疟原虫镜检是疟疾防治的重要环节，是发现疟疾的重要手段。当前，疟原虫血涂片镜检仍然是疟疾诊断的金标准^[1]，血片质量直接影响镜检结果的判定以及患者的后续治疗。因此，血片质量控制也是疟疾防治过程中的重要环节。本研究通过对郴州市“三热”患者(临床诊断为疟疾、疑似疟疾和不明原因发热的患者)疟原虫血片质量分析，发现郴州市疟原虫血检工作的薄弱环节，为规范血检工作提供科学依据。

严格按照《消除疟疾技术方案(2011年版)》^[2]要求，于2015-2017年每月抽取各县(市、区)“三热”患者≥3%疟原虫阴性血片和全部疟原虫阳性血片，由市级疟疾镜检专业人员进行复核。

在同一张玻片上制作厚、薄血膜；厚血膜用血量4~5 μl，位于玻片右侧1/3处，直径0.8~1.0 cm，圆形厚膜均匀，边缘整齐；薄血膜用血量1.0~1.5 μl，位于玻片1/2~1/3处，直径2.0~2.5 cm，舌状厚薄均匀，无划痕。符合以上要求的血片为制作合格。

染色液酸碱合适，厚血膜保存完整，外观蓝紫色，镜下白细胞、疟原虫胞浆蓝色，核红色。符合以上要求的血片为染色合格。

外观光洁无油灰，镜下无色素沉渣、杂菌等。符合以上要求的血片为清洁度合格。

在显微镜下复核抽查的疟原虫阳性和阴性血片结果，判定复核结果与原始结果是否一致，阳性血片复核结果以错检率统计，阴性血片复核结果以漏检率统计。

采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析，率的比较采用χ²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2015-2017年郴州市共开展“三热”患者疟原虫血检9 806人次，其中血检出阳性9人次。复核血片527张，其中阴性血片518张，占全部疟原虫阴性血片的5.29%，疟原虫阴性血片制作合格率为77.80%、染色合格率为89.58%、清洁度合格率为95.17%。全部复核了9张疟原虫阳性血片，其制作合格率、染色合格率和清洁度合格率均为88.89%。

2015-2017年郴州市“三热”患者疟原虫阴性血片制作合格率最高的是桂阳和临武县(均为100%)，最低的是宜章县(48.84%)，各县(市、区)疟原虫阴性血片制作合格率差异有统计学意义(χ²=87.286，P＜0.001)；疟原虫阴性血片染色合格率最高的是桂阳、临武、桂东县和资兴市(均为100%)，最低的是苏仙区(58.33%)，各县(市、区)疟原虫阴性血片染色合格率差异有统计学意义(χ²=80.636，P＜0.001)；疟原虫阴性血片清洁度合格率最高的是临武、汝城、桂东县和资兴市(均为100%)，最低的是北湖区(67.65%)，各县(市、区)疟原虫阴性血片清洁度合格率差异有统计学意义(χ²=81.023，P＜0.001)(表 1)。

表 1 2015-2017年郴州市“三热”患者疟原虫阴性血片复核质量地区分布

表选项

2015-2017年郴州市“三热”患者疟原虫阴性血片制作合格率2016年最高(82.63%)、2017年最低(74.48%)，各年度阴性血片制作合格率差异无统计学意义(χ²=3.484，P=0.075)。疟原虫阴性血片染色合格率2015年最高(92.23%)、2017年最低(84.14%)，各年度阴性血片染色合格率差异有统计学意义(χ²=6.521，P=0.038)。疟原虫阴性血片清洁度合格率2016年最高(97.01%)、2017年最低(93.79%)，各年度间阴性血片清洁度合格率差异无统计学意义(χ²=1.941，P=0.039)(表 2)。

表 2 2015-2017年郴州市“三热”患者疟原虫阴性血片复核质量年度分布

表选项

2015-2017年复核518张疟原虫阴性血片，未发现漏检，漏检率为0。复核9张疟原虫阳性血片，发现虫种分型错误1张，复核结果为恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)与卵形疟原虫(Plasmodium ovale)混合感染，而报告该病例的医疗机构检测原始结果为恶性疟原虫感染。

总体来看，与2014年郴州市血片质量比较^[3]，2015-2017年的血片染色合格率和清洁度合格率均有所提升，但血片制作合格率有所下降。本研究的血片质量与南通市^[4]、南宁市^[5]、武汉市东西湖区^[6]等地区基本一致，但是与常州市^[7]还有一定差距。按照江苏省“四个合格率”^[8]的要求，郴州市在血片制作方面还有一定差距，主要表现在血片厚薄不均、边缘不整、有划痕、有沉渣等，在今后工作中需进一步规范血片制作、染色等环节，加大血片质量控制力度，确保血片质量满足疟原虫镜检需要。

研究结果显示，桂阳县整体血片质量较其他县(市、区)高，桂阳县是疟疾流行二类县，2010-2012年执行了全球基金疟疾项目工作，严格的管理措施及考核评估机制一定程度上促使了桂阳县疟原虫血检技能的提升。这表明疟疾项目的高标准实施对血涂片质量的提升有促进作用，在以后的工作中一定要严格落实疟疾防治措施，严格评估标准，确保疟疾防治各项措施符合规范。

2016年郴州市接受并通过了湖南省卫生和计划生育委员会考核评估，有部分医务人员认为郴州市已完成消除疟疾考核评估，对疟原虫血检工作重视程度不够，从而出现了麻痹松懈、推诿应付血片抽查等思想，导致2017年全市的血片制作和染色均不理想。这表明疟原虫镜检仍需要长期坚持加强疟原虫血片制作、阅片等练习，否则会因逐渐生疏而导致疟原虫镜检技术下降。在以后工作中，需要不断强化疟原虫镜检技术的培训、督查、外质控考核等，确保检验人员疟原虫镜检技术维持在较高水平。

从复核结果来看，疟原虫阴性血片复核结果与医疗机构检测原始结果一致，说明逐级反复培训和实践操作切实提高了医疗机构检验人员的疟原虫镜检技能。疟原虫阳性血片复核中发现1张血片虫种分型结果与医疗机构检测原始结果不一致，可能由于过往的培训和实践操作更侧重间日疟原虫(Plasmodium vivax)和恶性疟原虫，此外，三日疟原虫(Plasmodium malariae)和卵形疟原虫标准血片及感染该类型疟原虫的患者血液较难获得，导致镜检中发现这两类虫种血片的机会较少，从而导致在镜检时忽略了卵形疟原虫这种类型。提示在以后工作中要加强疟原虫镜检技术全面培训，不仅要会看常见的虫种，而且也要能判定不常见的虫种，同时，还要及时复核所有报告的阳性血片，加强血片质量控制，确保疟疾病例诊断准确，杜绝误诊、漏诊。

近年来，郴州市疟疾病例均为境外输入疟疾病例，且输入性疟疾疫情仍然严峻^[9]，此类病例存在虫种不典型、原虫密度低以及反复服药等现象，给镜检带来一定的困难，而新的疟疾诊断技术在郴州市并未广泛开展，给疟疾监测工作带来了新的挑战^[10]。为巩固消除疟疾工作成果，严格落实“1-3-7定点清除”消除疟疾工作模式^[11]，郴州市各级医疗卫生机构一定要严格按照《疟疾的诊断》^[12]要求，规范开展“三热”患者疟原虫血检^[13-14]，确保疟疾病例早发现、早报告、早诊断、早治疗。