扩展功能
文章信息
- 康东梅, 师灿南, 开文龙, 孟凤霞
- KANG Dong-mei, SHI Can-nan, KAI Wen-long, MENG Feng-xia
- 宿主动物对不同宿主型猫栉首蚤吸血率和饱血率的影响
- Effect of hosts on blood-sucking and blood engorging in different host type cat fleas, Ctenocephalides felis
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2017, 28(3): 197-200
- Chin J Vector Biol & Control, 2017, 28(3): 197-200
- 10.11853/j.issn.1003.8280.2017.03.001
-
文章历史
- 收稿日期: 2017-02-07
- 网络出版时间: 2017-04-11 16:29
2 河北省鼠疫防治所, 河北 张家口 075000
2 Institute of Plague Prevention and Control of Hebei Province
猫栉首蚤(Ctenocephalides felis)是重要的医学昆虫,其宿主分布广,以家猫、野猫和家犬等为主,其次是啮齿类动物和人,是多种疾病的直接或间接媒介。中国[1]、美国[2]、法国[3]和新西兰[4]等国家均从猫栉首蚤体内分离到了汉赛巴尔通体(Bartonella henselae)。Finkelstein等[5]实验证明猫栉首蚤粪便内汉赛巴尔通体可存活3 d,并可在猫栉首蚤体内繁殖。Woods等[6]指出猫栉首蚤通过吸血的方式在猫之间传播大型血巴尔通体(Haemobartonella)。Tsai等[7]在猫栉首蚤体内检测到了立克次体。若吸入携带病原体的蚤粪干燥后产生的气溶胶可感染斑疹伤寒[8]。实验室研究表明,猫栉首蚤是乌干达地区地方性鼠疫的潜在带菌者,是次要传播媒介[9-10],可见猫栉首蚤的媒介地位正在提高。吸血是猫栉首蚤成蚤摄取营养和补充水分的唯一途径,对其成熟、交配、生殖及存活期等均有决定性意义,也是传播疾病的主要途径。研究猫栉首蚤的吸血率和饱血率,以了解其生长发育的自然规律,对研究其宿主范围、宿主特异性等重要特征有重要意义[11],并直接影响已感染鼠疫耶尔森菌或其他病原体疫蚤的传播效能。因此,研究猫栉首蚤的吸血活动有重要流行病学意义。
中国CDC传染病预防控制所媒介生物控制室对猫栉首蚤多年养殖驯化,成功利用大白鼠和小白鼠为其供血,且繁殖出正常稳定的世代[12]。通过调查不同宿主型猫栉首蚤对供血动物的吸血率和饱血率及其宿主分化情况,为猫栉首蚤相关传染病的传播机制及媒介效能等研究提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 猫栉首蚤品系大白鼠株猫栉首蚤为2006年开始以大白鼠为供血动物饲养至今的品系;小白鼠株猫栉首蚤为2005年开始以小白鼠为供血动物饲养至今的品系;猫株猫栉首蚤为自然状态下收集的家猫体表猫栉首蚤的卵孵化而获得的品系。
在温度(27±1)℃、相对湿度(75±5)%的条件下饲养猫栉首蚤,收集其卵后进行人工饲养幼虫[13]至化蛹,将同一天羽化的蛹均匀铺放于养蚤缸(ϕ 30 cm,高30 cm)底,2~3 d后轻轻吹动蛹茧,刺激其羽化。若成蚤出现,用吸蚤器吸出,作为刚刚羽化蚤;同样方法分别吸取30 min内和1 d内羽化的蚤(即1日龄蚤),将1日龄蚤分别放置1~3 d,获得2~ 4日龄蚤。为便于观察,本研究主要用雌蚤(雌:雄约为15:1)。
1.2 实验动物大白鼠选用清洁级SD大鼠,小白鼠选用清洁级的BALB/c小鼠,均购于中国人民解放军军事医学科学院,编号为xcxk-(军)2012-0004。实验用猫为市售家猫幼猫(4月龄),给猫洗澡后检查其体表,确保其无体表寄生虫,饲养1个月未见异常,备用。
1.3 猫栉首蚤吸血率和饱血率的测定绑定宿主动物(大白鼠、小白鼠和猫)的四肢和头部,剪去腹毛后用蒸馏水洗净。取刚羽化、30 min内羽化和1~4日龄猫栉首蚤分别于15 ml离心管中,管口覆以纱布并用橡皮筋固定,置于供血动物裸露的腹部吸血5、10、20和30 min,测定其吸血率和饱血率,实验重复3次以上。
吸血率=吸血蚤数/观察蚤数×100%
饱血率=饱血蚤数/吸血蚤数×100%
1.4 宿主动物对猫栉首蚤吸血率和饱血率的影响用1.3方法绑定宿主动物,分别取4日龄的大白鼠株、小白鼠株和猫株猫栉首蚤各10~30匹,雌:雄= 15:1,置于宿主动物裸露的腹部吸血30 min,测定吸血率和饱血率。
1.5 判断标准将刚吸血的猫栉首蚤置于显微镜下观察,腹部未见鲜红血液记为未吸血蚤(图 1A),可见鲜红血液的记为吸血蚤(图 1B),血液充盈的记为饱血蚤(图 1C)。
1.6 统计学处理利用SAS 9.4软件对猫栉首蚤吸血率和饱血率进行统计学分析;构成比比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 羽化后不同时间猫栉首蚤的吸血率和饱血率刚羽化、30 min内羽化和1日龄大白鼠株猫栉首蚤对大白鼠的吸血率分别为(29.43 ± 30.24)%、(33.34±19.63)%和(34.24±11.24)%,差异无统计学意义(χ2=3.578,P=0.167),且均未见饱血;3、4日龄猫栉首蚤的吸血率分别为(98.95±0.02)%和(98.61±0.04)%,差异亦无统计学意义(χ2=2.496,P=0.114)。2~4日龄猫栉首蚤的饱血率分别为(23.57 ± 24.77)%、(68.72 ± 20.88)%和(79.03 ± 18.72)%,差异有统计学意义(χ2=136.206,P<0.001),见表 1。羽化后相同时间的大白鼠株猫栉首蚤在5、10、20和30 min的吸血率和饱血率均随吸血时间的延长呈递增趋势(图 2),但3、4日龄大白鼠株猫栉首蚤的吸血率递增趋势不明显(图 2)。
小白鼠株猫栉首蚤对小白鼠的吸血率和饱血率与大白鼠株猫栉首蚤对大白鼠的吸血情况类似,其刚羽化、30 min内羽化和1日龄猫栉首蚤的吸血率分别为(12.98±16.40)%、(14.84±9.04)%和(16.72± 8.38)%,差异无统计学意义(χ2=1.126,P=0.570),且均未见饱血;3、4日龄猫栉首蚤的吸血率分别为(98.63±2.86)%和(99.37±1.51)%,差异亦无统计学意义(χ2=0.904,P=0.342);2~4日龄猫栉首蚤的饱血率分别为(15.66±17.25)%、(60.54±20.00)%和(79.83±15.88)%,差异有统计学意义(χ2=219.709,P<0.001),见表 1。羽化后相同时间的小白鼠株猫栉首蚤在5、10、20和30 min的吸血率和饱血率均随吸血时间的延长呈递增趋势,但3、4日龄猫栉首蚤的吸血率增长趋势不明显(图 3)。
2.2 猫栉首蚤对不同宿主动物的吸血率和饱血率猫株、大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤分别对猫、大白鼠和小白鼠进行吸血,其中猫株猫栉首蚤对3种供血动物的喜好顺序为猫>大白鼠=小白鼠;大白鼠株猫栉首蚤为大白鼠>猫>小白鼠,小白鼠株猫栉首蚤为小白鼠=猫>大白鼠(表 2)。大白鼠株猫栉首蚤对大白鼠、小白鼠株猫栉首蚤对小白鼠的吸血率均较高,但饱血率均不及其供血动物,可见经过长期驯化,大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤均已较好地适应了各自的供血动物。
3 讨论通过测定羽化后不同时间的大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤的吸血率和饱血率发现,其吸血率随着羽化后时间的延长呈递增趋势,2~4日龄猫栉首蚤的饱血率亦呈递增趋势。张洪杰等[14]研究表明,方形黄鼠蚤松江亚种(C. tesquorum sungaris)的吸血率随蚤龄增长而增加,成蚤随蚤龄的增加对营养和水分的需求量更大。2~4日龄猫栉首蚤的首次饱血时间为10~20 min。Cadiergues等[15]证实雌性猫栉首蚤首次饱血时间为18~25 min,雄性为8~11 min,与本研究基本相符。同时本研究发现,大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤均对各自的驯化宿主体(大白鼠和小白鼠)有较高的饱血率,而对猫的饱血效果欠佳。另有研究表明,蚤一次饱血的时间取决于该蚤对宿主的依附程度[11]。可见,大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤均已较好地适应了新的宿主动物。
通过大白鼠株、小白鼠株和猫株猫栉首蚤对大白鼠、小白鼠和猫的吸血率和饱血率比较发现,大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤均已适应了大白鼠和小白鼠。与吴丹丹[12]、林杰等[16]和Wang等[17]研究结论一致。说明猫栉首蚤经过10多年的驯化已表现出明显的宿主特异性分化,说明在改变供血动物的情况下,猫栉首蚤为了生存,其较强的适应能力使其产生宿主分化,并可繁殖后代。
猫栉首蚤作为宿主体表寄生虫,宿主不仅是其食物源,也是其最重要的外部环境。具有稳定后代的大白鼠株和小白鼠株猫栉首蚤可为其相关传染病疫苗、传播机制[18]和媒介效能[19]等相关研究和杀虫剂的研发[20]提供大量实验用蚤,但宿主分化是否会引起猫栉首蚤传播疾病谱的改变,值得进一步研究和关注。
[1] | 栗冬梅, 刘起勇, 俞东征, 等. 用PCR方法检出蚤类携带巴尔通体[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2005, 16(1): 5–8. |
[2] | Higgins JA, Radulovic S, Schriefer ME, et al. Rickettsia felis:a new species of pathogenic Rickettsia isolated from cat fleas[J]. J Clin Microbiol, 1996, 34(3) : 671–674 . |
[3] | Rolain JM, Franc M, Davoust B, et al. Molecular detection of Bartonella quintana, B. koehlerae, B. henselae, B. clarridgeiae, Rickettsia felis, and Wolbachia pipientis in cat fleas, France[J]. Emerg Infect Dis, 2003, 9(3) : 338–342 .DOI:10.3201/eid0903.020278. |
[4] | Kelly PJ, Meads NA, Theobald A, et al. Rickettsia felis, Bartonella henselae, and B. clarridgeiae, New Zealand[J]. Emerg Infect Dis, 2004, 10(5) : 967–968 .DOI:10.3201/eid1005.030986. |
[5] | Finkelstein JL, Brown TP, O'Reilly KL, et al. Studies on the growth of Bartonella henselae in the cat flea (Siphonaptera:Pulicidae)[J]. J Med Entomol, 2002, 39(6) : 915–919 .DOI:10.1603/0022-2585-39.6.915. |
[6] | Woods JE, Brewer MM, Hawley JR, et al. Evaluation of experimental transmission of Candidatus Mycoplasma haemominutum and Mycoplasma haemofelis by Ctenocephalides felis to cats[J]. Am J Vet Res, 2005, 66(6) : 1008–1012 .DOI:10.2460/ajvr.2005.66.issue-6. |
[7] | Tsai KH, Lu HY, Huang JH, et al. Rickettsia felis in cat fleas in Taiwan[J]. Vector Borne Zoonotic Dis, 2009, 9(5) : 561–563 .DOI:10.1089/vbz.2008.0076. |
[8] | 范明远, 栾明春. 新发现的蚤传斑点热立克次体病[J]. 中国人兽共患病学报, 2008, 24(1): 74–77. |
[9] | McTier TL, Shanks DJ, Jernigan AD, et al. Evaluation of the effects of selamectin against adult and immature stages of fleas (Ctenocephalides felis felis)on dogs and cats[J]. Vet Parasitol, 2000, 91(3/4) : 201–212 . |
[10] | Schenker R, Tinembart O, Humbert-Droz E, et al. Comparative speed of kill between nitenpyram, fipronil, imidacloprid, selamectin and cythioate against adult Ctenocephalides felis (Bouché)on cats and dogs[J]. Vet Parasitol, 2003, 112(3) : 249–254 .DOI:10.1016/S0304-4017(02)00425-9. |
[11] | 刘泉, 陈建新. 蚤类吸血行为和血液消化的研究概述[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 1994, 5(4): 309–319. |
[12] | 吴丹丹. 猫栉首蚤生物学及不同地理种群系统进化研究[D]. 哈尔滨: 东北林业大学, 2010. |
[13] | 孟凤霞, 刘起勇, 冯延龙, 等. 印鼠客蚤实验室种群的羽化规律研究[J]. 寄生虫与医学昆虫学报, 2008, 15(2): 86–88. |
[14] | 张洪杰, 吴厚永, 刘泉. 方形黄鼠蚤松江亚种在不同动物体上吸血率的观察[J]. 地方病通报, 1991, 6(4): 107–108. |
[15] | Cadiergues MC, Hourcq P, Cantaloube B, et al. First bloodmeal of Ctenocephalides felis felis(Siphonaptera:Pulicidae)on cats:time to initiation and duration of feeding[J]. J Med Entomol, 2000, 37(4) : 634–636 .DOI:10.1603/0022-2585-37.4.634. |
[16] | 林杰, 孟凤霞, 吴丹丹. Y型嗅觉仪在蚤类对宿主选择性研究中的应用[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2011, 22(2): 103–106,107. |
[17] | Wang YG, Tian J, Liu QY, et al. Influence of bloodmeal host on blood feeding, egg production, and offspring sex ratio of Ctenocephalides felis felis(Siphonaptera:Pulicidae)[J]. J Med Entomol, 2016, 53(4) : 888–893 .DOI:10.1093/jme/tjw026. |
[18] | 杨小冉, 刘起勇, 崔步云, 等. BALB/c及昆明小鼠的汉赛巴尔通体实验室感染模型[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2008, 19(1): 41–43. |
[19] | 刘小闪, 刘起勇. 汉赛巴尔通体媒介和宿主的实验室研究进展[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2006, 17(2): 157–159. |
[20] | 孟凤霞, 刘起勇. 杀蚤剂的使用历史及蚤的综合防制[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2004, 15(5): 341–343. |