发热伴血小板减少综合征（severe fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS）是由布尼亚病毒目（Bunyavirales）白纤病毒科（Phenuiviridae）布尼亚病毒属（banyangvirus）的Huaiyangshan布尼亚病毒（SFTSV）引起的一种新发疾病，其临床表现主要为高热、乏力等全身反应，发病早期血常规检测多有白细胞（WBC）和血小板（PLT）减少，病例因多器官损害死亡，病死率可达10%~30%^[1-2]。山东省是该病的重要疫区，4－10月为该病的发病高峰，病例主要分布在山区丘陵地带的农村地区，病例高度散发。2019年6－7月威海市文登区A乡镇某村1月内连续报告3例病例，而且先后死亡，造成重大公共卫生影响。为了解本次疫情的基本特征及危险因素，对病例进行了现场流行病学调查，并采集健康人、动物和媒介标本进行检测。

采用山东省疾病预防控制中心（CDC）制定的调查问卷，以面对面访谈的方式进行个案调查。调查问卷包括人口学信息、发病情况、临床表现和流行病学史等内容。访谈病例家属及村委会负责人，详细了解相关信息，调查过程中病例及其家属均知情同意。

使用促凝管采集病例、健康人（含病例家属）及动物血标本3~5 ml，离心后，取血清分装至2 ml血清管中，置-80 ℃冰箱保存，待实验室检测。采用布旗法在病例住宅周围及户外活动场所采集野外游离蜱；用镊子采集动物体表寄生蜱；做好标本采样记录，鉴定种类后，每只蜱标本为一组，研磨成悬液，置-80 ℃冰箱保存，待实验室检测。

病例、健康人、动物血标本及蜱研磨液均采用RNeasy Mini Kit试剂盒（Qiagen，美国，cat.no：74104）提取核酸；实时荧光定量PCR（Real-time RT-PCR）检测采用SFTSV核酸定量检测试剂盒（广州达安基因生物科技有限公司），操作步骤严格按说明书进行，避免实验室污染。

健康人血清标本分别采用发热伴血小板减少综合征病毒IgM检测试剂盒和发热伴血小板减少综合征病毒IgG检测试剂盒检测病毒特异性IgM和IgG抗体，试剂盒均为中山生物工程有限公司产品，操作步骤按照说明书进行。动物血标本采用双抗原夹心法检测病毒特异性总抗体，包被用病毒核衣壳蛋白（NP）和辣根过氧化物酶标记的NP蛋白（NP-HRP），由中国CDC病毒病预防控制所出血热室提供。

采用SPSS 20.0软件进行统计分析，不同组间调查对象血清抗体阳性率差异比较采用χ²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

3例病例首发症状多为畏寒、高热、乏力等全身反应，2例病例伴胃肠道症状，后期出现意识障碍和出血表现，最终因多器官损害，救治无效死亡，病例从发病到入院的时间间隔分别为5、4和1 d，从入院到确诊时间间隔分别为1、1和5 d，从发病到死亡的时间间隔分别为9、6和10 d。入院检查，WBC降低、PLT减少、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）升高，提示多器官损害。实验室确诊病例血标本病毒载量分别为1.39×10⁴、1.28×10⁵和3.34×10⁴ TCID₅₀/ml，见表 1。

表 1 山东省威海市文登区A乡镇某村3例病例临床表现及流行特征 Table 1 Clinical manifestations and epidemiological characteristics of 3 cases in a village of a town, Wendeng district, Weihai, Shandong province, China

表选项

通过病例主动搜索，近1个月内未发现其他发热病例，3例病例均为65岁以上老年女性，居住在村庄的不同位置，但均位于村边，住房与农田直线距离均＜50 m，相互间距离较远，病例1发病前20 d曾到山上农田劳作，3例病例发病前活动范围主要为村内和自家菜园，无外出旅游史，平时的活动主要为洗衣、做饭，发病前2周均无共同的生活、生产以及其他接触史。家属述无蜱咬伤史，无皮肤破损史，见表 1。

共采集健康人血清169份，采用ELISA法分别检测病毒特异性IgM和IgG抗体，其中IgM抗体检测均为阴性；IgG抗体阳性7份，阳性率为4.14%，经统计学分析，各年龄组抗体阳性率差异有统计学意义（χ²＝6.987，P＝0.030），年龄越大抗体阳性率越高。性别、是否饲养动物、是否户外劳作组间差异无统计学意义，见表 2。

表 2 山东省威海市文登区A乡镇某村健康人血清抗体检测情况 Table 2 Detection of serum antibodies in healthy people in a village of a town, Wendeng district, Weihai, Shandong province, China

表选项

采集动物血标本69份，采用ELISA法检测病毒特异性总抗体，其中羊血标本28份，抗体阳性率为32.14%（9/28）；犬血标本5份，抗体阳性率为20.00%（1/5），貉子、鸡、猫动物血标本抗体检测均为阴性，经统计学分析，不同动物抗体阳性率差异有统计学意义（χ²＝13.263，P＝0.010），见表 3。所有血标本采用Real- time RT-PCR病毒特异性核酸检测均为阴性。

表 3 山东省威海市文登区A乡镇某村动物血清抗体检测结果 Table 3 Detection results of animal serum antibodies in a village of a town, Wendeng district, Weihai, Shandong province, China

表选项

共捕获蜱6只，其中游离蜱1只，寄生蜱5只，均从犬体表捕获，经鉴定均为长角血蜱（Haemaphysalis iongicornis），采用Real-time RT-PCR病毒特异性核酸检测均为阴性。

山东省自2010年开展该病的监测工作，发病数和发病率呈现逐年上升趋势。该病主要通过蜱叮咬传播，在无防护条件下接触病例的血液和体液标本也可感染，导致人传人聚集性事件发生^[3-4]。山东省SFTS流行特征与辽宁、河南、安徽、湖北省等疫情高发省份基本一致^[5-8]，发病有较明显的区域性，病例高度散发，主要集中在鲁东（烟台、威海市）和鲁中地区（济南、泰安市）的山区、丘陵地带，从既往监测情况分析，除人传人聚集性事件外，基本无同一村庄短期内出现2例以上病例的情况；5－7月为发病高峰，与蜱的活动时间相一致；发病人群主要为40岁以上中老年人，男女性别间差异无统计学意义，考虑与农村年轻人群均外出打工，而该年龄组人群是从事农业活动的主要人群，暴露机会较多有关。本次调查的3例病例均为65岁以上老年女性，并居住于同一村庄，发病时间较集中，且均因救治无效死亡，此类事件尚属首次，但是从发病时间和发病前的接触史调查，排除人传人感染的可能。发病的主要原因推测与居住的环境相关，3例病例均居住在村边与农田的距离较近，住宅周围有闲置土地，杂草丛生，菜园多位于周边农田内，特殊的生活环境使其暴露于蜱叮咬的机会增加。

Gai等^[9]关于SFTS病程及病例死亡危险因素的研究，将发病过程分为3个时期，即发热期、多器官损害期和恢复期，该研究发现病后的7~13 d为影响该病预后的关键期，持续的高病毒血症是指示疾病恶化甚至死亡的关键指标，出现中枢神经系统症状、出血表现、多器官衰竭、弥散性血管内凝血（DIC）是病例死亡的危险因素。本次调查3例病例从发病到死亡的时间间隔均在10 d以内，病情进展迅速，后期伴有意识障碍、出血表现，实验室检测病例血标本病毒载量较高，与既往研究结论相一致。病例3虽然救治及时，且无慢性基础性疾病，但其病情进展恶化较快，后期出现抽搐、意识障碍、急性呼吸窘迫综合征及DIC。病例死亡原因是否与病毒变异等因素有关，需要进一步深入分析。

血清学调查发现该地区健康人IgG抗体阳性率为4.14%，与湖北、江苏以及山东省其他疫区既往调查结果（3.3%~9.05%）略有不同^[10-12]，考虑与当地疫情强度、人口构成、检测试剂等因素有关。分组分析各年龄组IgG抗体阳性率差异有统计学意义，与性别、是否饲养动物、是否户外劳作不相关，且年龄越大抗体阳性率越高，与在山东省蓬莱市开展的调查结果基本一致^[12]，该研究采用整群多阶段抽样的方法，发现0~70岁年龄组均有隐性感染情况，其中60岁以上年龄组抗体阳性率最高，不同年龄组间差异有统计学意义。此外，病例家属血标本检测IgM、IgG抗体均为阴性，未发现隐性感染情况。动物血清学调查发现该地区犬和羊的SFTS特异性总抗体较高，貉子、鸡、猫检测均为阴性，与既往研究调查研究基本一致^[13]，考虑主要与动物养殖方式有关，散养动物野外暴露比例高，感染风险大。本次调查未在采集的蜱标本中检测到SFTS特异性核酸，考虑与标本数量不足有关，Wang等^[14]在山东省烟台市开展的蜱感染率调查显示，动物体表寄生蜱和外界游离蜱的感染率分别为4.75%和2.24%，应进一步采集外环境和动物寄生蜱标本，开展蜱密度监测和实验室检测，查找感染来源，分析其与发病的相关性。

综上所述，本次事件的调查对认识疾病的流行特征具有重要的启示作用，SFTS作为一种新发疾病，其传播途径、病原学特性、发病死亡危险因素等方面仍需要深入探索，在重点地区高发季节应加强重点人群的健康宣传教育，提高防病意识，减少此类事件发生。