白纹伊蚊（Aedes albopictus），又称“亚洲虎蚊”，是四川省常见的蚊种之一，可传播登革热、基孔肯雅热和黄热病等多种传染病^[1]。我国白纹伊蚊是登革热的主要传播媒介，2019年受全球登革热疫情暴发影响，我国报告登革热病例数再创新高，达到22 599例，报告本地病例16 794例，四川、江西、湖南省和重庆市等多地均出现登革热本地疫情，严重威胁着人民健康^[2]。

目前，尚无有效的疫苗和药物预防登革热，有效控制媒介蚊虫是防控登革热疫情的唯一有效途径，而化学防治是蚊虫防控的主要措施之一，但近年随着杀虫剂的广泛使用，伊蚊抗药性问题日益突出^[3]。为全面了解自贡市白纹伊蚊季节消长及其抗药性现状，从而有效控制蚊媒密度，科学防控登革热疫情，我们于2019年5－10月开展了白纹伊蚊密度和抗药性监测工作。

白纹伊蚊野外种群分别于2019年6－7月采自自贡市（东、南、西、北、中5个方位）的居民区、公园、绿化带和树林（或竹林），使用幼虫富集法和人诱成蚊吸蚊器吸取法采集到的白纹伊蚊幼蚊和成蚊带回实验室混合饲养繁殖一代，取F1代Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼蚊用于幼蚊抗药性测定，取F1代羽化后3~5 d，未吸血的成蚊用于成蚊抗药性测定。

92.7%敌敌畏、87.4%双硫磷、92%高效氯氰菊酯、99%氯菊酯、99.6%溴氰菊酯原药和0.10%溴氰菊酯药膜、0.40%高效氯氰菊酯药膜、0.50%马拉硫磷药膜、0.05%残杀威药膜、阴性对照CK药膜均由中国疾病预防控制中心（CDC）传染病预防控制所提供。药品溶剂使用上海化学试剂公司生产的丙酮（分析纯）。

按照《全国病媒生物监测方案（试行）》蚊密度监测方法，采用BI法于2019年5－10月在檀木林街道、黄桷村、团结村和尖山村4个方位的居民区、学校、公园、医院等生境开展伊蚊密度监测，每月中旬开展1次。对选取的4个方位调查不少于100户，每个家庭、集体宿舍/单位办公室酒店的2个房间、农贸市场/花房/外环境/室内公共场所等按每30 m²定义为1户，检查记录各生境中所有小型积水容器及其幼蚊孳生情况，收集阳性容器中的幼蚊进行种类鉴定，计算BI。

2019年5－10月在檀木林街道、荣边镇、卧龙湖周边的居民区、竹林和建筑工地3类生境，选择避风遮阴处放置蚊帐，在白纹伊蚊的活动高峰期（15：00－17：00）诱集者位于内部封闭蚊帐中暴露小腿，收集者利用电动吸蚊器在两层蚊帐之间收集停落在蚊帐上的伊蚊，时间持续30 min，5－10月每月开展1次，每次每生境2帐次。

采用世界卫生组织（WHO）推荐的幼虫浸渍法^[4]。以丙酮为溶剂将原药配置成10 mg/ml的母液，通过预实验确定待测药剂浓度范围，使用丙酮将待测药剂倍比稀释为7个浓度梯度，在250 ml烧杯中加入脱氯自来水149 ml，滴入已配置好的药液1 ml，玻璃棒搅匀并做好标记，将另一烧杯中的20~25只Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼蚊和50 ml脱氯自来水倒入上述烧杯中，混合均匀。以1 ml丙酮+199 ml脱氯自来水作为空白对照。室内保持（26±1）℃，24 h后检查并记录试虫死亡情况。死亡判定标准为以针或尖头镊子轻轻触动幼蚊头部或尾部呼吸管，反应迟钝且不能浮出水面或呈麻痹痉挛濒死状态。每组浓度重复3次，实验过程中试虫化蛹则不计入实验试虫数，对照组死亡率 > 20%视为无效，重做实验；对照死亡率在5%~20%使用Abbott公式校正；对照死亡率 < 5%则不需校正。

采用诊断计量法，按WHO推荐的成蚊接触筒法进行操作。将恢复筒安装在隔板的一面，吸蚊管吸取20~25只健康成蚊（羽化后3~5 d，未吸血）吹入恢复筒内，关闭隔板，在接触筒一端纱布上贴好标签，做好标记，在隔板另一面装上已衬贴药纸的接触筒，将恢复筒里的健康成蚊吹入接触筒，迅速关上隔板，将筒平放，即开始计算接触时间，接触60 min，完毕后抽开隔板将蚊虫轻吹回恢复筒，关上隔板，取下接触筒，将恢复筒直放，观察并记录成蚊击倒情况，用浸有5%葡萄糖溶液的棉花团置于纱布网上，室温（25±2）℃，接触24 h后观察并记录成蚊死亡情况。每组实验重复5次，同时设置阴性对照组。

白纹伊蚊幼蚊的抗药性水平用抗性倍数（R/S）表述，R/S=野外种群LC₅₀/敏感品系LC₅₀，其中敏感品系对双硫磷等杀虫剂的敏感性数据由中国CDC传染病预防控制所媒介生物控制室提供。抗性判定标准按照中国CDC抗药性基线划分，敏感品系和所测样本之间95%可信区间不重叠，且R/S < 3为敏感，3≤R/S < 10为低抗，10≤R/S < 40为中抗，R/S≥40为高抗。

白纹伊蚊成蚊抗药性水平按照《蚊虫抗药性检测方法生物测定法》GB/T 26347－2010规定：“在诊断剂量下蚊虫死亡率 > 98%为敏感种群（S）；死亡率在80%~98%为可疑抗性种群（M）；死亡率 < 80%为抗性种群（R）”进行评价。

利用Excel 2007和SPSS 19.0软件对监测结果进行统计分析，采用χ²检验计算不同容器中白纹伊蚊平均阳性率间的差异，采用改良寇氏法（Karber氏法）计算幼蚊的半数致死浓度（LC₅₀）及其95%可信区间（CI）、毒力回归方程和抗性倍数、成蚊的1 h击倒率和24 h致死率。

2019年自贡市白纹伊蚊幼蚊和成蚊活动高峰期均在7－10月，全年监测点BI平均值为8.50，帐诱指数平均为4.50只/（顶·h）。幼蚊和成蚊密度均在9月达到峰值，BI值为20.00，帐诱指数为9.00只/（顶·h）（图 1）。2019年调查的不同容器中白纹伊蚊平均阳性率差异无统计学意义（χ²=8.094，P=0.231），其中闲置容器白纹伊蚊幼蚊阳性率最高，为11.19%，贮水池、缸、盆的白纹伊蚊幼蚊阳性率最低，为3.13%。见表 1。

图 1 2019年四川省自贡市白纹伊蚊密度 Figure 1 Density of Aedes albopictus in Zigong of Sichuan province, 2019

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表 1 2019年四川省自贡市不同容器中白纹伊蚊阳性率 Table 1 Positive rate of Aedes albopictus larvae in different containers in Zigong of Sichuan province, 2019

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白纹伊蚊幼蚊对氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、双硫磷、敌敌畏5种常用杀虫剂的LC₅₀分别为0.071、0.012、0.006、0.003和0.050 mg/L。与实验室敏感品系对比，自贡市白纹伊蚊幼蚊对氯菊酯、溴氰菊酯和高效氯氰菊酯的抗性倍数分别为39.13、25.99和11.21倍，属于中等抗性；对双硫磷和敌敌畏的抗性倍数分别为2.46和1.24倍，属于敏感。见表 2。

表 2 2019年四川省自贡市白纹伊蚊幼蚊对5种杀虫剂的抗性测定结果 Table 2 Resistance of Aedes albopictus larvae to 5 insecticides in Zigong of Sichuan province, 2019

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白纹伊蚊雌成蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、马拉硫磷和残杀威的24 h致死率分别为70.67%、87.50%、98.11%和100%。白纹伊蚊雄成蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、马拉硫磷和残杀威的24 h致死率分别为72.37%、92.31%、100%和100%。自贡市白纹伊蚊雌蚊与雄蚊对几种常见杀虫剂的抗性结果基本一致，均对溴氰菊酯产生抗性，对高效氯氰菊酯为可疑抗性，对马拉硫磷和残杀威敏感。各实验组伊蚊性别对比发现除残杀威组外雌蚊1 h击倒率和24 h致死率均低于雄蚊。见表 3、4。

表 3 2019年四川省自贡市白纹伊蚊雌成蚊对4种杀虫剂的抗性测定结果 Table 3 Resistance of female adult Aedes albopictus mosquitoes to 4 insecticides in Zigong of Sichuan province, 2019

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表 4 2019年四川省自贡市白纹伊蚊雄成蚊对4种杀虫剂的抗性测定结果 Table 4 Resistance of male adult Aedes albopictus mosquitoes to 4 insecticides in Zigong of Sichuan province, 2019

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自贡市地处四川盆地南部，自然条件优越，属亚热带湿润季风气候，雨量充沛，适宜白纹伊蚊等多种病媒生物的孳生繁殖。白纹伊蚊作为自贡市的优势蚊种之一，广泛分布于居民区、竹林、公园和轮胎堆放处等存在中小型积水的场所，且密度较高。2019年由于雨水增多，自贡市白纹伊蚊BI最高时达到20.00，帐诱指数达到9.00只/（顶·h），提示存在登革热传播的高风险^[5]。自贡市历史上虽未发现过登革热本土病例，但由于人员流动和全球登革热疫情影响，存在输入性登革热病例引起本地传播和暴发的风险，因此，将白纹伊蚊密度控制在不足为害的水平对防控登革热疫情，保护人民生命安全具有重要意义。

四川省白纹伊蚊密度峰值普遍出现在7或8月，2019年6－7月自贡市白纹伊蚊成蚊和幼蚊密度相对较低，成蚊和幼蚊密度峰值均在9月，这可能与2019年自贡市降雨相对迟缓，降雨高峰主要集中在8、9月有关，降雨是制约蚊密度的重要因素之一^[6-7]。从积水容器种类白纹伊蚊幼蚊阳性率情况来看，闲置容器（碗、瓶、缸、罐等）的白纹伊蚊幼蚊阳性率较高，提示在开展爱国卫生运动清除伊蚊孳生地时，应重点清理闲置容器、竹筒、树洞、明渠、废旧轮胎、盆景水生植物、绿化带小积水等，有效降低蚊虫密度，从而降低登革热传播风险。

自贡市白纹伊蚊对几种常见杀虫剂产生了不同程度的抗药性。幼蚊对3种常见拟除虫菊酯类杀虫剂（氯菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯）均产生了中度抗性，对氯菊酯的抗性倍数达39.13倍，接近高度抗性。成蚊抗药性实验发现：如果成蚊对该药品产生抗性，试虫击倒后仍可能恢复，如溴氰菊酯组与高效氯氰菊酯组，如果对该药品敏感，试虫即使未击倒也可能死亡，如马拉硫磷组，提示成蚊接触筒法中1 h击倒率和24 h致死率也可能是反映蚊虫抗药性情况的重要指标之一。监测结果还显示雌蚊击倒率和死亡率均小于雄蚊，这可能与雌雄蚊的生活习性有关，雄蚊仅以植物汁液为生，多生活在野外，与人类生活接触较少，接触到化学杀虫剂的机会也相对较少。

自贡市白纹伊蚊幼蚊和成蚊的抗药性结果基本一致，对几种常见的拟除虫菊酯类杀虫剂产生了抗性，对部分有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂敏感。该结果与湖北省、福建省厦门市、四川省其他地市的监测结果基本一致，如内江、成都市^[8-11]，与陕西、浙江省^[12-13]等地差异明显，这可能与地区间化学杀虫剂的使用不同有关。抗药性的产生是一个连续且缓慢发生的过程，科学地使用杀虫剂能延缓甚至使抗性衰退，如近几年，随着环境治理和化学杀虫剂的合理使用，自贡市白纹伊蚊的抗药性与2015年相比整体呈现下降趋势^[14]。

随着化学杀虫剂抗药性的产生及人们对环保的重视，蚊虫防制技术的研究将日益向绿色、环保、高效的方向发展^[15]。政府应积极组织、广泛动员群众开展以清除孳生地为主的环境治理工作，推广物理防治或生物防治方法，同时结合蚊虫密度和抗药性监测结果合理制定防制计划和药品储备方案，在发生登革热疫情时优先选用抗药性低的药物，交替使用不同作用机制或不同类型的杀虫剂，这对控制和延缓自贡市蚊虫抗药性的发展、保护人民群众生命安全具有重要意义。

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