钉螺（Oncomelania hupensis）和钉螺卵在土壤中属离散型分布^[1-2]。既往研究发现，有螺环境的土壤中含有可孵化的螺卵^[3-4]，因此，含有钉螺的土壤可作为介质传播钉螺^[5-6]。2016年5-9月我们对上海市青浦区有螺地区土壤进行采集孵化、镜检观察，以期探讨有螺地区土壤中成螺与螺卵孵化及孵化用水对钉螺的孵化影响，现将结果报告如下。

选择上海市青浦区练塘镇星浜村朱家埭河和青松港断头浜有螺区作为土壤样品采集点，其中朱家埭河为2014年新发现的有螺区。采用系统抽样结合环境抽查法（双重查螺法）^[2]，确定并采集土壤20块，每块土壤取土体积为330 cm×330 cm×7 cm。从每块土壤中再称取3份（每份500.00 g）样品，共计60份样品，分别进行钉螺计数和73 d的孵化实验，孵化后的样品，用双层箩筛水洗获得筛取物^{[5, 7-8]}，进行未孵化螺卵计数。

电子天平（型号：JJ1000，江苏省常熟市双杰测量仪器厂产重校验设备有限公司）；解剖镜（型号：SZX16，OLYMPUS，JAPAN）；自制土壤采样器，体积为330 cm×330 cm×7 cm。

将孵化实验后的剩余物用双层箩筛水洗，获得的筛取物放入小型搪瓷盆内，加满清水，充分混匀后用20目铜筛过滤至另一只搪瓷盆内。滤过物用肉眼检查有无幼螺；把搪瓷盆内的滤过物加满水，静置5 min后轻轻倒去液体，再加满水，5 min后轻轻倒去液体，如此反复水洗多次至水清为止。镜下见到透明胶球内有略显黄色的卵胚即可判定为钉螺卵。

实验观察最长孵化时间为73 d，采用双筛水洗法捡出孵化的幼螺，筛取物按照镜检方法检测未孵化螺卵，计算孵化率。

数据采用Excel 2007软件汇总，SPSS 10.0软件用于统计学分析。对数线性回归检验1 500.00 g土壤中成螺数与孵化出幼螺数的关系，配对χ²检验用于不同孵化用水的孵化率比较，P＜0.05为差异有统计学意义。

由于土质不同，含杂质（泥质、草根、碎石）及含水量均不相同，20块土壤（体积为330 cm×330 cm×7 cm）的平均质量为（6 418.87±1 180.06）g，最大值为8 489.16 g，最小值为4 600.34 g。

在采样现场对土壤表面钉螺进行目测计数，实验室采用双层箩筛水洗的方法计数，由于钉螺在土壤中呈离散型分布，每块土壤样本最多捡出钉螺182只，最少8只。

经对数线性回归分析，土壤中钉螺成螺数量与孵化出的幼螺数量无对数线性关系〔y=18.894+14.759ln（x），t=1.484，P=0.155〕，见图 1、表 1。60份土壤中共捡出成螺162只，孵化出幼螺921只，未孵化螺卵数141只，孵化率为86.72%。

图 1 有螺土壤中钉螺成螺数与孵化幼螺数量的散点图

图选项

表 1 有螺土壤中钉螺成螺数量与孵化幼螺情况的对数线性回归分析

表选项

分别采用自来水和去离子水对钉螺的孵化率进行比较，结果显示不同水质对钉螺的孵化率影响差异无统计学意义（χ² =10.000，P=0.219）。

上海市青浦区曾是全国十大血吸虫病流行区之一，自1995年在朱家角镇最后一次发现钉螺后，至2014年未再发现本地钉螺孳生^[9-10]。本研究采用双重查螺法，以330 cm×330 cm×7 cm作为标准体积采集有螺地区土壤，采回的等体积土壤经称重，质量差别较大，主要由于土质、杂质（泥质、草根、碎石）及土壤含水量情况不同导致，钉螺生存环境的土质符合青浦区既往有螺地区植被生物学和土壤学特征，与相关研究认为有螺地区的土壤植被、水分与钉螺生存有较大的关系结果相近^[11-12]。

本次青浦区发现的钉螺属于水网型钉螺，与本区历史存在的钉螺亚种相同。通过对抽取的60份土壤样品进行钉螺计数，经过73 d孵化实验后对幼螺计数及统计学分析，土壤中成螺与孵化出的幼螺数量无对数线性关系，提示成螺数量并不能决定幼螺的孵化数，捡出成螺较少的土壤可在异地（如实验室条件下）繁殖出大量幼螺，支持钉螺和螺卵在土壤中呈离散型分布特征^[2]。

本研究将有螺地区的土壤移至自然状态下的实验室，捡出成螺后利用取样土壤直接进行钉螺孵化，结果可孵化出幼螺，说明有螺地区土壤可以作为传播介质引起钉螺传播，通过农业生产、苗木移植、有螺地区土壤的利用等可导致钉螺播散，因此具有传播血吸虫病的隐患^[5-6]。而且这种传播介质与土壤中成螺数量无关，在繁殖季节有螺地区土壤能够孵化出幼螺，从而造成钉螺传播扩散的可能。

本研究钉螺的孵化率为86.72%，与既往研究结果相似^[5]。由于钉螺种群的数量决定于野外钉螺的孵化率，而孵化率的研究需要在实验室完成，因此，不同地区、不同类型钉螺的孵化率水平仍需进一步研究。本研究分别使用自来水和去离子水对清洗后的样品进行孵化实验，结果显示2种水质均能孵化出钉螺，且2种方法对孵化率影响的差异无统计学意义，再次证实了改良孵化法孵化钉螺的可行性^[8]，同时说明钉螺孵化繁殖对培养用水的要求并不苛刻，这与以往文献对钉螺孵化实验用水的要求不同^{[2, 7]}。使用自来水孵化钉螺将明显降低实验成本和实验要求，有利于更多的基层实验室开展研究和检测，但是否可以普及推广尚需通过增加样本量做进一步研究。

综上所述，有螺地区的土壤可作为传播介质引起钉螺传播，建议在今后的工作中将有螺地区的土壤、苗木、草种的移植以及灭螺后的土壤是否有活性的螺卵作为必须的常规检测内容之一，土壤样品检测阴性后方可对上述资源加以利用，以避免出现新的钉螺孳生地^[13]。