革螨种类多样，分布广泛，与人类关系密切^[1]。研究表明，革螨可侵袭人体，叮咬吸取血液或淋巴液，引起革螨性皮炎。其除直接寄生、叮咬外，少数革螨还可作为传播媒介传播疾病^[2-6]。多数革螨营自生生活，常孳生于枯枝烂叶下、草丛和土壤里、禽畜粪堆和仓库贮品中，偶然可被鸟类或鼠类携带进入居室内，其中以鸡皮刺螨（Dermanyssus gallinae）和柏氏禽刺螨（Ornithonyssus bacoti）较为常见，国内外尚未见毛绒玩具中发现羽美绥螨（Ameroseius plumosus）的相关报道。

羽美绥螨属于革螨股囊螨总科美绥螨科美绥螨属。目前，革螨的种类鉴定主要依据形态学特征。由于革螨形态结构复杂、近缘种较多，准确地鉴定革螨种类十分困难。与形态学分类相结合的DNA条形码技术，是当前比较常用的一种物种鉴定方法^[7]，其突破了传统物种鉴定方法对经验的过度依赖，实现了利用标准基因片段对物种进行快速准确鉴定，是传统分类鉴定的有力补充^[8]。本研究通过对羽美绥螨线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（cytochrome C oxidase subunit Ⅰ，COⅠ）基因序列的扩增，在DNA条形码数据库中补充了羽美绥螨的基因序列，为鉴定形态相近的革螨和分析种群、种间关系提供了参考依据。

羽美绥螨于2016年7月采自安徽省芜湖市某小区一住户儿童房的毛绒玩具上（图 1A），采集后，大部分个体制成标本以做形态鉴定，6只标本于70%乙醇固定用于DNA提取，剩余标本保存在螨类保存液中。

注：A.儿童房；B.羽美绥螨（×100） 图 1 芜湖市某儿童房内检获革螨的生境及种类 Figure 1 The biotope and species of gamasid mites

图选项

轻洗标本，用5%氢氧化钠溶液浸泡后再次水洗，在双目立体显微镜下，将标本放入滴有霍氏封固液的载玻片上，清除其杂质后，再放入另一载玻片上的封固液中，调整形态，盖上盖玻片后用乙醇灯稍微加热，贴上标签，45 ℃烘干5~6 d即可^[9]。

提取单只螨的基因组DNA^[10]，COⅠ引物参照Young和Hebert^[11]，正向引物ApCOIF：5′- ATT CAA CCA ATC ATA AAG ATA TTG G-3′，反向引物ApCOIR：5′-TGA TTT TTT GGA CAT CCA GAA GTT TTA- 3′。扩增后的COⅠ片段经PUCM-T载体克隆后送上海生工生物技术有限公司测序。所得序列通过DNAStar和DNASIS软件进行分析。

将1条序列上传至GenBank，并在数据库中查找出美绥螨科、植绥螨科、皮刺螨科共16条mtDNA COⅠ序列，利用MEGA 6.06软件^[12]，以Kimura2-parameter模型计算碱基差异度，以邻接法（Neighbor-Joining method，NJ）构建系统树。

在显微镜下观察可见，虫体微黄色，椭圆形，长409~430 μm（平均416 μm），宽269~323 μm（平均301 μm）。背板覆盖整个背面，布满网纹，前部有圆形花饰。板上有28对刚毛，稍宽，膜质透明，边缘波浪形。腹面各板均布满网纹，胸板前缘双凸，后缘较直，中部有一圆形凹坑，胸后毛位于板外表皮上。生殖板近梯形，具1对生殖毛。腹肛板横椭圆形，4对腹表皮毛，腹后毛同背毛。气门沟细长，前端达到颚基。头盖三角形，前端尖，螯钳短，定趾有4小齿。颚角细，顶端3齿。颚毛短，末端细尖。对多只螨进行形态学鉴定，均符合羽美绥螨雌性的形态学特征^[13]（图 1B）。

COⅠ碱基组成与序列分析6只个体均成功扩增出长度为707 bp（GenBank accession number MG547398）的mtDNA COⅠ基因片段，经测序后发现6只个体间的DNA条形码差异＜0.5%，判断这6只个体为同一种类。利用DNAStar软件包的EditSeq软件进行分析得出碱基序列A、C、G、T含量分别为176 bp（25%）、98 bp（14%），146 bp（21%）和287 bp（40%），G+C含量为35%，A+T含量为65%。测得的羽美绥螨mtDNA COⅠ片段用BLAST与GenBank中的线粒体DNA序列进行比较发现，羽美绥螨与其他美绥螨科螨的COⅠ有较高的同源性，其中与Ameroseiidae sp.（KM826886）同源性为76%。

根据DNA条形码建立的NJ进化树（图 2），可以看出羽美绥螨与其他美绥螨科的种类聚在一起，与植绥螨总科中的植绥螨科关系较近。

注：●经测序获得的羽美绥螨COⅠ基因序列 图 2 NJ系统进化树（Kimura2-parameter模型） Figure 2 Neighbor-Joining tree (Kimura2-parameter model)

图选项

随着全球气温变暖、生境破碎化加剧、人员货物频繁流动等因素的影响，媒介生物的地理分布范围逐步扩大，虫媒病的发病率处于上升趋势，给人类健康带来严重威胁^[14]。螨类作为医学媒介生物，其准确鉴定是做好监测和防控工作的前提。目前，羽美绥螨的鉴定完全依赖于形态学特征，必须由经验丰富的分类学专家进行鉴定，对标本的要求相对较高。如在采集或储藏过程中被破坏，或是只有卵或幼虫等非成虫形态时，往往难以准确快速地鉴定甚至无法鉴定。即使标本完好，但由于革螨具有种间形态差异极小的近缘种，鉴定时也耗时费力。DNA条形码技术的出现为媒介生物的鉴定提供了快速、准确的鉴定方法，其不受性别、发育阶段、形态完整度的限制，减少了对专家的依赖性，数据共享性高，是形态学鉴定与传统分类学的有力补充。但是，由于GenBank和BOLD中缺乏美绥螨科已鉴定螨类的DNA条形码，制约了DNA条形码技术在革螨鉴定中的应用。本研究在描述了羽美绥螨形态特征的基础上，首次获得其DNA条形码序列，并将其提交到公用数据库，希望能逐步完善革螨的DNA条形码数据库。同时，本研究证明了羽美绥螨在美绥螨科的分类地位，也为进一步研究美绥螨科螨类的系统发育关系提供了参考资料。

羽美绥螨是波兰常见螨类，生活在大黄蜂巢内，是储藏花粉重要的害螨，在中国、日本、乌克兰、克里米亚、德国、巴西均有分布，在我国主要分布于安徽、河南、福建、云南、贵州省，顾以铭等^[15]曾在贵阳市孟连黄胸鼠（Rattus tanezumi）体表采到羽美绥螨，林坚贞等^[13]曾在河南省的小叶蝉亚科昆虫头部采到该螨，但未见在居室中、毛绒玩具上发现羽美绥螨的相关报道。据质监部门市场抽查时发现，部分毛绒玩具上存在一定比例的致病菌^[16]，也曾检出过螨类，但并未引起广泛重视。当儿童接触玩具时，就有可能受到螨的叮咬或引起过敏反应，危害身体健康。本研究仅在儿童房的毛绒玩具上发现大量羽美绥螨，而未在家中其他物品中发现，也未见鸟类和鼠类活动迹象，怀疑由毛绒玩具携带羽美绥螨进入该住户家中的可能性较大，再次提醒年轻父母在购买毛绒玩具时，除关注其材质、组件安全外，也要注意其是否会携带细菌、病毒或螨类等。为有效杀死螨，刚购买的毛绒玩具，一定要清洗曝晒消毒后再给孩子接触，并要定期用＞65 ℃的温水烫洗或放入冰箱中冷冻^[17]。目前，由于缺乏相关的宣传教育，人们对于螨类危害的严重性认识不足，大部分家庭遇到螨类大量出现时，无处寻找帮助，亟待加强对螨类防治工作的卫生宣传教育工作，同时应设立相应的咨询部门。