中国医科大学学报  2019, Vol. 48 Issue (7): 606-610, 614

文章信息

苗野, 阮强, 马艳萍
MIAO Ye, RUAN Qiang, MA Yanping
不同人乳头瘤病毒亚型感染与宫颈病变的相关性
Relationship between Infections of Different Human Papillomavirus Genotypes and Cervical Lesions
中国医科大学学报, 2019, 48(7): 606-610, 614
Journal of China Medical University, 2019, 48(7): 606-610, 614

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收稿日期:2018-10-31
网络出版时间:2019-07-15 10:59
不同人乳头瘤病毒亚型感染与宫颈病变的相关性
苗野 , 阮强 , 马艳萍     
中国医科大学附属盛京医院病毒研究室, 沈阳 110004
摘要目的 探讨不同人乳头瘤病毒(HPV)亚型感染与宫颈病变的关系以及不同年龄患者中HPV亚型感染与宫颈病变的关系。方法 回顾性分析于中国医科大学附属盛京医院就诊的1 615例宫颈病变患者的临床资料,统计分析不同HPV亚型的感染情况及其与宫颈病变的关系;并按不同年龄分层,分析不同HPV亚型感染与宫颈病变的关系。结果 HPV16亚型阳性检出率最高,HPV58、HPV53、HPV33次之。与宫颈病变有关的HPV亚型包括HPV16、HPV53、HPV58、HPV52、HPV42、HPV33、HPV56和HPV31。按不同年龄分层后,发现15~30岁患者中不同级别宫颈病变与HPV45有关,31~45岁患者中不同宫颈病变与HPV33、HPV56有关,46~60岁患者中不同宫颈病变与HPV16、HPV18有关,61岁以上患者中不同宫颈病变与HPV6、HPV16及HPV33有关。结论 30岁以上的女性应定期进行HPV检测,对宫颈病变进行筛检,以加强对宫颈癌的预防。
关键词人乳头瘤病毒    年龄分布    宫颈病变    
Relationship between Infections of Different Human Papillomavirus Genotypes and Cervical Lesions
Virus Research Laboratory, Shengjing Hospital, China Medical University, Shenyang 110004, China
Abstract: Objective To investigate the relationships between infections of different human papillomavirus(HPV)genotypes and cervical lesions and between infections of different HPV genotypes and cervical lesions in patients of different ages. Methods A total of 1 615 patients with cervical lesions who were admitted to Shengjing Hospital, China Medical University were retrospectively analyzed. The infection status of different HPV genotypes and their relationships with different types of cervical lesions were analyzed. The relationships between the infections of different HPV genotypes and cervical lesions were analyzed according to age stratification. Results The positivity rate of HPV16 was the highest, followed by those of HPV58, HPV53, and HPV33. HPV genotypes related to cervical lesions included HPV16, HPV53, HPV58, HPV52, HPV42, HPV33, HPV56, and HPV31. After stratification by age, we found that different grades of cervical lesions were related to HPV45 in 15- to 30-year-old patients; to HPV33 and HPV56 in 31- to 45-year-old patients; to HPV16 and HPV18 in 46- to 60-year-old patients; and to HPV6, HPV16, and HPV33 in patients older than 61 years of age. Conclusion Women older than 30 years of age should be regularly tested for HPV and screened for cervical lesions in order to strengthen the prevention of cervical cancer.
Keywords: human papillomavirus    age distribution    cervical lesion    

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一, 其发病率和死亡率在世界女性肿瘤中均位居第二, 仅次于乳腺癌。据2012年全球肿瘤统计数据显示, 每年有527 600例宫颈癌新发病例和265 700例宫颈癌死亡病例[1]。宫颈癌是由宫颈上皮病变逐步发展而成, 即宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN), 其发展过程包括CIN Ⅰ期、CIN Ⅱ期和CIN Ⅲ期。人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)为一种嗜黏膜和皮肤上皮性病毒, 自1949年STRAUSSZA在电镜下首次发现HPV以来, 目前已鉴定出其有100多种亚型, 可分为高危亚型(如HPV16、HPV18、HPV31等)和低危亚型(如HPV6、HPV11、HPV42等)。各亚型与体内特定感染部位和病变有关, 且不同亚型病毒所致疾病类型也不同。目前有研究[2]显示, HPV感染尤其是高危HPV亚型持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生发展的必要条件。本研究通过分析宫颈病变与不同HPV感染亚型的关系, 以及不同年龄患者中宫颈病变与不同HPV感染亚型的关系, 探讨HPV感染与宫颈病变分布、各HPV亚型感染与宫颈病变的关系以及不同年龄段不同HPV亚型致病力的差异, 旨在为HPV感染所致宫颈癌提供防治依据, 并为HPV疫苗接种提供指导。

1 材料与方法 1.1 研究对象

回顾性分析2015年5月1日至2016年5月31日期间于中国医科大学附属盛京医院妇产科就诊的1 615例宫颈病变女性患者的临床资料, 患者年龄为16~85岁, 所有患者均自愿接受HPV检测。

1.2 方法

1.2.1 标本采集和处理

标本采集应在非月经期内进行, 取样前24 h内禁性行为, 3 d内未使用阴道内药物或未进行阴道冲洗。由各病房固定的妇产科医生采用配套专用宫颈刷(广东省潮州凯普生物化学有限公司), 置于宫颈口鳞柱交接处, 沿顺时针旋转3~5周获得所有受检者足够的移行区上皮细胞后取出, 放入3 mL专用细胞保存液中, 沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断, 旋紧管盖, 做好样本标记, 立即送检或放置4 ℃冰箱中, 3 d内检验。

1.2.2 检测方法

采用广东省潮州凯普生物化学有限公司的HPV核酸扩增分型检测试剂盒, 应用基因扩增及导流杂交技术, 通过反向点杂交方法, 利用包被有型特异性探针的杂交膜与HPV基因组DNA扩增产物进行杂交反应, 并采用碱性磷酸酶系统定性检测。

1.2.3 结果判断

肉眼观察检测结果, 阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点, 根据膜条HPV分型分布图, 判断阳性点为何种HPV亚型。对21种HPV亚型进行分类, 包括6种低危亚型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、CP8304)和15种高危亚型(HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68)。有2种或2种以上者为多重感染, 对多重感染者, 各亚型阳性率重复计算。

1.2.4 临床诊断

以组织病理学诊断为金标准, 诊断研究对象CIN水平, 宫颈癌病变过程为初期宫颈炎、CINⅠ期、CINⅡ期、CINⅢ期及宫颈癌确诊, 由2名病理学医师重复阅片, 对诊断进行质量控制。

1.3 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行统计学分析, 分类资料以患病率和百分比进行描述, 采用χ2检验进行比较, P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 HPV感染情况和亚型分布

1 615例女性患者中, 474例HPV检测阳性, 总感染率为29.35%。其中64例(3.96%)为低危HPV亚型感染, 436例(26.98%)为高危HPV亚型感染。

HPV各亚型阳性检出率见表 1。在所有高危HPV亚型感染中, 除HPV35亚型外, 其余高危亚型均被检出。其中以HPV16亚型阳性检出率最高, 阳性检出率为8.73%, 占高危亚型的32.34%。而HPV58、HPV53、HPV33次之, 其阳性检出率分别为4.40%、3.59%、2.79%, 分别占高危亚型的16.28%、13.30%、10.32%。低危HPV亚型感染中, CP8304亚型检出率最高, 阳性检出率为1.73%, 占低危亚型的43.75%。

表 1 不同HPV亚型的阳性检出率 Tab.1 Positive detection rate of different HPV genotypes
HPV genotype n Positive detection rate (%)
HPV6 13 0.80
HPV11 18 1.11
HPV44 4 0.25
CP8304 28 1.73
HPV16 141 8.73
HPV18 23 1.42
HPV31 23 1.42
HPV33 45 2.79
HPV39 29 1.80
HPV42 3 0.19
HPV43 2 0.12
HPV45 6 0.37
HPV51 35 2.17
HPV52 25 1.55
HPV53 58 3.59
HPV56 29 1.80
HPV58 71 4.40
HPV59 11 0.68
HPV66 21 1.30
HPV68 9 0.56

2.2 不同HPV感染亚型与不同级别宫颈病变的关系

本研究中, 宫颈炎患者共检出16种HPV亚型, 以HPV16、HPV53、HPV58为最常见。随着病情的发展, CIN Ⅰ期患者中检出19种HPV亚型, 以HPV16、HPV53、HPV33亚型为主。CIN Ⅱ期患者中检出19种HPV亚型, 以HPV16、HPV58、HPV51常见。CINⅢ型患者中检出17种HPV亚型, 以HPV16、HPV33、HPV58常见。宫颈癌患者中检出13种HPV亚型, 以HPV16、HPV18、HPV53常见。以上所有HPV亚型中, 低危亚型HPV42 (P = 0.02)和高危亚型HPV16 (P < 0.01)、HPV31 (P = 0.04)、、HPV52 (P < 0.01)、HPV53 (P < 0.01)、HPV56 (P = 0.04)、HPV58 (P = 0.01)、HPV66 (P = 0.05), 在不同级别宫颈病变中感染率的差异有统计学意义。见表 2

表 2 不同HPV亚型在不同级别宫颈病变中的分布情况[n(%)] Tab.2 Distribution of different HPV genotypes in cervical lesions of different grades [n(%)]
HPV genotype Cervicitis CIN Ⅰ CIN Ⅱ CIN Ⅲ Cervical cancer χ2 P
HPV42           12.26 0.02
Negative 330(100.0) 508(100.0) 315(99.1) 318(100.0) 141(100.0)    
Positive 0(0.0) 0(0.0) 3(0.9) 0(0.0) 0(0.0)    
HPV16           30.69 < 0.01
Negative 318(96.4) 470(92.5) 288(90.6) 283(89.0) 115(81.6)    
Positive 12(3.6) 38(7.5) 30(9.4) 35(11.0) 26(18.4)    
HPV31           10.13 0.04
Negative 327(99.1) 494(97.2) 315(99.1) 315(99.1) 141(100.0)    
Positive 3(0.9) 14(2.8) 3(0.9) 3(0.9) 0(0.0)    
HPV52           14.452 < 0.01
Negative 328(99.4) 492(96.9) 316(99.4) 313(98.4) 141(100.0)    
Positive 2(0.6) 16(3.1) 2(0.6) 5(1.6) 0(0.0)    
HPV53           13.71 < 0.01
Negative 320(97.0) 479(94.3) 310(97.5) 314(98.7) 134(95.0)    
Positive 10(3.0) 29(5.7) 8(2.5) 4(1.3) 7(5.0)    
HPV56           10.34 0.04
Negative 327(99.1) 491(96.7) 315(99.1) 314(98.7) 139(98.6)    
Positive 3(0.9) 17(3.3) 3(0.9) 4(1.3) 2(1.4)    
HPV58           14.09 0.01
Negative 319(96.7) 472(92.9) 306(96.2) 308(96.9) 139(98.6)    
Positive 11(3.3) 36(7.1) 12(3.8) 10(3.1) 2(1.4)    
HPV66           9.31 0.05
Negative 327(99.1) 496(97.6) 313(98.4) 317(99.7) 141(100.0)    
Positive 3(0.9) 12(2.4) 5(1.6) 1(0.3) 0(0.0)    

2.3 不同年龄患者中HPV感染亚型与不同级别宫颈病变的关系

本研究将人群按年龄分为4个组, 分别为15~30岁、31~45岁、45~60岁及≥61岁。各年龄组患者HPV感染状况与多重感染状况见表 3。可以看出, 虽然不同年龄组间HPV感染率的差异无统计学意义(χ2=3.30, P = 0.35), 但HPV感染率随着年龄的增加呈上升趋势。见表 3

表 3 不同年龄组女性患者中HPV的感染率 Tab.3 Infection rate of HPV in female patients of different ages
Age group n Positive HPV Multiple infections Infection rate (%)
15-30 years 287 78 13 27.2
31-45 years 839 241 53 28.7
46-60 years 445 134 23 30.1
≥61 years 44 16 2 36.4

调整年龄因素后, HPV感染亚型与宫颈病变的关系见表 4。15~30岁年龄组中HPV45亚型感染与不同级别宫颈病变有关, 但由于阳性患者过少, 因此不做比较。31~45岁年龄组中HPV33 (P = 0.03)、HPV56 (P = 0.02)的感染与不同级别宫颈病变有关, 且CINⅠ期(3.1%)及宫颈癌(2.6%)患者中感染率较高, 而HPV33在CINⅠ期(4.6%)、CIN Ⅲ期(2.8%)患者中的感染率较高, 但在宫颈癌患者中的感染率较HPV33降低, 表明与HPV56相比, HPV33对宫颈癌发生的危险性有所减弱。46~60岁年龄组中HPV16 (P < 0.01)、HPV18 (P = 0.02)与不同级别宫颈病变有关, 且HPV16在CIN Ⅱ期(12.0%)、CIN Ⅲ期(16.9%)和宫颈癌(25.0%)患者中的感染率明显高于其他宫颈病变患者, HPV18在宫颈癌患者中感染率(9.1%)最高。≥61岁年龄组中HPV16与不同级别宫颈病变有关(P = 0.01), 且在CINⅡ期(50.0%)及宫颈癌(57.1%)患者中的感染率高于其他宫颈病变患者。

表 4 各年龄组患者HPV亚型与宫颈癌病变的相关性分析[n(%)] Tab.4 Relationship between different HPV genotypes and cervical lesions of different grades in different age groups [n(%)]
Age group Cervicitis CIN Ⅰ CIN Ⅱ CIN Ⅲ Cervical cancer χ2 P
15-30 years              
  HPV45           10.45 0.03
Negative 53(100.0) 106(99.1) 62(100.0) 52(100.0) 12(92.3)    
Positive 0(0.0) 1(0.9) 0(0.0) 0(0.0) 1(7.7)    
31-45 years              
  HPV33           10.57 0.03
Negative 163(99.4) 250(95.4) 158(98.8) 171(97.2) 77(100.0)    
Positive 1(0.6) 12(4.6) 2(1.2) 5(2.8) 0(0.0)    
  HPV56           11.62 0.02
Negative 163(97.6) 254(96.9) 160(97.5) 175(98.7) 77(97.4)    
Positive 1(2.4) 8(3.1) 0(2.5) 1(1.3) 0(2.6)    
46-60 years              
  HPV16           23.92 < 0.01
Negative 99(97.1) 123(94.6) 81(88.0) 64(83.1) 33(75.0)    
Positive 3(2.9) 7(5.4) 11(12.0) 13(16.9) 11(25.0)    
  HPV18           12.42 0.02
Negative 101(99.0) 128(98.5) 91(98.9) 76(98.7) 40(90.9)    
Positive 1(1.0) 2(1.5) 1(1.1) 1(1.3) 4(9.1)    
≥61 years              
  HPV6           10.23 0.04
Negative 11(100.0) 9(100.0) 3(75.0) 13(100.0) 7(100.0)    
Positive 0(0.0) 0(0.0) 1(25.0) 0(0.0) 0(0.0)    
  HPV16           14.38 0.01
Negative 11(100.0) 9(100.0) 2(50.0) 11(84.6) 3(42.9)    
Positive 0(0.0) 0(0.0) 2(50.0) 2(15.4) 4(57.1)    
  HPV33           10.23 0.04
Negative 11(100.0) 9(100.0) 3(75.0) 13(100.0) 7(100.0)    
Positive 0(0.0) 0(0.0) 1(25.0) 0(0.0) 0(0.0)    

3 讨论

HPV是一种球形无包膜的DNA病毒, 具有高度宿主细胞特异性, 可引起多种增殖性上皮病变, 包括乳头状瘤(疣)和瘤样病变, 包括宫颈、阴道、阴茎和肛门癌症以及头颈部肿瘤等一系列恶性病变。其中近100%的宫颈癌, 90%的肛门癌, 40%的外阴、阴道及阴茎癌症, 12%的口咽癌, 3%的口腔癌归因于HPV感染[3]。而CIN水平可以反映宫颈癌发展的连续过程, 本研究调查不同HPV亚型感染的分布、与不同级别宫颈病变的关系以及不同年龄段HPV亚型在不同类型宫颈病变中的感染率, 探讨各HPV亚型对宫颈病变致病性的差异以及年龄因素对HPV致病性的影响, 为HPV所致宫颈癌的治疗和预防提供帮助。

本研究结果表明, HPV感染亚型以HPV16为主, 其次是HPV58。国际癌症研究协会的研究[4]结果显示, 世界范围内最常见的亚型为HPVl6和HPV18。而我国以HPV6、HPV18、HPV52、HPV58和HPV39常见[5]。宫颈病变中, 在我国HPV16较为常见, 长江以北地区以HPV16、HPV58及HPV52常见[6], 与本研究结果一致。

本研究结果表明, HPV感染率随年龄增加呈上升趋势。有研究[7]报道, HPV随年龄增加感染率上升, 与本研究结果一致。但也有文献[8-10]报道HPV感染高峰期在18~28岁, 感染率可达25%~30%, 30岁以下妇女高危HPV亚型感染率较高, 可达15%~46%, 35岁后呈5%~10%的高危HPV亚型持续感染状态。这可能是地区差异导致的HPV感染率年龄分布不同。

HPV感染是诱发宫颈癌的启动因素, 超过92%的宫颈癌组织携带HPV病毒[11], 其中以HPV16和HPV18常见。有研究[12]显示, HPV检出率会随病变程度呈上升趋势, 但未将HPV分为不同亚型进行分析。因此, 本研究探讨了不同HPV亚型在不同级别宫颈病变的感染情况。结果显示, 低危亚型HPV42 (P = 0.02), 高危亚型HPV16 (P < 0.01)、HPV31 (P = 0.04)、HPV52 (P < 0.01)、HPV53 (P < 0.01)、HPV56 (P = 0.04)、HPV58 (P = 0.01)及HPV66 (P = 0.05)在不同级别宫颈病变中的感染率存在统计学差异, HPV16、HPV31、HPV53及HPV58感染率较其他HPV亚型高。其中, HPV16感染者宫颈癌患病率较高, 且有统计学意义; 而HPV31及HPV58感染者中CINⅠ期患病率较高, 但宫颈癌患者中的感染率较低, 提示HPV16对宫颈癌的癌前病变作用较大, 而HPV31和HPV58对宫颈炎进展为宫颈癌的作用弱于HPV16。虽然HPV53的感染率较宫颈炎和CINⅠ期患者有所降低, 但在宫颈癌患者中的感染率显著上升, 表明HPV53对宫颈癌的发展仍然具有较强的作用。HPV53对宫颈病变的致病特点值得扩大样本量进行进一步研究。

有研究[13]显示, 年龄是HPV感染与宫颈疾病的相关因素, 且随年龄增加, HPV所致不同宫颈病变类型中宫颈癌构成比逐步上升, 其中以HPV16和HPV58致癌性最高。鉴于年龄因素会影响HPV感染与宫颈疾病的关系, 本研究在调整年龄后进一步分析HPV感染与宫颈疾病的关系。按年龄分层后的结果表明, HPV16与46岁以上女性的不同宫颈病变有关, 且31~45岁与46~60岁年龄组中CIN Ⅲ期患者的感染率最高, 其次为宫颈癌患者, 而在≥61岁年龄组宫颈癌患者中HPV16感染率最高。31~45岁女性以HPV33和HPV56感染为主, HPV33和HPV56感染率较高, 但患者大多处于宫颈癌前病变阶段, 宫颈癌的患病率较低; 46~60岁年龄组中HPV16和HPV18感染与不同宫颈病变有关, 而且宫颈癌患者中的感染率最高。而61岁以上女性中仍以HPV16感染为主, HPV6与HPV33感染尚处于较低水平, 由于样本量较低, 尚无法进行对比, 但仍不能忽视其作用, 需要进行进一步的调查研究。

综上所述, 本研究比较全面地评价了高危HPV亚型感染对宫颈病变, 尤其是对不同年龄组宫颈上皮内瘤变患者宫颈病变的不良影响, 从而进一步提示加强对高危HPV亚型感染的监测、预防及控制的必要性。

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