中国媒介生物学及控制杂志  2017, Vol. 28 Issue (4): 347-349

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靳木子, 云华, 陈宇飞, 许睿星, 李彬
JIN Mu-zi, YUN Hua, CHEN Yu-fei, XU Rui-xing, LI Bin
2014-2015年内蒙古口岸地区鼠类及其携带病原体调查
Investigation and analysis of rodent-borne pathogens in Inner Mongolia port areas of China from 2014 to 2015
中国媒介生物学及控制杂志, 2017, 28(4): 347-349
Chin J Vector Biol & Control, 2017, 28(4): 347-349
10.11853/j.issn.1003.8280.2017.04.010

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收稿日期: 2017-04-19
网络出版时间: 2017-06-12 16:25
2014-2015年内蒙古口岸地区鼠类及其携带病原体调查
靳木子, 云华, 陈宇飞, 许睿星, 李彬     
内蒙古国际旅行卫生保健中心, 呼和浩特 010020
摘要: 目的 调查内蒙古口岸地区鼠类分布及其携带病原体情况。方法 2014年5月至2015年4月,采用夹夜法捕获内蒙古口岸地区的鼠类并对其进行分类、分布调查,采用PCR或RT-PCR对鼠类样本进行鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)、伯氏疏螺旋体和汉坦病毒核酸检测。结果 共捕获鼠类19种828只,其中五趾跳鼠、达乌尔黄鼠和黑线仓鼠(背纹仓鼠)数量较多,分别占捕获总数的27.05%(224/828)、23.19%(192/828)和17.39%(144/828),各鼠种分布差异明显。在长耳跳鼠中检测出鼠疫菌;黑线仓鼠(背纹仓鼠)、长耳跳鼠、五趾跳鼠和达乌尔黄鼠中检测出伯氏疏螺旋体;在黑线仓鼠(背纹仓鼠)、长耳跳鼠、小家鼠、五趾跳鼠和达乌尔黄鼠中均检测出汉坦病毒。结论 内蒙古口岸地区鼠类分布广、种类多,存在鼠疫菌、伯氏疏螺旋体和汉坦病毒的自然感染,应加强鼠传疾病的监测和防控。
关键词: 内蒙古口岸     鼠类     病原体     监测    
Investigation and analysis of rodent-borne pathogens in Inner Mongolia port areas of China from 2014 to 2015
JIN Mu-zi, YUN Hua, CHEN Yu-fei, XU Rui-xing, LI Bin     
Inner Mongolia International Health Care Center, Hohhot 010020, Inner Mongolia Autonomous Region, China
Supported by the General Administration of Quality Supervision, Inspection and Quarantine of the People's Republic of China Scientific Research Subject(No. 2015IK176) and the Natural Science Foundation of Inner Mongolia Autonomous Regionof China(No. 2015BS0805)
Abstract: Objective To investigate the pathogen carrier in Inner Mongolia Manchuria port in 2014-2015, in order to provide material basic for further work in epidemic monitoring. Methods To investigate the distribution of rodents, and detect pathogens using PCR or RT-PCR method from May 2014 to April 2015 in Inner Mongolia port areas. Results A total of 828 rodents of 19 species, of which Allactaga sibirica, Spermophilus dauricus, and Cricetulus barabensis accounted for 27.05%(224/828), 23.19%(192/828), and 17.39%(144/828), respectively. There were significant differences in the distribution of rodent species. Detection of Yersinia pestis DNA from the Euchoreutes naso, of Borrelia burgdorferi from Cricetulus barabensis, Euchoreutes naso, Allactaga sibirica, S. dauricus, of Hantavirus from C. barabensis, E. naso, Mus musculus, A. sibirica, and S. dauricus. Conclusion There was a broad and diverse distribution of rodents in the Inner Mongolia. There were also natural infection with Y. pestis, B. burgdorferi, and Hantavirus. In the future, we should strengthen the monitoring and prevention and control of these diseases.
Key words: Inner Mongolia port     Rodent     Pathogen     Surveillance    

内蒙古自治区位于中国北部边疆,与蒙古国、俄罗斯交界,边境线长达4 200 km,具有边境线长、口岸多、交通不便和气候恶劣等特点,分布四大鼠疫疫源地,其中3块鼠疫疫源地与国外疫源地紧密相连[1-3]。内蒙古口岸毗邻国家传染病疫情不断,如蒙古国近20年境内鼠疫、炭疽、狂犬病、蜱传脑炎、口蹄疫和肝炎等经常发生,霍乱、禽流感和西尼罗热也有发生。随着国际贸易便利化的发展,口岸卫生检疫工作也面临新的挑战。根据周边口岸地区的土壤、植被、气候等变化,积极开展医学媒介生物的病原体检测工作,以便及时发现和控制疫情,防患于未然。通过对内蒙古各口岸地区鼠类及其携带病原体情况进行监测和分析,为该地区鼠传疾病的防制提供科学依据。

1 材料与方法 1.1 调查时间及地点

2014年5月至2015年4月,以内蒙古各口岸区域范围内为监测地点,包括二连浩特、满洲里、黑山头、室韦、阿日哈沙特、珠恩嘎达布其、甘其毛道、呼和浩特、策克、额布都格、呼伦贝尔和满都拉。

1.2 调查方法

依据SN/T 1240-2003《国境口岸鼠类监测规程》,采用ELTON夹夜法,使用2号铁板夹,夹距5 m,行距50 m,于每月14-16日连续布放3 d,每日18:00开始布夹,次日06:00收回,遇风雨雪天顺延。每日布放100夹,诱饵为油炸花生米。收夹时将捕获的鼠体连同鼠夹一起放入白色可密封塑料袋内,放置乙醚棉球麻醉鼠体表寄生物后封口,带回实验室,梳检鼠体表寄生虫,计数、登记并置于含75%乙醇的小玻璃瓶内,标记采集地点、日期和宿主,待分类鉴定;同时对鼠体进行测量、解剖,采集其血膜、鼠肺和肝组织置于医用冻存管内,保存于液氮罐中,待测。

1.3 病原体检测

将所获得的鼠肺和肝用消毒剪剪成10~100 mg(米粒)大小放入预先加好2颗ϕ 3 mm氧化锆颗粒的2 ml离心管中;加入800 μl 0.9%氯化钠溶液;26次/s振荡90 s,观察直至成匀浆;取适量用于RNA/DNA提取,其余匀浆液置于-80 ℃保存。提取操作分别按照RNA(TaKaRa,code No. 9767)提取试剂盒和DNA提取试剂盒(TaKaRa,code No. 9765)进行。采用Premix TaqTM(TaKaRa,code No. RR902A)检测鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)(来自于鼠肝组织)、伯氏疏螺旋体(来自于鼠肝组织)和汉坦病毒核酸(来自于鼠肺组织),PCR反应条件见表 1

表 1 PCR检测鼠类样本的反应条件 Table 1 Detection of tick samples by PCR
2 结果 2.1 鼠种分布

共捕获鼠类19种828只,其中满洲里口岸捕获数量最多,达184只,其次为甘其毛道口岸和珠恩嘎达布其口岸,分别为168和144只,见表 2。捕获的828只鼠中,五趾跳鼠(Allactaga sibirica)数量最多,占捕获总数的27.05%;其次为达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus)和黑线仓鼠(背纹仓鼠,Cricetulus barabensis),分别占23.19%和17.39%;而捕获的灰仓鼠(C. migratorius)、短尾仓鼠(C. eversmanni)和布氏田鼠(Lasiopodomys brandtii)数量最少,各2只。

表 2 2014-2015年内蒙古口岸鼠种分布(只) Table 2 The spacial distribution of rodent species in Inner Mongolia ports, 2014-2015
2.2 鼠类月捕获情况

2014年6月捕获鼠数量最多,达172只,其次为8、7、5月,分别捕获163、153和143只;2015年1-3月各捕获1只,各口岸月捕获情况见表 3

表 3 2014-2015年内蒙古口岸鼠类月捕获情况(只) Table 3 The temporal distribution of rodents in Inner Mongolia ports, 2014-2015
2.3 病原体检测结果

828份鼠类样本中,在7份长耳跳鼠样本中检测出鼠疫菌核酸阳性1份;在黑线仓鼠(背纹仓鼠)、长耳跳鼠、小家鼠、五趾跳鼠和达乌尔黄鼠中均检测出汉坦病毒核酸阳性,共12份,分别占各鼠种总数的1.39%(2/144)、14.29%(1/7)、13.21%(7/53)、0.45%(1/224)和0.52%(1/192);在黑线仓鼠(背纹仓鼠)、长耳跳鼠、五趾跳鼠和达乌尔黄鼠中均检测出伯氏疏螺旋体核酸阳性,共8份,分别占各鼠种的0.69%(1/144)、14.29%(1/7)、1.79%(4/224)和1.04%(2/192),见图 1

注:M. DNA Marker(1 000 bp)。A:1.鼠疫菌基因片段(525 bp);2.阴性对照。B:1、2.汉坦病毒基因片段(360 bp);3.阴性对照。C:1、2.伯氏疏螺旋体基因片段(630 bp);3.阴性对照 图 1 鼠类样本核酸检测结果 Figure 1 Electrophoresis of nucleic acid detection samples of rodents
3 讨论

内蒙古地区分布四大鼠疫疫源地,自20世纪80年代以来,该地区每年均开展动物鼠疫疫情监测,对鼠类及其携带病原体进行调查有重要意义[4-10]。2014-2015年内蒙古口岸地区鼠种较多,达20种,以五趾跳鼠数量最多,达乌尔黄鼠次之并分布一定数量的黑线仓鼠(背纹仓鼠)、短尾仓鼠、灰仓鼠和布氏田鼠等。随着现代监测及检测技术的发展,大规模暴发鼠传疾病的概率较小,但仍不能忽视鼠传疾病的防控工作,应每年、每季度定点监测,对鼠类高密度地区进行重点防范,如满洲里口岸地区、甘其毛道口岸地区、珠恩嘎达布其口岸地区等。本调查发现,内蒙古口岸地区存在鼠疫菌、伯氏疏螺旋体和汉坦病毒的自然感染,为该地区鼠传疾病的防制提供了科学依据。

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