中国医科大学学报  2018, Vol. 47 Issue (7): 577-580

文章信息

王金行, 姜繁明, 刘柏新, 宋鉴清, 刘宇思
WANG Jinhang, JIANG Fanming, LIU Baixin, SONG Jianqing, LIU Yusi
轻链表达缺失的IgD型多发性骨髓瘤免疫表型分析
Immunophenotypic Analysis of IgD Multiple Myeloma with Loss of Light Chain Expression
中国医科大学学报, 2018, 47(7): 577-580
Journal of China Medical University, 2018, 47(7): 577-580

文章历史

收稿日期:2018-01-15
网络出版时间:2018-06-27 13:48
轻链表达缺失的IgD型多发性骨髓瘤免疫表型分析
中国医科大学附属第一医院检验科, 沈阳 110001
摘要目的 探讨临床少见的轻链表达缺失的IgD型多发性骨髓瘤(MM)患者实验室检查特点。方法 回顾性分析中国医科大学附属第一医院2015年6月至2017年5月收治的55例IgD型MM患者的临床资料。结果 IgD型MM患者阳性检出率约占同期MM患者的4.1%,λ型轻链所占比例均高于同期其他类型MM,差异有统计学意义(P < 0.05);55例IgD型MM患者中有49例为λ轻链型IgD型(89.1%,49/55),而κ轻链型IgD型仅1例(1.8%,1/55),轻链表达缺失IgD型5例(9.1%,5/55)。轻链表达缺失与完整IgD型MM患者的IgG、IgA和IgM含量均正常或降低。5例轻链表达缺失IgD型MM患者血清蛋白电泳无M峰出现,2例尿本周蛋白阳性。55例MM患者IgD泳道均有特异性的抗原抗体沉淀带,5例轻链表达缺失IgD型MM患者,轻链κ、λ泳道无抗原抗体沉淀带。结论 临床初诊疑似MM和IgD型MM复诊患者进行免疫固定电泳时务必加IgD泳道,以避免将IgD型MM误诊为轻链型MM或将轻链表达缺失IgD型MM患者漏诊。
关键词多发性骨髓瘤    免疫球蛋白    轻链缺失    免疫固定电泳    
Immunophenotypic Analysis of IgD Multiple Myeloma with Loss of Light Chain Expression
Department of Laboratory Medicine, The First Hospital, China Medical University, Shenyang 110001, China
Abstract: Objective To characterize rare IgD multiple myeloma(MM)patients with loss of light chain. Methods Retrospective analysis was conducted for 55 IgD MM patients hospitalized in the First Hospital of China Medical University from June 2015 to May 2017. Results IgD MM positive rate was approximately 4.1%, whereas the proportion of λ light chain was significantly higher than that of other types in the same period (P < 0.05). Among 55 IgD MM, 49 were λ light chain (89.1%, 49/55), only one was κ light chain (1.8%, 1/55), and five were loss of light chain(9.1%, 5/55). IgG, IgA, and IgM expression were all normal or decreased in IgD MM with loss of light chain and complete IgD MM. Five IgD MM patients with loss of light chain had no monoclonal protein peak, of which two patients were urinary Bence Jones protein positive. All 55 patients had specific antigen-antibody precipitation in the IgD lane; however, five IgD MM with loss of light chain had no precipitation in the light chain lane. Conclusion For newly diagnosed MM patients and IgD-diagnosed MM patients, immunofixation electrophoresis of IgD should be included to avoid misdiagnosis of IgD MM as light chain MM or a missed diagnosis of IgD MM with loss of light chain.

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞恶性克隆增殖性疾病,占血液系统恶性肿瘤的10%[1]。IgD型MM是一种少见的骨髓瘤亚型,占所有MM的1.0%~2.5%[2-3],国内报道为4%~8%[4-5]。轻链表达缺失的IgD型MM国内外罕见报道。本研究回顾性分析了我院收治的5例轻链表达缺失IgD型MM的临床特点、实验检查、诊断分型,以期发现其特点,避免临床上漏诊及误诊。

1 材料与方法 1.1 临床资料

2015年6月至2017年5月期间我院门诊及住院患者中,通过免疫固定电泳(immunofixation electrophoresis,IFE)共检出MM患者1 355例,其中男708例,女647例,年龄13~94岁,平均(54.97±15.46)岁。IgD型MM患者55例,男31例,女24例,年龄23~81岁,平均(54.05±15.31)岁;其中5例轻链表达缺失,其临床表现包括骨痛(1例)、贫血(2例)、消瘦(1例)、浮肿(4例)等。所有患者均参照2017年修订的《中国多发性骨髓瘤诊治指南》 [6]进行诊治和疗效评价,按Durie-Salmon(DS)分期和国际分期系统(ISS)分期标准进行分期。

1.2 检测方法

1.2.1

血清免疫球蛋白测定:采用美国Heckman公司IMMAGE免疫化学分析仪及配套试剂,采用散射比浊法进行自动定量测定IgG、IgA、IgM和κ、λ轻链的含量。

1.2.2

血清蛋白电泳:采用英国海伦娜公司V-8全自动临床毛细管电泳仪及配套试剂,进行血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis,SPE)测定;采用美国Helena公司的Spife4000电泳仪及配套试剂,进行尿本周蛋白(urinary Bence Jones protein,U-BJP)测定。

1.2.3

免疫固定电泳:采用美国Helena公司的Spife3000电泳仪及配套试剂进行测定,取患者血清用0.9%生理盐水分别按1︰3、1︰5稀释。特别注意加IgD泳道。具体操作包括琼脂糖凝胶电泳、免疫沉淀及显色3个部分。免疫沉淀即应用固定剂和各型免疫球蛋白及轻链抗血清,加于凝胶表面的泳道上,经孵育使固定剂和抗血清在凝胶内渗透并扩散,若泳道有对应的抗原存在,则在适当位置可形成抗原抗体复合物并沉淀下来。

1.3 统计学分析

采用SPSS 11.0统计软件进行统计学分析。计数资料的组间比较采用χ2检验。P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 血清IFE特征及轻链所占比例

IFE检测结果显示,1 355例各类型MM患者中IgD型55例,阳性检出率约占同期MM患者的4.1%(55/1 355),且λ型轻链所占比例均高于同期其他类型MM,差异有统计学意义(P < 0.05);55例IgD型MM患者中,λ型49例(89.1%),κ型1例(1.8%),轻链缺失5例(9.1%)。见表 1

表 1 血清免疫固定电泳分型及所占比例[n(%)] Tab.1 Serum immunofixation electrophoresis Ig typing and proportion [n (%)]
Type λ κ Loss of light chain Total
IgG 229(37.3) 385(62.7) 0(0.0) 614(45.3)
IgA 136(38.7) 202(57.5) 13(3.7) 351(25.9)
IgM 16(26.7) 44(73.3) 0(0.0) 60(4.4)
IgD 49(89.1) 1) 1(1.8) 5(9.1) 55(4.1)
Free type 98(50.5) 96(49.5) 0(0.0) 194(14.3)
Double cloned type 81(100.0) 0(0.0) 81(6.0)
1)compared with IgG,IgA and IgM,P < 0.05.

2.2 血清免疫球蛋白定量

55例IgD型MM患者血清免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均降低或正常。50例完整、5例轻链表达缺失的IgD型MM患者实验室检查结果见表 2

表 2 55例IgD型MM的免疫球蛋白定量 Tab.2 Immunoglobulin quantitative analysis of 55 patients with IgD MM
Item Results(g/L) Reference interval
Complete IgD(n = 50)
  IgG 6.71±3.76 7.51-15.60
  IgA 0.54±0.81 0.82-4.53
  IgM 0.19±0.15 0.46-3.04
IgD with loss of light chain(n = 5)
  IgG 6.70±2.75 7.51-15.60
  IgA 0.43±0.52 0.82-4.53
  IgM 0.33±0.23 0.46-3.04

2.3 血清蛋白电泳M带及U-BJP检出率

血清蛋白电泳、U-BJP检测结果显示,55例IgD型MM患者中,5例轻链表达缺失的IgD型MM患者血清蛋白电泳无M峰,U-BJP阳性2例。见图 1表 3

A, serum protein electrophoresis of complete IgD MM, γ lane with M peak; B, serum protein electrophoresis of IgD MM with loss of light chain, γ lane without M peak. 图 1 IgD型MM患者血清蛋白电泳结果 Fig.1 Serum protein electrophoresis of the patients with IgD MM

表 3 5例轻链缺失IgD型MM患者血清蛋白电泳及尿本周氏蛋白检查结果(%) Tab.3 Serum protein electrophoresis and urinary Bence Jones protein levels in five IgD MM patients with loss of light chain (%)
Patient’s number ALb α1 α2 β γ M U-BJP
1 58.2 10.3 11.5 8.0 12.1 - -
2 69.5 5.3 9.5 10.4 5.3 - -
3 67.3 4.4 5.0 8.5 14.9 - +
4 53.7 8.1 9.7 19.1 9.5 - +
5 66.2 8.8 11.2 8.9 5.0 - -
ALb,albumin;U-BJP,urinary Bence Jones protein.

2.4 免疫固定电泳分型

IFE结果显示,55例IgD型MM患者在IgD泳道均呈现异常浓集区带,即特异性的抗原抗体沉淀带。5例轻链表达缺失的IgD型MM患者κ、λ泳道均无抗原抗体沉淀带,即轻链表达缺失。见图 2

A, immunofixation electrophoresis of λ light chain IgD MM; B, immunofixation electrophoresis of IgD MM with loss of light chain. 图 2 IgD型MM患者免疫固定电泳结果 Fig.2 Immunofixation electrophoresis of IgD MM patients

3 讨论

MM患者的实验室检查中以M蛋白鉴定最有诊断价值。所谓M蛋白带即单一的免疫球蛋白增殖在血清蛋白电泳时表现为1条狭窄浓集的异常区带。根据增生的浆细胞分泌的免疫球蛋白重链的不同,可将MM分为IgG型、IgA型、IgM型、IgD型和IgE型。其中IgG型、IgA型、IgM型较为常见,IgD型少见,而IgE型非常罕见[2, 7]。本研究结果表明,我院门诊及住院的MM患者中IgD型占所有类型MM的4.1%,远低于IgG的比例(45.3%)。IgD型是一种比较罕见类型的MM,且很多医疗单位只有IgG、IgA、IgM的免疫固定电泳,而没有开展IgD的免疫固定电泳,因此,IgD型极容易被漏诊或误诊为轻链型MM。本研究发现IgD型MM患者的IgG、IgA和IgM免疫球蛋白含量多为正常或减低,但由于试剂限制,无法进行IgD定量。然而,当某种免疫球蛋白特异性升高时,其他正常成分的免疫球蛋白就会相应地减少[8],因此推断IgD免疫球蛋白含量应升高。

本研究中,SPE在5例轻链缺失IgD型MM患者M峰不明显或无M峰时未检出M带,诊断率不高。考虑其原因可能有:(1)SPE方法检测单克隆蛋白的最低浓度是0.13 g/L,敏感度较血清免疫固定电泳低,而IgD在人体内含量极低,平均0.03 g/L[9],IgD型MM患者即使血清中IgD水平较正常明显升高也不一定能够达到出现M峰的蛋白浓度要求,故血清蛋白未能见到M峰;因此不能通过SPE诊断IgD型MM,或换言之,仅通过SPE检查会导致IgD型MM的漏诊和误诊;(2)IgD型MM患者即使血清中IgD水平较正常明显升高,但血清免疫球蛋白仍可在正常范围内,甚至可以低于正常,本研究中大多数患者血清球蛋白是正常或偏低的,这是因为血清中IgD含量非常低,在其单克隆增生时,即使IgD成倍增加,其增加的量也远远比不上由于IgD单克隆增生所致的对其他类型免疫球蛋白的抑制作用,所以有些患者血清免疫球蛋白总量可以正常甚至低于正常。

本研究中,免疫固定电泳分型结果发现IgA型MM轻链表达缺失13例。IgA型MM较常见且免疫球蛋白IgA含量比较高,不容易发生漏诊和误诊。55例IgD型MM患者IgD泳道均呈现异常浓集区带,即特异性的抗原抗体沉淀带,但其中5例轻链表达缺失IgD型MM,其κ、λ泳道均无抗原抗体沉淀带,即轻链表达缺失,血清IFE时加IgD泳道可以避免漏诊或误诊为游离轻链型MM,提高了IgD型MM的诊断率。

对于临床初诊疑似MM及复诊的IgD型患者,实验室检查如发现免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均正常或减低,血清蛋白电泳M峰不明显或无M峰时,在进行免疫固定电泳时务必加IgD泳道,以避免IgD型MM误诊为游离轻链型MM或将轻链表达缺失IgD型MM的患者漏诊。

参考文献
[1]
RAJKUMAR SV, KUMAR S. Multiple myeloma:diabnosis and treatment[J]. Mayo Clin Proc, 2005, 80(10): 1371-1382. DOI:10.1016/j.mayocp.2015.11.007
[2]
PANDEY S, KYLE RA. Unusual myelomas:a review of IgD and IgE variants[J]. Oncology (Willistonpark), 2013, 27(8): 798-803.
[3]
KIM MK, SUH C, LEE DH, et al. Immunoglobulin D multiple myeloma:response to therapy, survival, and prognostic factors in 75 patients[J]. Ann Oncol, 2011, 22(2): 411-416. DOI:10.1093/annonc/mdq393
[4]
张利方, 阎有功, 汪薇, 等. IgD型多发性骨髓瘤免疫学特征分析[J]. 临床血液学杂志, 2015(3): 403-405.
[5]
彭嵘, 候健, 付卫卓, 等. 34例IgD型多发性骨髓瘤骨监床特点分析[J]. 中华血液学杂志, 2011, 32(3): 204-205.
[6]
中国医师协会血液科医师分会, 中华医学会血液学分会, 中国医师协会多发性骨髓瘤专业委员会. 中国多发性骨髓瘤诊治指南(2017年修订)[J]. 中华内科杂志, 2017, 56(11): 866-870. DOI:10.3760/cma.j.issn.0578-1426.2017.11.021
[7]
DE SANTIS E, MASI S, CORDONE I, et al. Follow-up of IgD-κ multiple myeloma by monitoring free light chains and total heavy chain IgD:a case report[J]. Oncol Lett, 2016, 12(3): 1884-1888. DOI:10.3892/ol.2016.4869
[8]
王金行, 赵越, 刘柏新, 等. 血清免疫固定电泳在多发性骨髓瘤诊断中的意义[J]. 广东医学, 2011, 32(15): 2018-2020. DOI:10.3969/j.issn.1001-9448.2011.15.034
[9]
陈美兰, 李娟, 刘俊茹, 等. IgD型多发性骨髓瘤18例临床特征和生存分析[J]. 中国实用内科杂志, 2011, 31(11): 868-870.