2021, Vol. 32扩展功能
文章信息
- 何亚明, 季恒青, 彭国雄, 肖汉森, 涂涛田, 张应, 余湛, 刘宗玲, 王秀娟, 李明
- HE Ya-ming, JI Heng-qing, PENG Guo-xiong, XIAO Han-sen, TU Tao-tian, ZHANG Ying, YU Zhan, LIU Zong-ling, WANG Xiu-juan, LI Ming
- 金龟子绿僵菌CQMa421杀蟑饵剂药效测定与现场应用研究
- Efficacy of Metarhizium anisopliae CQMa421 bait against cockroaches: A laboratory and field study
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2021, 32(5): 633-636
- Chin J Vector Biol & Control, 2021, 32(5): 633-636
- 10.11853/j.issn.1003.8280.2021.05.025
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文章历史
- 收稿日期: 2021-05-27
2 重庆大学基因工程研究中心/重庆市杀虫真菌农药工程技术研究中心, 重庆 400030;
3 重庆清道夫环保服务有限公司, 重庆 400014;
4 重庆市利铭有害生物防制有限公司, 重庆 400043;
5 重庆华运虫害防制技术研究所有限责任公司, 重庆 400011;
6 重庆竟达环保技术服务有限公司, 重庆 400013
2 Chongqing University Genetic Engineering Research Center/Chongqing Engineering Research Center for Fungal Insecticides, Chongqing 400030, China;
3 Chongqing Chindoff Co., Ltd, Chongqing 400014, China;
4 Chongqing Liming Pest Control Co., Ltd, Chongqing 400043, China;
5 Chongqing Huayun Pest Control Institute of Technology Co., Ltd, Chongqing 400011, China;
6 Chongqing Jingda Environmental Protection Technique Service Co., Ltd, Chongqing 400013, China
蜚蠊是世界性的重要公共卫生害虫，近年来监测发现，我国人居环境中以德国小蠊(Blattella germanica)为绝对优势种[1-2]。德国小蠊侵害宾馆饭店、商场超市、医院学校等各行各业，破坏食品、药材，还可引起过敏和哮喘[3]；此外，还通过携带多种细菌、病毒和寄生虫卵传播多种疾病[4-6]，严重危害人类健康[7-10]。化学防治能迅速降低其密度，当前仍是防治德国小蠊的主要手段，但大量和频繁地使用化学药物，已带来严重抗药性和环境污染问题[11-12]。
目前，使用生物制剂防制蜚蠊正逐渐成为治理其侵害的最优策略，绿僵菌是重要的昆虫病原真菌，已开发多个杀虫真菌制剂，广泛用于防治德国小蠊[13]。目前，我国登记的用于防治卫生害虫的杀虫真菌农药甚少，未得到广泛应用。金龟子绿僵菌CQMa421为广谱菌株，能有效侵染德国小蠊。本研究采用不同浓度与不同施药方法，测试金龟子绿僵菌CQMa421饵剂防治德国小蠊持效时间与防治效果，为真菌杀虫剂在防治卫生害虫中的应用提供参考。
1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 菌株金龟子绿僵菌CQMa421(保藏号：CGMCC No. 4607)，分离自重庆市秀山水稻田感病稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)幼虫[14]，由重庆大学基因工程研究中心提供。
1.1.2 试虫 1.1.2.1 室内药效测定选择重庆市疾病预防控制中心饲养的德国小蠊敏感品系。
1.1.2.2 现场药效测定选择国内优势种德国小蠊作为实验对象。
1.2 饵剂配制参照Hong等[14]方法，生产金龟子绿僵菌CQMa421分生孢子收集孢子粉；将CQMa421孢子粉与其他辅料(香油、麦麸和猪油炼油)充分混合、搅拌均匀，按实验设计配制成不同含量的CQMa421饵剂，放入黑色聚酯塑料盒(重庆大学基因工程研究中心提供)中，5 g/盒，备用。设不含CQMa421孢子粉饵剂作为空白对照。
1.3 实验方法 1.3.1 实验条件 1.3.1.1 室内药效测定实验室温度(26±1) ℃，相对湿度(60±10)%。
1.3.1.2 现场药效测定2019-2020年，选择5-6月温度与相对湿度适宜德国小蠊孳生繁殖的季节开展。
1.3.2 实验设计 1.3.2.1 室内药效测定设计5个不同浓度处理组，有效成分含量分别为8×105、4×106、2×107、1×108和5×108孢子/g，采用放入30只试虫的标准玻璃方箱装置分别投放饵剂，重复4次，同时设立正常饲养的空白对照。
1.3.2.2 现场药效测定设计4个不同用药量处理组，分别为每2.5、5、10和20 m2放置1个饵剂，每个处理组选择3个现场，饵剂被破坏或消耗殆尽及时补充；同时选择3个现场作为空白对照，不使用杀蟑饵剂与其他防治蜚蠊处理措施。现场环境包括食堂、火锅店、中餐馆，面积不少于100 m2，采用粘捕法监测德国小蠊密度不低于10只/张。
1.3.3 实验结果计算 1.3.3.1 室内药效测定实验持续12 d，每日观察试虫死亡情况并记录，计算12 d的死亡率(P)与校正死亡率(P1)。
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实验持续30 d，于第0、3、7、14、30天分别监测现场德国小蠊密度，计算相关密度指数(RPI)与相对密度下降率(Rd)。
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采用Excel 2010软件记录整理实验数据，SPSS 25.0软件对数据进行统计分析，计算毒理回归线的半数致死时间(LT50)、半数致死浓度(LC50)和90%致死浓度(LC90)及其95%的可信区间(95%CI)，采用χ2检验分析不同组别间死亡率的差异，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 室内药效实验室内实验结果表明，不同含量的金龟子绿僵菌CQMa421饵剂均能侵染德国小蠊，有效成分含量不同，喂食12 d后德国小蠊的死亡率差异有统计学意义(χ2=46.937，P < 0.05)；含量为2×107、1×108和5×108孢子/g时，喂食12 d后德国小蠊死亡率均值分别达到85.00%、90.00%和93.33%，3组不同含量12 d死亡率差异均无统计学意义(P > 0.05)；随着金龟子绿僵菌CQMa421孢子含量越高，LT50越短(表 1)。喂食后12 d金龟子绿僵菌CQMa421对德国小蠊LC50和LC90的有效成分浓度分别为9.78×105和1.08×108孢子/g。见表 2。
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根据室内药效实验结果，现场药效测定使用的饵剂有效成分浓度定为1×108孢子/g。使用饵剂前监测德国小蠊密度均 > 10.00只/张，最高为46.00只/张，最低为11.43只/张。使用饵剂30 d后，有6个现场德国小蠊密度 < 10.00只/张，有9个现场德国小蠊密度较使用饵剂前有所下降(表 3)；平均密度显示，各处理组均较使用饵剂前有所下降，其中2.5 m2处理组的下降趋势较为明显，从33.95只/张降至5.09只/张；而空白对照组的密度从19.54只/张上升至42.39只/张；进一步统计表明，处理30 d后，每2.5、5、10和20 m2放置1个饵剂处理组相对密度下降率分别达到93.22%、68.25%、68.14%和63.54%。见表 3。
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绿僵菌是昆虫专性寄生菌，其杀虫机制是真菌通过体壁侵入害虫体内，感染害虫而导致其死亡。在国际和国内成功用于多种农业害虫和森林害虫防治，主要大面积应用于防治稻飞虱、松毛虫、玉米螟等农林业害虫，在卫生害虫防治方面应用极少。
本研究对绿僵菌杀蟑饵剂在不同浓度、不同环境采用不同施药方法防治德国小蠊方面进行了研究。室内药效实验结果表明，随着孢子含量越高，灭蟑效果越好，绿僵菌饵剂的有效浓度在1×108孢子/g时，对蜚蠊投饵后12 d死亡率达到90.00%，按照饵剂室内评价指标，该饵剂可判定为药效结果B级，达到了农药登记用卫生杀虫剂室内药效实验评价标准。现场药效实验结果表明，有效成分含量为1×108孢子/g、2.5㎡组相对密度下降率 > 80.00%，现场使用效果显著，证实绿僵菌可用于制作饵剂，在适宜的浓度与使用条件下，用于蜚蠊的防治。
现场药效测定选择的场地均为餐饮行业，该类场所蜚蠊密度常年较高，且防治难度较大，适宜开展蜚蠊饵剂现场药效实验。2.5、5、10和20㎡处理组现场蜚蠊平均密度均有不同程度下降，但个别组蜚蠊密度下降不明显或无下降，原因可能与投饵场所内蜚蠊易于获取食物，取食饵剂较少有关，说明在使用杀蟑饵剂进行蜚蠊防治的同时，要注重区域内的环境卫生与食物的管理。各处理组的相对密度下降率比较，2.5㎡组 > 5㎡组 > 10㎡组 > 20㎡组，同样面积的场地内，使用杀蟑饵剂点位越多，蜚蠊相对密度下降率越高，说明杀蟑饵剂的使用要遵循“点多、面广”的投药原则，这有助于指导绿僵菌杀蟑饵剂产品厂家改进产品剂型，规格，以制定适宜的饵剂使用方法。
由于真菌杀虫剂杀虫效果好，不会产生类似化学农药的毒副作用，目标害虫难以产生抗性，且对目标害虫毒性专一，不杀伤自然界中的害虫天敌，对人畜无害，不污染环境，其研发与应用将成为未来卫生杀虫剂发展的方向。在病媒昆虫防制方面具有广阔的市场应用前景，具有良好的经济效益和社会效益。但针对本产品仍然需要探索改进剂型剂量，考虑药物复配以提高杀灭蜚蠊的速度，发挥最好药物效果。
志谢 现场试验得到重庆利铭、竟达、清道夫、华运等有害生物服务公司人员的大力支持，一并志谢利益冲突 无
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