登革热（dengue fever，DF）是由登革热病毒（Dengue virus，DENV）感染引起的一种急性蚊媒传染病，主要流行于热带和亚热带地区。DENV归属黄病毒科黄病毒属，依其抗原性不同分为4种血清型，人群感染DENV后临床表现差别较大，轻者可为隐性感染或者自限性的轻症病例，重者可表现为登革出血热（DHF）或登革休克综合征（DSS）。目前，对于重症登革热（DHF/DSS）病理机制理解尚不充分，但抗体依赖的病毒感染增强作用（antibody- dependent enhancement of virus infection，ADE）被认为是诱发重症登革热的重要原因，即初次感染DENV后机体可产生该血清型的IgG抗体，当再次感染其他血清型DENV时，该抗体不但没有保护作用，还会促进病毒在细胞内增生、复制，导致严重DHF或DSS的发生^[1-2]。

浙江省义乌市在2009年7－10月曾发生1起登革热（DENV-3）暴发疫情，共计报告196例病例（71例确诊病例，121例临床诊断病例）^[3]。为进一步了解DENV感染后特异性抗体在体内持续时间及影响抗体持续时间的相关因素，本研究基于义乌市1起登革热暴发疫情中的感染者，于2018年5－8月开展了登革热既往感染者的血清流行病学调查。

2009年浙江省义乌市登革热暴发疫情中的感染者。

① 病例：2009年义乌市登革热暴发疫情中按照《登革热诊断标准》（WS 216-2008）被诊断为登革热确诊病例和临床诊断病例^[3-4]；②隐性感染者：居住在疫点所在村（街），在疫情发生期间无登革热临床表现，且DENV IgM检测阳性者^[5]。

感染者知情同意后，于2018年5－8月采集2009年义乌市登革热暴发疫情中既往感染者的血清标本，并收集相关人员的人口学信息。采集每例感染者外周非抗凝血5 ml，离心分离血清，-80 ℃保存备用。调查对象的人口学信息包括姓名、性别、年龄、住址、联系方式、既往登革热感染发病情况和近9年国内外登革热疫区旅行史。

采用登革热IgG间接ELISA试剂盒（Panbio，澳大利亚）检测血清标本中DENV IgG抗体，检测步骤按试剂盒说明书规范操作。结果判读：Panbio units＞11为阳性，＜9为阴性，9~11需进行重复实验。

采用Excel 2010软件建立数据库，用SPSS 20.0软件进行统计学分析。不同特征调查对象血清阳性率差异采用χ²检验分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

共采集登革热既往感染者血清标本126份（表 1），其中100份标本DENV IgG抗体阳性，阳性率为79.37%。126份感染者血清标本中义亭镇青肃村88份、畈田朱村10份、西田村9份、下滕村10份、傅宅堰头村3份、佛堂镇前王村6份。病例血清101份，其中男性31份，女性70份，隐性感染者血清25份，其中男性9份，女性16份，病例和隐性感染者的性别构成差异无统计学意义（χ²＝0.260，P＝0.610）。病例的平均年龄为（53±17）岁，隐性感染者的平均年龄为（66±12）岁，两组年龄构成差异有统计学意义（χ²＝10.275，P＝0.016）。

表 1 浙江省义乌市登革热既往感染者中DENV IgG抗体分布情况 Table 1 Distribution of dengue virus IgG antibodies in dengue cases from a dengue outbreak in Yiwu, Zhejiang province, China

表选项

参与调查的126份标本中，男性40份标本，DENV IgG抗体阳性者30份，血清阳性率为75.00%；女性86份标本，阳性70份，血清阳性率为81.40%。不同性别感染者的阳性率差异无统计学意义（χ²＝0.682，P＝0.409），见表 1。

IgG抗体检出情况126份标本中1~、21~、41~、≥61岁年龄组血清登革热IgG抗体阳性率分别为100%、94.12%、85.42%和67.86%，差异有统计学意义（χ²＝9.161，P＝0.027）。

参与调查的126份标本中，患者101份，阳性90份，登革热IgG抗体阳性率为89.11%；隐性感染者25份，阳性10份，阳性率为40.00%，病例的抗体阳性率明显高于隐性感染者，差异有统计学意义（χ²＝29.511，P＝0.000）。

我国登革热疫情以输入性病例引起的本地传播为主，自1978年广东省佛山市发生登革热暴发流行以来，南方多个省份相继发生了暴发或流行，而且4种血清型在我国均发生过暴发^[6-7]。近年来，我国登革热疫情有从热带亚热带的东南沿海向温带北方内陆地区蔓延的趋势，2013年河南省许昌市和2017年山东省济宁市先后发生过登革热暴发疫情，疫情形势非常严峻^[8]。

2009年义乌市登革热暴发疫情为输入性病例引起的本地暴发，共涉及5个镇（街道）的16个村（社区），多数病例发生在4个村（社区）^[9]。本研究中涉及的调查点从1950－2009年登革热暴发疫情发生前无登革热疫情报告，疫情暴发后至今也无新发病例报告，我们对所有研究对象开展登革热暴露情况调查，2009年以后所有调查对象无登革热疫区暴露史，所以本研究中调查对象DENV感染均发生在2009年暴发疫情中，血清型为DENV-3型，且均为DENV首次感染。

有研究显示，人类在黄病毒感染后体内特异性抗体可持续数年甚至数十年，如基于第二次世界大战退伍军人的一项研究表明，使用17D黄热病疫苗免疫后30~35年仍可在接种者体内检测到特异性黄病毒抗体^[10]。机体对任何一型DENV的首次感染均较敏感，且感染后对同型病毒有较稳固的免疫力，并可维持多年。日本的两项研究显示感染登革热后60~70年的既往感染者（DENV-1、DENV-2）血清中仍可检测到DENV IgG抗体^[11-12]。本研究通过血清学调查发现感染登革热（DENV-3）9年后既往感染者人群中DENV IgG抗体总阳性率仍可达到79.37%，提示DENV感染后，机体内抗体可持续较长时间。由于DENV不同血清型感染后症状会加重，会有DHF或DSS等重症病例的发生，这些感染多年后仍有抗体的人群一旦再次感染，极可能出现重症。因此，要加强对这些抗体阳性者的关注，一旦他们再次感染DENV，要及时采取综合措施，减少重症病例的发生。

本研究发现不同性别的登革热既往感染者中抗DENV IgG抗体阳性率无差异，说明性别对DENV抗体持续时间无影响。但不同年龄组的抗体阳性率有明显差异，随着年龄的增加，抗体阳性率逐渐下降，这可能是因为青壮年的机体免疫能力较强，产生的抗体滴度较高，从而抗体持续时间较长。值得注意的是，病例的抗体阳性率明显高于隐性感染者，可能是由于病例当初感染的DENV载量较高，产生的抗体滴度较高，而隐性感染者感染的DENV载量较低，产生的抗体滴度较低所致。

综上所述，本研究发现，DENV感染者的抗体9年后仍广泛存在，而且青壮年和病例的抗体阳性率较高，在登革热预防控制中，要加强对既往感染者的重视，减少DHF和DSS等重症病例的发生。