发热伴血小板减少综合征（severe fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS）是一种由发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒（SFTSV）引起的蜱媒自然疫源性传染病，主要临床表现为发热、乏力、头痛、肝肾功能损伤以及消化道症状，并伴有血小板及白细胞减少，部分病例可见出血症状，其中少数重症病例可因多脏器功能损伤救治无效而死亡。舟山市自2011年报告首例SFTS病例以来，全市疫情较为严峻，呈逐年上升趋势，发病地区高度集中在岱山县。2011－2016年监测结果显示，舟山市SFTS发病有逐年上升趋势，且发病范围也在不断扩大。2015年7月浙江省舟山市嵊泗县枸杞乡报告一起家庭聚集性SFTS疫情，对其进行了流行病学调查和诊断，为SFTS监测防控工作提供参考。

患者流行病学史资料来自现场流行病学调查，对疫点周边开展调查，包括病例调查、对照调查、环境调查和媒介调查。采用统一调查表对2例患者及周围邻居的基本情况、临床特征、流行病学史等进行调查。

利用TaKaRa核酸RNA扩增试剂盒（RR055A）扩增SFTSV的L特异性基因节段。L特异性基因节段的RT-PCR引物序列（Seq2-F2：5′-GAA CAT TCC ATG CCA TCT CAG-3′，Seq1-R2：5′-GTG AGC TAA AAA CCT TAG GTC-3′）与预期扩增分子质量为914 bp。

使用德国QIAGEN核酸提取试剂盒（74104）提取SFTSV RNA，采用PrimeScript^TM 1st Strand cDNA Synthesis Kit（TaKaRa 6110A）对提取的RNA进行反转录，合成1st Strand cDNA。采用高保真试剂盒Premix Taq^TM（Ex Taq^TM Version 2.0 plus dye）（TaKaRa RR902A）对cDNA进行逐段扩增。扩增仪器BIO-RAD T100 Thermal Cycle；扩增程序：预变性95 ℃ 5 min，95 ℃ 30 s、45 ℃ 45 s、72 ℃ 3.5 min，35个循环，72 ℃ 10 min延伸。扩增后各片段达到测序要求后送至上海桑尼生物科技有限公司测序。选用Chromas软件将上述扩增片段测序结果峰值图转变成FAST、txt、SQD 3种格式碱基序列，然后对每个扩增产物的正向序列与反向序列进行互补配对验证，并对无法确定的碱基序列调出原始峰值图进行比对与验证，通过Seqman软件拼接，获得该病例病毒株的基因序列（ZJZHSH-LME/Zhejiang/2015）。从美国国立生物技术信息中心（NCBI）GenBank下载相关序列，运用MEGA 5.2软件邻接法（Neighbor-Joining）构建系统进化树。

2015年7月舟山市嵊泗县枸杞乡发生一起家庭聚集性SFTS疫情，2例患者为夫妻关系。居住在嵊泗县枸杞岛，为浙江省舟山群岛东北部的1个岛屿。病例1：男，78岁，农民，7月7日出现低热；病例2：女，74岁，农民，7月8日出现发热及腹泻症状。两者均于当地卫生院进行相应治疗处理无效后，于7月13日转入舟山市医院治疗。病例1临床表现为发热、头痛、乏力、全身酸痛以及腹胀、便秘等，无基础性疾病史，7月14日体检意识清，急性病容，轻度厌食，无水肿，无淋巴结肿大，面部可见红色皮疹，口腔上颚可见散在出血点，左大腿内侧可见一瘀斑。病例2表现为发热、恶心、呕吐、腹泻等，有高血压和糖尿病史，7月14日体检意识清，急性病容，厌食，无水肿和淋巴结肿大，口腔黏膜可见散在出血点；7月15日出现牙关紧闭、上肢颤抖和意识不清，诊断为重型SFTS并转入重症监护病房（ICU）。2例患者血常规及生化检查血小板呈进行性下降（表 1）。7月16日2例患者经舟山市CDC实验室检测为SFTSV核酸阳性，确诊为SFTS病例。

表 1 舟山市枸杞岛2例患者血常规检测结果

表选项

患者居住地为平原山丘地带，住房为老旧瓦房，平时多在家附近从事农业活动。病例1于发病前10 d左侧大腿内侧被蜱叮咬；病例2因转至ICU无法调查，蜱叮咬史不详。另外，2例患者常有上山活动史。从其家属处了解到在草地发现过蜱，家中和田地均有鼠，居住地有野猫出现。

2例患者在患病期间有11名密切接触者，包括患者女儿、亲戚、邻居等，其中男性3人，女性8人。其女儿有轻度发热，经舟山市医院诊治后排除SFTS，其他10人经舟山市CDC实验室检查，SFTSV核酸均为阴性。

使用布旗法在房屋前小菜地捕获蜱5只，房屋左侧水沟的低矮杂草中捕获2只，屋后花坛捕获9只，从患者居住房屋到山上菜地的水泥路一侧杂草中捕获11只，在患者山上菜地周围环境中捕获12只，在患者一邻居家犬体表捕获92只，其中1只为吸饱血的蜱，形态如绿豆大小。上述捕获蜱经RT-PCR检测，SFTSV核酸均为阴性。

对病例1血清标本检测到的SFTSV进行序列分析，所获病毒株与来源于岱山的病毒株（ZJ2013-06）序列及我国浙江省宁波（Rodent01/NB/CHN/2014）和日本病毒株（SPL097A/Japan）进化关系较近，见图 1，核苷酸相似度为98.8%~99.9%。与来源于岱山的主要流行株及淮阳山和河南省的流行株同源性相对较低，相似度为94.0%~96.0%。

注：◆为本研究病毒基因序列 图 1 发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒基因进化树

图选项

本次2例患者是嵊泗县报告的首起SFTS病例，患者居住的岛屿距舟山本岛及SFTS高发区岱山县较远，远离内陆，人员流动较少，地理环境相对独立。鉴于该岛上候鸟较多，居民经常在自家院子发现鸟粪，推测本次疫情可能因鸟类寄生蜱传播病毒所致。研究显示，SFTS发病具有明显的季节性和地域性^[1]，蜱可能是SFTSV的传播媒介^[2-4]，舟山市SFTS病例主要集中在岱山县，病例沿山麓分布^[5]，可能与长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）活动有关^[6]。病例1有明确的蜱叮咬史，调查显示，病例居住环境周边存在较多的蜱，提示其可能因蜱叮咬而感染发病。病例2虽未进行流行病学调查，尚不能排除人与人接触传播或蜱叮咬传播^[7-8]。

通过对SFTSV基因同源性进行分析发现，该病毒株与我国宁波部分病毒株和日本部分病毒株的同源性较高，而与岱山主要病毒株的同源性相对较低。有学者提出，候鸟迁徙可能在SFTSV的传播过程中起远距离传播作用^[9]。枸杞乡位于舟山群岛东北部，地处韩国、日本与中国沿海之间的东海岛屿，岛上常有候鸟，由于其地理环境相对独立，周边环境采集的游离蜱和寄生蜱经检测SFTSV核酸阴性，提示当地媒介蜱带病毒率低。初步认为该岛的SFTSV传播可能与候鸟迁徙有关。SFTS为新发传染病，其发病和传播机制、传播媒介等尚未明确，可能存在多种传播途径和传播媒介。建议今后应加强公众健康教育宣传、环境整治、病例和媒介监测等防控措施。