登革热是由伊蚊叮咬传播的虫媒病毒性疾病，埃及伊蚊（Aedes aegypti）和白纹伊蚊（Ae. albopictus）是其重要传播媒介^[1-2]。在我国广东、福建、浙江、云南等省均暴发过登革热疫情^[3-6]。瑞丽市位于云南省西部，德宏州西南部，地处97°18′36″~98°1′12″E，23°24′48″~24°8′24″N，城区平均海拔770 m。东连芒市，北接陇川县，西南、西北、东南三面与缅甸相连，国境线长169.8 km，有36个大小渡口和通道，2个国家级口岸。属南亚热带季风性湿润气候，年平均气温20 ℃，适宜各种蚊虫孳生。2002年董学书等^[7]首次在瑞丽市姐告口岸发现埃及伊蚊分布。与其接壤的芒市、陇川县及境外缅甸地区也均有埃及伊蚊和白纹伊蚊分布^[8-9]。缅甸为登革热流行区，每年均有登革热病例报告^[10-11]。因其适宜的伊蚊孳生环境、频繁的人员流动，加之境外常年登革热的流行，瑞丽市自2013年以来因输入病例引起多次登革热本地疫情暴发^[12-14]。在登革热疫情处置期间，使用高效氟氯氰菊酯进行大面积灭蚊喷洒^[15]，此后连续3年的登革热疫情防控，大规模使用拟除虫菊酯类杀虫剂进行灭蚊。本研究通过对瑞丽市埃及伊蚊和白纹伊蚊对杀虫剂的抗药性调查，了解其抗性情况。

于2016年6-9月在云南省瑞丽市城区（东、南、西、北）和姐告口岸5个片区，采集伊蚊幼虫和蛹。待其羽化和鉴定后^[16]，分类饲养，饲喂鼠血（豚鼠，产地：瑞丽），繁殖至子一代，进行杀虫剂的生物测定。埃及伊蚊敏感品系及白纹伊蚊敏感品系，均由中国CDC传染病预防控制所提供。

药膜滤纸（批号：20160607）及其种类：氯菊酯（0.25%和0.75%）、氯氟氰菊酯（0.03%和1.80%）、顺式氯氰菊酯（8.00%）、溴氰菊酯（0.10%）、高效氯氰菊酯（3.00%）、马拉硫磷（0.44%和0.80%）、杀螟硫磷（0.18%和0.25%）、残杀威（0.06%和0.10%）和DDT（4.00%），根据WHO标准制作，由中国CDC传染病预防控制所提供。

按照WHO诊断剂量标准和方法^[17]，采用成蚊滤纸接触筒法，以敏感品系作为参照进行测定。将试虫移入装有杀虫剂药膜滤纸的接触筒中，将接触筒直立，观察蚊虫击倒情况。每筒测定试虫20~30只，每种杀虫剂重复测4~5筒，同时设空白对照，观察并记录首只蚊虫被击倒时间和10、15、20、30、40、50、60 min时的击倒蚊虫数。蚊虫接触供试杀虫剂60 min后，将接触过杀虫剂的蚊虫置恢复筒内，恢复筒放置于（26±1）℃、光周期为14 L:10 D、相对湿度为（75±5）%的环境中，且饲以10%葡萄糖水，24 h后记录实验蚊虫死亡数，计算死亡率。若对照组死亡率＞20%，实验重做。若对照组死亡率为5%~20%，则用Abbott公式校正死亡率^[18]。

根据WHO抗药性评价标准判定蚊虫抗药性级别^[19]，死亡率＞98.0%为敏感群体（S），死亡率80.0%~98.0%为可疑抗性群体（M），死亡率＜80.0%为抗性群体（R）。

计算接触10、15、20、30、40、50和60 min时的击倒率，采用SPSS 20.0软件中的Probit法，统计并计算半数击倒时间（KT₅₀）^[20]及其95%CI。

城区埃及伊蚊接触0.25%氯菊酯、0.03%氯氟氰菊酯、8.00%顺式氯氰菊酯、0.80%马拉硫磷、0.25%杀螟硫磷、0.10%残杀威和4.00% DDT后，首只蚊虫击倒时间最短分别为25、28、5、13、31、6和40 min；接触60 min后，击倒率分别为3.50%、2.44%、99.21%、100%、96.84%、100%和14.18%；24 h后校正死亡率分别为1.40%、20.12%、80.31%、100%、100%、100%和14.93%；KT₅₀分别为274.83、334.73、8.83、17.87、42.70、3.89和116.15 min。城区埃及伊蚊对氯菊酯、氯氟氰菊酯和DDT均产生抗药性，对顺式氯氰菊酯为可疑抗性；对马拉硫磷、杀螟硫磷和残杀威仍敏感，见表 1。

表 1 云南省瑞丽市埃及伊蚊对7种常用杀虫剂的抗药性测定结果 Table 1 Susceptibility of Ae. aegypti to seven insecticides in Ruili city, Yunnan province

表选项

姐告口岸埃及伊蚊接触0.25%氯菊酯、0.03%氯氟氰菊酯、8.00%顺式氯氰菊酯、0.80%马拉硫磷、0.25%杀螟硫磷、0.10%残杀威和4.00% DDT后，首只蚊虫击倒时间最短分别为38、39、4、15、39、4和超过观察期60 min；接触60 min的击倒率分别为1.10%、1.06%、100%、100%、76.62%、100%和0；24 h后校正死亡率分别是0.55%、2.13%、62.35%、100%、100%、100%和0；KT₅₀分别为353.21、444.83、9.79、21.52、53.45、10.26和无法计算KT₅₀（埃及伊蚊接触DDT的60 min观察期内无击倒）；姐告口岸埃及伊蚊对氯菊酯、氯氟氰菊酯、顺式氯氰菊酯和DDT均产生抗药性，对马拉硫磷、杀螟硫磷和残杀威均敏感，见表 1。

城区白纹伊蚊接触0.75%氯菊酯、1.80%氯氟氰菊酯、8.00%顺式氯氰菊酯、0.10%溴氰菊酯、3.00%高效氯氰菊酯、0.44%马拉硫磷、0.18%杀螟硫磷和0.06%残杀威后，首只蚊虫击倒时间最短分别为4、4、5、2、4、3、27和6 min；接触60 min时，击倒率分别为9.01%、100%、99.29%、94.49%、100%、91.54%、42.86%和100%；24 h后校正死亡率分别为8.11%、83.85%、75.18%、4.97%、89.13%、99.23%、100%和100%；KT₅₀分别为426.63、6.70、12.60、23.08、6.23、32.41、65.22和13.72 min；城区白纹伊蚊对氯菊酯、顺式氯氰菊酯和溴氰菊酯均已产生抗药性，对氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯为可疑抗性，对马拉硫磷、杀螟硫磷和残杀威均敏感，见表 2。因姐告口岸未采集足量的白纹伊蚊，故未进行抗药性测定。

表 2 云南省瑞丽市白纹伊蚊对8种常用杀虫剂的抗药性测定结果 Table 2 Susceptibility of Ae. albopictus to eight insecticides in Ruili city, Yunnan province

表选项

通过对瑞丽市城区和姐告口岸埃及伊蚊对7种常用卫生杀虫剂的测定，根据首只蚊虫击倒时间、KT₅₀值和死亡率等指标综合判定，埃及伊蚊对拟除虫菊酯类和DDT杀虫剂均产生不同程度的抗药性，与国内外相关研究结果相似。Li等^[21]研究表明，瑞丽市埃及伊蚊对氯氰菊酯和氯氟氰菊酯产生了不同程度的抗性。Kawada等^[22]证实缅甸埃及伊蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂产生了抗药性。瑞丽市城区和姐告口岸埃及伊蚊对马拉硫磷、杀螟硫磷和残杀威的抗药性结果均敏感，与Thanispong等^[23]在泰国地区测定的埃及伊蚊对马拉硫磷和残杀威均产生了不同程度抗药性的结果不同，可能因不同国家控制蚊虫使用的杀虫剂不同所致。

瑞丽市城区和姐告口岸埃及伊蚊对同种杀虫剂的抗性结果基本一致，除了姐告口岸埃及伊蚊接触氯氟氰菊酯和顺式氯氰菊酯后的抗药性较城区高，其原因可能与姐告口岸较城区使用该类杀虫剂较多有关（与当地喷洒记录资料一致）。本研究调查表明，埃及伊蚊对DDT产生了抗药性，但20世纪80年代瑞丽市即停止使用DDT，是否为入侵瑞丽市前就已产生抗性，其原因有待进一步调查。

瑞丽市白纹伊蚊对拟除虫菊酯类氯菊酯、顺式氯氰菊酯和溴氰菊酯均产生了抗药性，氯氟氰菊酯和高效氯氰菊酯为可疑抗性，而对有机磷类的马拉硫磷、杀螟硫磷和残杀威均敏感，与黄慕嫦等^[24]对江门市白纹伊蚊的抗药性测定结果一致。瑞丽市城区埃及伊蚊和白纹伊蚊对部分拟除虫菊酯类的抗性程度不同，埃及伊蚊的抗药性水平略高于白纹伊蚊，而对有机磷类杀虫剂均敏感。与孟凤霞等^[25]对登革热疫情防控治理观点一致。可能与本次白纹伊蚊采集地多为城郊，而城郊杀虫剂喷洒频率和数量较城区少有关。

蚊类产生抗药性的机制主要包括代谢抗性和靶标抗性^[26]，本次调查埃及伊蚊和白纹伊蚊对多种拟除虫菊酯类杀虫剂均已产生抗性，其抗性具体机制有待进一步研究。本研究证实，瑞丽市埃及伊蚊和白纹伊蚊对多种拟除虫菊酯类杀虫剂均产生了不同程度的抗药性，而对有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂仍较敏感。在今后的登革热防控中，应停用或限制使用已产生抗性的杀虫剂，要合理、规范地使用杀虫剂，同时注意施药剂量，轮换交替使用不同类型的杀虫剂，或使用复配杀虫剂，以延缓抗药性的发展。同时，定期开展杀虫剂抗药性监测工作，加强政府主导和媒介可持续综合治理策略的落实，抓好爱国卫生运动，各级各部门和全市居民积极开展以清除孳生地为主的防蚊、灭蚊活动。