, VEDSTED P, et al. Cervical cancer prevalence, incidence and mortality in low and middle income countries:a systematic review[J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2018, 19(2): 319-324. DOI:10.22034/APJCP.2018.19.2.319 |
[2] |
LEE CJ, SUH EJ, KANG HT, et al. Induction of senescence-like state and suppression of telomerase activity through inhibition of HPV E6/E7 gene expression in cells immortalized by HPV16 DNA[J]. Exp Cell Res, 2002, 277(2): 173-182. DOI:10.1006/excr.2002.5554 |
[3] |
鲍彦平, 李霓, 王鹤, 等. 中国妇女子宫颈人乳头瘤病毒型别分布的Meta分析[J]. 中华流行病学杂志, 2007, 28(10): 941-946. DOI:10.3760/j.issn.0254-6450.2007.10.002 |
[4] |
SYRJ NEN S, PURANEN M. Human papillomavirus infections in children:the potential role of maternal transmission[J]. Crit Rev Oral Biol Med, 2000, 11(2): 259-274. DOI:10.1177/10454411000110020801 |
[5] |
SYRJ NEN S. HPV infections in children[J]. Papillomavirus Rep, 2003, 14(3): 93-110. DOI:10.1179/095741903235001425 |
[6] |
PARKIN DM, BRAY F. Chapter 2:the burden of HPV-related cancers[J]. Vaccine, 2006, 24(Suppl 3): S3/11-S3/25. DOI:10.1016/j.vaccine.2006.05.111 |
[7] |
杨赟平, 杨双双, 张莉萍. 重庆地区妇女高危亚型HPV感染现状及年龄的分层分布[J]. 重庆医学, 2013, 42(3): 249-250. DOI:10.3969/j.issn.1671-8348.2013.03.004 |
[8] |
WOODMAN CB, COLLINS S, WINTER H, et al. Natural history of cervical human papillomavirus infection in young women:a longitudinal cohort study[J]. Lancet, 2001, 357(9271): 1831-1836. DOI:10.1016/S0140-6736(00)04956-4 |
[9] |
金滢, 潘凌亚. 高危型人乳头瘤病毒检测在子宫颈病变筛查和处理中的意义及作用[J]. 中国医学科学院学报, 2007, 29(5): 691-696. DOI:10.3321/j.issn:1000-503x.2007.05.024 |
[10] |
BOSCH FX, MANOS MM, MU OZ N, et al. Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer:a worldwide perspective. International biological study on cervical cancer(IBSCC)study group[J]. J Natl Cancer Inst, 1995, 87(11): 796-802. DOI:10.1093/jnci/87.11.796 |
[11] |
王喜英. 人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌关系的研究进展[J]. 大同医学专科学校学报, 2006, 26(2): 35-47. |
[12] |
刘秀玉. 检测HPV与宫颈病变关系的探讨[J]. 中华肿瘤防治杂志, 2011, 18(9): 728. DOI:10.16073/j.cnki.cjcpt.2011.09.009 |
[13] |
周武, 陈占国, 陶志华, 等. 不同HPV亚型的多重感染和年龄因素与宫颈病变的关系[J]. 中国卫生检验杂志, 2008, 18(12): 2632-2634. DOI:10.3969/j.issn.1004-8685.2008.12.072 |