白蛉属于昆虫纲、双翅目、白蛉科（Phlebotomidae）。全世界已知5属600余种，我国已达40余种，隶属3个属，即白蛉属（Phlebotomus）、司蛉属（Sergenteyia）和异蛉属（Idiophlebotomus）^[1]。河南省曾是我国黑热病的严重流行地区，中华白蛉（Ph. chinensis）是河南省黑热病主要传播媒介，全球气候变暖、城乡宜居环境变迁、新农村畜牧业发展及饲养宠物行为习惯，为黑热病复发带来潜在风险，2016年2－3月林州市原康镇三宗庙村和栗园村相继发生2例黑热病确诊病例，经中国疾病预防控制中心（CDC）寄生虫病预防控制所确认为河南省新发现的活动性犬源性黑热病疫点^[2]，这是河南省自1976年实现基本消灭黑热病后，时隔44年本地复发的黑热病疫情。为掌握三门峡市黑热病媒介白蛉生态分布现状，预防控制黑热病复发风险，2018年7－8月对三门峡市白蛉进行了调查。

根据三门峡市丘陵地区的地理位置、地域特点，在湖滨区、陕县区、灵宝市、卢氏县、渑池县和义马市辖区内，选取1~2个自然村。调查环境为农村土窑洞、土坯瓦房、砖土混建结构的人居室、牛、羊、猪牲畜圈、鸡舍等生境。

采用诱虫灯（深圳市某公司生产）诱捕法，于2018年7月15日至8月8日（19：00－07：00），在人居室、房屋、窑洞及其周围的牛舍、羊舍、猪舍、鸡舍5种生境，每个生境离地面高度1.5 m、临墙壁0.5 m处布放充电式诱虫灯1盏，每个地区每种生境调查1次。将不同场所诱捕的白蛉冷冻后分拣，装管标记保存。分拣白蛉装于指形管内，统计白蛉密度〔只/（灯·夜）〕，并记录温、湿度等气候条件。

随机挑选新鲜白蛉样本置于解剖镜下，持针解剖头部的口腔、咽甲及雌蛉尾部的受精囊，移至显微镜下观察并拍照，根据形态特征初步鉴定至种。再将捕获标本送至中国CDC寄生虫病预防控制所进一步鉴定。

取白蛉的头部和尾部，以10%氢氧化钾（KOH）溶液消化后，根据白蛉的咽甲、受精囊或者雄性尾器特征鉴定其种类^[3-4]。其余部分用于提取基因组DNA。

按照Krueger和Hennings^[5]方法单只白蛉提取基因组DNA，按照Hebert等^[6]方法扩增线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因，在2%琼脂糖凝胶上进行电泳检测。克隆和测序：利用AXYGEN回收试剂盒（Axygen Scientific，Inc.，USA）对PCR产物进行纯化，由生工生物工程（上海）股份有限公司进行序列双向测定，以其一致序列为准。

获得的DNA序列使用GenBank BLAST工具进行序列分析、DNA序列检索。

应用SPSS 22.0软件进行统计分析，采用χ²检验比较白蛉在各组间的分布差异，检验水准为α=0.05。

调查结果显示，三门峡市所辖各县（市、区）均有黑热病媒介白蛉孳生分布，以卢氏县淤泥河村诱捕白蛉最多（484只，占35.35%），其次为灵宝市王会村，占28.71%，湖滨区磁钟村诱捕白蛉最少，占0.66%（表 1）。采用Fisher确切概率法比较白蛉的分布差异，不同地区不同生境白蛉的分布差异有统计学意义（χ²=571.957，P < 0.001）。

表 1 2018年7－8月河南省三门峡市不同地区白蛉调查结果 Table 1 Investigation results of sandflies in various areas of Sanmenxia, Henan province from July to August in 2018

表选项

调查白蛉的栖息生境为土窑洞型（灵宝市、陕州区、湖滨区）、土坯瓦房型（卢氏县）及砖土混建型（渑池县、义马市）的牲畜圈，经χ²检验，3种不同生境白蛉分布差异有统计学意义（χ²=341.209，P < 0.001）。见表 2。

表 2 河南省三门峡市不同生境白蛉调查结果 Table 2 Investigation results of sandflies in various habitats of Sanmenxia, Henan province

表选项

诱虫灯诱捕法共采集白蛉1 369只，平均密度为38.03只/（灯·夜）。其中牛圈诱捕白蛉最多，为537只，占39.22%，平均诱捕白蛉89.50只/（灯·夜）；其次为鸡舍（374只，占27.32%），人居室占比较少（87只，占6.36%）。见表 2。

诱捕的1 369只白蛉中，雌蛉920只，雄蛉449只，雌雄比为2.05∶1。经χ²检验，5种调查生境中白蛉雌雄分布差异有统计学意义（χ²=262.201，P < 0.001）（表 3）。两两比较结果显示，人居室、猪圈、羊圈中雌蛉占比较高，但三组间差异无统计学意义（χ²=2.727，P=0.256）；其次是牛圈，鸡舍则以雄蛉占比较高。

表 3 河南省三门峡市不同生境白蛉雌雄分布调查结果 Table 3 Investigation results of sex ratios of sandflies in various habitats of Sanmenxia, Henan province

表选项

白蛉标本送中国CDC寄生虫病预防控制所进行鉴定，随机选取陕州区庙沟村采集的白蛉30只，经形态学与分子生物学鉴定，2种方法鉴定结果相符：22只为中华白蛉，8只为鳞喙司蛉（Se. squamirostris）；对灵宝市调查采集的19只白蛉进行解剖分类鉴定，中华白蛉10只，许氏司蛉（Se. khawi）9只。

白蛉是黑热病的传播媒介，河南省1958年宣布在全省基本消除黑热病，1973－1999年27年间共发现5例本地感染病例和3例输入病例，但未引起继发传播，表明河南省黑热病的流行已经终止，基本消除的成果得到进一步巩固^[7]。三门峡市陕州区（原陕县）曾是河南省黑热病严重流行区，20世纪初年发病率在0.1%以上^[8]。2003－2004年，雒进才和张可斌^[9]用人工捕蛉法调查发现，陕州区人居窑、牛羊窑有蛉率分别为2.87%和39.02%。本研究用诱虫灯诱捕法对三门峡地区白蛉分布、不同生态环境白蛉密度及孳生地进行调查，三门峡市各县（市、区）均有白蛉孳生栖息，一旦有输入病例，存在黑热病传播的潜在风险。

本次调查显示，农村鸡舍白蛉密度为62.33只/（灯·夜），猪圈白蛉密度为47.83只/（灯·夜），均高于各类生境总体平均密度〔38.03只/（灯·夜）〕，猪圈墙群材料用水泥砖（填充砖）混砌成毛墙，顶棚离墙敞开以便通风，属于调查的砖土混建结构生境，砖土混建结构与土窑洞、土坯瓦房生境白蛉密度差异有统计学意义（χ²=341.209，P < 0.001），主要因素为：农村黄土暴露，猪舍围墙的填充砖为蜂窝状，缝隙较多，长时间风吹日晒形成了黄土附着砖混围墙、温湿度适宜的白蛉孳生栖息地。这成为丘陵地带黑热病媒介白蛉新的孳生环境，应引起关注。

本次调查的5种生境中共捕获白蛉1 369只，雌雄比为2.05∶1，5种生境中白蛉雌雄分布差异有统计学意义（χ²=262.201，P < 0.001）。，雌蛉均远高于雄蛉，与陈翰明等^[10]调查结果相近〔雌蛉在窑洞和院落中远高于雄蛉，占93.15%（204/219）〕，说明人居室、猪圈和羊圈环境为白蛉吸血场所。在牛圈、鸡舍生境中，白蛉雌雄比为1.17∶1，雄蛉数量占比较高，提示牛圈、鸡舍是白蛉的主要繁衍孳生地。因此预防控制黑热病复发，一要做好人居室、猪圈、羊圈环境的化学防治，用氟氯氰菊酯杀虫剂滞留喷洒控制雌蛉叮咬传播；二要加强猪圈、鸡舍环境综合治理，彻底清除白蛉孳生地；三要注重宿主动物-家犬白蛉防治，由于家犬是白蛉的宿主动物，通过白蛉→家犬→白蛉传播链传播黑热病的可能性很大^[11]。

随着中国经济的发展，西部的一些山区和荒漠的旅游资源必将进一步开发，这些原来人迹罕至的地带，极有可能是白蛉栖息和活动的地方，或是利什曼病（黑热病）的疫源地^[12]。犬源型黑热病地区近野栖的中华白蛉是黑热病的传播媒介^[13]。近几年，陕州区开发利用地坑院土窑洞旅游资源，吸引大量游客，给三门峡市黑热病防控带来新的挑战，因此，需外防黑热病输入，内控传播媒介孳生；旅游和犬源型环境白蛉监测和治理等课题也需进一步探索研究。

利益冲突  无