中国媒介生物学及控制杂志  2016, Vol. 27 Issue (1): 77-79

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陈祖华, 潘鸿宇, 唐刚, 黄进, 黄星辉, 沈来红, 闫姝利, 刘瑜
CHEN Zu-hua, PAN Hong-yu, TANG Gang, HUANG Jin, HUANG Xing-hui, SHEN Lai-hong, YAN Shu-li, LIU Yu
攀枝花市致倦库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性研究
Resistance of Culex pipiens quinquefasciatus larvae to commonly used insecticides in Panzhihua city, Sichuan
中国媒介生物学及控制杂志, 2016, 27(1): 77-79
Chin J Vector Biol & Control, 2016, 27(1): 77-79
10.11853/j.issn.1003.4692.2016.01.025

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收稿日期: 2015-11-02
攀枝花市致倦库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性研究
陈祖华, 潘鸿宇, 唐刚, 黄进, 黄星辉, 沈来红, 闫姝利, 刘瑜    
攀枝花市疾病预防控制中心传染性疾病预防控制科, 四川 攀枝花 617000
摘要: 目的 了解四川省攀枝花市致倦库蚊幼虫对6种常用杀虫剂的抗性状况,为科学使用杀虫剂提供依据。方法 2014年从攀枝花市5个县(区)采集幼虫,用WHO推荐的幼虫浸渍法,测定4龄期幼虫的半数致死浓度(LC50)。结果 攀枝花市致倦库蚊幼虫除对仲丁威较敏感(R/S<1)外,对高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯均产生不同程度的抗性,抗性倍数依次分别为75.00、12.40和2.50倍;对双硫磷、敌敌畏的抗性倍数分别为1.67和1.65倍;对仲丁威的抗性倍数<1。结论 在灭蚊工作中应采取综合性防制措施,科学合理使用杀虫剂。
关键词: 致倦库蚊幼虫     抗药性     研究    
Resistance of Culex pipiens quinquefasciatus larvae to commonly used insecticides in Panzhihua city, Sichuan
CHEN Zu-hua, PAN Hong-yu, TANG Gang, HUANG Jin, HUANG Xing-hui, SHEN Lai-hong, YAN Shu-li, LIU Yu     
Panzhihua Center for Disease Control and Prevention, Panzhihua 617000, Sichuan Province, China
Abstract: Objective To investigate the resistance of Culex pipiens quinquefasciatus larvae to six insecticides and direct future application of insecticides. Methods Mosquito larvae were collected in 2014 from 5 counties (districts) of Panzhihua city, and tested by WHO recommended larval dipping method for medium lethal concentration. Results Culex pipiens quinquefasciatus larvae collected from Panzhihua city were susceptible to fenobucarb (R/S<1), but showed various degrees of resistance to cypermethrin, permethrin and deltamethrin. The resistance ratio of Cx. pipiens quinquefasciatus larvae was 75.00 fold to beta cypermethrin, 12.40 fold to permethrin 2.50 fold to deltamethrin. Slight tolerance was indicated to temephos and DDVP where resistance ratios were 1.67 and 1.65 respectively. Conclusion It was necessary to apply integrated measures and use insecticides strategically in controlling mosquitoes.
Key words: Culex pipiens quinquefasciatus larvae     Insecticide resistance     Research    


化学杀虫剂的使用能有效控制和杀灭病媒生物,但是,长期以来,由于大量使用化学杀虫剂,导致蚊虫对其产生了不同程度的抗药性[1],从而给蚊虫的防制带来困难。攀枝花市使用化学杀虫剂灭蚊已达多年,但从未开展过蚊虫对化学杀虫剂的抗药性监测,化学杀虫剂的使用也处于混乱状态,而致倦库蚊(Culex pipiens quinquefasciatus)又是攀枝花市的优势蚊种[2],也是重要的病媒昆虫之一。因此,为掌握攀枝花市卫生害虫的抗药性水平,选择合适的化学杀虫剂,为今后大规模的病媒生物防制和爱国卫生的除害虫活动提供科学依据,选择攀枝花市城区和城郊结合部的致倦库蚊幼虫对6种常用杀虫剂进行抗药性测定,现将结果报告如下。

1 材料与方法 1.1 供试药剂

92.7%敌敌畏、90.0%氯菊酯、95.95%溴氰菊酯、87.90%双硫磷、95.2%高效氯氰菊酯、95.0%仲丁威,均由中国疾病预防控制中心(CDC)传染病预防控制所媒介生物控制室提供,稀释溶剂为丙酮(分析纯),由成都市科龙化工试剂厂生产。

1.2 试虫采集及饲养

采用勺捕法,采集攀枝花市5个城区和城郊结合部的现场种群幼虫,5个致倦库蚊现场种群幼虫带回攀枝花市CDC病媒生物实验室后,在温度25 ℃、相对湿度80%、光周期为14 h∶10 h的控制条件下,成蚊喂食10%糖水,并用小白鼠供血,收集卵块后,用羊肝粉、馒头粉(按1∶1混合)喂食幼虫,供测定。取分类鉴定后繁殖1~2代的4龄幼虫供试。

1.3 实验方法

采用WHO推荐的浸渍法[3]。用丙酮为溶剂配制杀虫剂母液备用。使用隔夜自来水(脱氯水),在250 ml烧杯中配制5~7个系列浓度,即在250 ml的烧杯(或白瓷碗等)中加入200 ml脱氯水和0.5 ml相应的药液,加入20条健康供试幼虫,在(25±1)℃、相对湿度(70±10)%、光照∶黑暗=16 h∶8 h的条件下,24 h调查并记录各组的死亡数,剔除化蛹数,计算死亡率;对照组以200 ml脱氯水加入相应量的丙酮,同一浓度实验均重复3次。若化蛹率>10%,对照组死亡率>20%时,实验重做。

死亡判断标准:用锐器轻触幼虫呼吸管,不能运动或仅对刺激做微小反应(抽搐),并且不能主动逃逸避免刺激的持续发生,即为死亡。

1.4 统计与计算

用SPSS软件进行数据统计,记录处理虫数、自由度。通过分析获得半数致死浓度(LC50)值及其95%可信区间(95%CI),毒力回归线的斜率b值及其标准差,χ2值,计算抗性倍数。

1.5 敏感品系

敏感品系幼虫对常用杀虫剂的LC50数据来自四川省CDC寄生虫病研究所蚊虫养殖室测定的结果,溴氰菊酯为0.000 4 mg/L,敌敌畏为0.303 mg/L,氯菊酯为0.005 mg/L,双硫磷为0.001 2 mg/L,高效氯氰菊酯为0.000 04 mg/L,仲丁威为0.884 mg/L。

1.6 抗性评价标准

根据抗性倍数判别抗性等级,抗性倍数≤2,为敏感(-);2<抗性倍数≤10,为低抗性(+);10<抗性倍数≤20,为中抗性(++);抗性倍数>20,为高抗性(+++)[4]。抗性倍数=现场种群的LC50/敏感品系的LC50

2 结 果 2.1 LC50及其95%CI

攀枝花市致倦库蚊幼虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的溴氰菊酯、氯菊酯、高效氯氰菊酯的LC50及其95%CI分别为0.001(0.001~0.002)、0.062(0.052~0.074)和0.003(0.003~0.004) mg/L;对有机磷类杀虫剂敌敌畏和双硫磷的LC50及其95%CI分别为0.501(0.436~0.575)和0.002(0.001~0.002)mg/L;对氨基甲酸酯类仲丁威的LC50及其95%CI为0.187(0.162~0.215) mg/L,见表 1

表 1 攀枝花市致倦库蚊幼虫对常用杀虫剂的敏感性
2.2 抗性倍数

攀枝花市致倦库蚊幼虫对拟除虫菊酯类杀虫剂溴氰菊酯的抗性倍数为2.50倍,为低抗性水平,对氯菊酯的抗性倍数为12.40倍,为中抗性水平,对高效氯氰菊酯的抗性倍数为75.00倍,为高抗性水平;对有机磷类杀虫剂敌敌畏和双硫磷的抗性倍数分别为1.65和1.67倍,均为敏感水平;对氨基甲酸酯类仲丁威的抗性倍数为0.21倍,为敏感水平,见表 1

3 讨 论

本次实验结果显示,攀枝花市致倦库蚊幼虫对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性普遍存在,抗性倍数在2.50~75.00倍之间。高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯分别处于高抗、中抗和低抗水平,与李成玲等[5]的研究结果一致,对有机磷类杀虫剂敌敌畏和双硫磷及氨基甲酸酯类仲丁威的抗性均接近敏感水平。由于拟除虫菊酯类对靶标生物杀灭效果好,对人畜等哺乳动物低毒、低残留,使用安全,加之近年来攀枝花市在国家卫生城市创建和复审过程中又多选用拟除虫菊酯类杀虫剂用于防治蚊、蝇、蜚蠊等病媒生物,且用药量大、使用频率高;而对有机磷类杀虫剂和氨基甲酸酯类杀虫剂应用较少,其抗性倍数接近于正常品系。由此可见,抗性发生程度与化学杀虫剂的用药量、使用频率等密切相关[6]。此外,根据有关文献报道,致倦库蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂可产生交互抗性[7],所以导致拟除虫菊酯类杀虫剂抗性水平普遍高于其他类杀虫剂。

2000年起,随着我国限制含仲丁威成分的卫生杀虫剂产品登记,仲丁威退出市场,目前在我国登记的卫生用杀虫剂中,除进口产品含恶虫威外,氨基甲酸酯类杀虫剂只有残杀威可用于蚊虫控制[8],而攀枝花市近些年很少使用有效成分为仲丁威的药物进行灭蚊,故致倦库蚊幼虫对其尚未产生抗性。实验结果显示,攀枝花市致倦库蚊幼虫对敌敌畏的敏感性接近于正常品系,表明抗性程度有所降低。一方面敌敌畏灭蚊效果好、成本低,是我国20世纪80年代防治卫生害虫的主要杀虫剂,80年代以后,拟除虫菊酯类杀虫剂在虫害防治中使用越来越广泛,过去以敌敌畏为主的位置被取而代之,由于敌敌畏使用量的减少,说明敌敌畏在降低选择压后,害虫对其抗性会逐渐降低,因此敌敌畏用药量相应减少或停止使用,可能是导致其抗性有所降低的重要原因。另一方面,由于敌敌畏残效期短,不适合滞留喷洒及长效灭蚊,居家使用主要以熏蒸作用为主,使用方法的限制,也是敌敌畏未产生明显抗性的原因之一[9]

使用化学杀虫剂防治致倦库蚊虽然是必不可少的防治手段,但必须强调媒介综合治理的策略,以防止或减缓蚊虫抗性的产生。因此,提示攀枝花市在以后的灭蚊过程中,应尽量减少对拟除虫菊酯类杀虫剂的使用量,适当增加对双硫磷等有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂的使用[9]。同时建议在室内灭蚊药品采用混配,或替换使用不同作用机制的杀虫剂,以减少使用量。外环境治理采用敌敌畏复配其他有机磷类杀虫剂,并利用增效剂来提高杀虫效果;同时也警示在进行卫生害虫和农业害虫防治时,要首选环境防治和物理防治等对环境友好的防治措施,选择化学防治时,要顾全大局,从全市、大范围的角度开展害虫防治工作,开展目标害虫的抗药性监测工作,要做好杀虫剂使用的整体规划,以减少或延缓抗药性的发生与发展。

参考文献
[1] 乔传令,崔峰. 蚊虫杀虫药剂的抗性及防治策略[J].中国媒介生物学及控制杂志,2010,21(2):89-92.
[2] 陈祖华,唐刚,刘瑜,等. 攀枝花市蚊类监测分析[J].中华卫生杀虫药械,2015,21(1):53-55.
[3] 刘维德. 蚊虫抗药性及其测定[M].北京:科学出版社,1979:63-69.
[4] 龚震宇,侯娟,任樟尧,等. 浙江省淡色库蚊和白纹伊蚊对常用化学杀虫剂的抗性调查[J].中国媒介生物学及控制杂志,2012,23(5):458-460.
[5] 李成玲,徐建敏,梁雪莹,等. 广州市致倦库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗药性研究[J].中华卫生杀虫药械,2015,21(1):32-36.
[6] 任樟尧,朱江,黄良. 致乏库蚊对6种常用杀虫剂的抗性监测[J].中华卫生杀虫药械,2004,10(6):377-378.
[7] 邱立红,张文吉. 不同抗性水平家蝇对有机磷、拟除虫菊酯等药剂的交互抗性研究[J].中国农业大学学报,1994,4(3):86-92.
[8] 中华人民共和国农业部农药检定所. 2011农药管理信息汇编[G].北京:中国农业出版社,2011:1325-1326.
[9] 韩晓莉,黄钢,马丽华,等. 河北省淡色库蚊对常用杀虫剂的抗药性监测结果分析[J].中国媒介生物学及控制杂志,2014,25(6):530-533.