中国媒介生物学及控制杂志  2016, Vol. 27 Issue (1): 50-51

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黄艳辉, 罗勇, 张利萍
HUANG Yan-hui, LUO Yong, ZHANG Li-ping
白纹伊蚊试虫质量评价方法研究
Quality evaluation system of Aedes albopictus population in the laboratory
中国媒介生物学及控制杂志, 2016, 27(1): 50-51
Chin J Vector Biol & Control, 2016, 27(1): 50-51
10.11853/j.issn.1003.4692.2016.01.016

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收稿日期: 2015-08-20
白纹伊蚊试虫质量评价方法研究
黄艳辉, 罗勇, 张利萍    
广州立白企业集团有限公司, 广东 广州 510170
摘要: 目的 建立一套关于农药登记用卫生杀虫剂室内实验试虫白纹伊蚊的质量评价体系。方法 采用假设检验中的u检验方法,对室内饲养的白纹伊蚊试虫进行质量评价。结果 建立了一套具体的试虫白纹伊蚊质量评价体系,包括样本采集、试虫体重数据收集及处理、统计推断等评价步骤。结论 该评价体系能有效评价试虫白纹伊蚊的质量,对于驱蚊类药物的配方筛选和质量评级均有重要应用意义。
关键词: 白纹伊蚊     试虫     质量评价    
Quality evaluation system of Aedes albopictus population in the laboratory
HUANG Yan-hui , LUO Yong, ZHANG Li-ping     
Guangzhou Liby Enterprise Group Co., Ltd, Guangzhou 510170, Guangdong Province, China
Abstract: Objective To establish a quality evaluation system of Aedes albopictus population in the laboratory. Methods A u test method was used to evaluate the quality of laboratory rearing Ae. albopictus. Results A specific quality evaluation system for Ae. albopictus has been established, which includes sample collection, wet weights data collection and processing, statistical inference. Conclusion This system can effectively evaluate the quality of Ae. albopictus, and it is of great significance to repellents' laboratory efficacy tests.
Key words: Aedes albopictus     Testing insects     Quality evaluation    


白纹伊蚊(Aedes albopictus)是重要的病媒生物防制对象之一[1, 2],是驱蚊实验的主要试虫[3, 4],是卫生杀虫剂室内药效实验中评价驱避剂的基本实验素材[5]。农药登记用卫生杀虫剂室内实验试虫白纹伊蚊(简称白纹伊蚊)的质量直接影响着驱蚊产品的药效检测结果,而药效检测结果是驱蚊产品配方筛选及质量定级的主要依据。我国农业部已于2010年12月发布了白纹伊蚊的室内养殖标准,并规定饲养控制指标[6],但是对具体的评价方法,包括样本采集、体重称量方法以及体重计算方法等均未作规定。本研究应用统计推断方法中的大样本平均数的假设检验——u检验方法[7],以白纹伊蚊室内养殖标准规定的雌蚊体重≥1.6 mg/♀的白纹伊蚊试虫为总体,建立了试虫白纹伊蚊质量评价体系,并结合实例,进行进一步阐述。

1 材料与方法 1.1 试虫

所用白纹伊蚊引自广东省疾病预防控制中心,在本实验室标准化饲养8年。试虫养殖条件:温度(26±2)℃,湿度(75±10)%,光照14 h∶10 h (L∶D)。饲养笼规格为30 cm×30 cm×30 cm,控制每笼成蚊的密度为500~600只。成虫羽化第3~6天,在饲养笼中放入用固定夹固定的小白鼠,供雌蚊吸血6~12 h,使其产卵。

1.2 仪器、器皿与试剂

德国Sartorius CPA225D 1/105电子天平〔赛多利斯科学仪器(北京)有限公司生产〕;30 mm×50 mm称量瓶、培养皿、镊子、捕蚊器、乙醚。

1.3 质量评价

以笼为单位,在试虫用于测试之前,对用于驱蚊测试的白纹伊蚊进行质量评价。白纹伊蚊实验用成蚊体重控制指标为雌蚊体重≥1.6 mg/♀。

1.3.1 随机抽样

随机抽取3笼成蚊,抖动蚊笼,使蚊虫飞舞,充分混匀,用捕蚊器在每笼成蚊中随机捕捉雌蚊30只。

1.3.2 体重测定

每笼雌蚊分开称重,将待测雌蚊用乙醚麻醉后,将30只雌蚊随机分成6组,每组5只,以组为单位称量试虫体重(精确至0.01 mg),并记录体重值。

1.3.3 统计学分析

数据处理与计算均采用Excel软件。

1.3.3.1 数据整理

计算每组雌蚊的体重平均值和各样本的平均值,然后再计算样本平均数及样本标准差,见表 1

1.3.3.2 统计推断

总体方差σ2未知,但样本为大样本(n=90),可用样本方差s2代替总体方差,采用u检验,检验所取样本平均数(x)的总体平均数(μ)是否属于某一平均数(μ0,体重≥1.6 mg/♀)的指定总体。u检验公式:

式中,sx为样本平均数的标准误;s为样本标准差。

2 结 果

质量评价的具体过程及结果:(1)由于试虫体重只有≥1.6 mg/♀时才符合要求,故用单尾检验。假设H0:μ<1.6 mg,即待测试虫达不到标准中规定的试虫体重,对于HAμ≥1.6 mg;(2)确定显著水平α=0.05;(3)检验计算:sx=0.003;u=(2.17-1.6)/0.003=190;(4)推断:当α=0.05时,单尾检验临界值u0.05=1.64。样本的|u|>u0.05,则P<0.05,那么在0.05显著水平上否定H0,接受HA,认为待测试虫的体重符合标准试虫的体重要求,试虫合格。

3 讨 论

在室内饲养白纹伊蚊时,一般会使用蚊笼来收集同一天羽化的成虫。本研究提出以每笼白纹伊蚊成虫为评价单位,分别对用于驱蚊药效测试的白纹伊蚊成虫进行质量评价。充分保证用于驱蚊药效测试的白纹伊蚊为合格试虫,进一步保证驱蚊药效测试结果的可靠性。

对于样本容量为30只的选择,首先是考虑统计推断的可靠性,因为抽样调查是用局部对整体进行估计和判断的一种方法,抽样的样本容量越大,抽样误差就越小[7],在生物统计中,样本容量30已属于大样本范畴;其次是考虑操作简易及避免资源浪费等因素,因为如果样本太大,会造成称量时间过长、蚊虫苏醒且不易控制等困难,而且取出的成虫已不能再用于药效测试,抽取太多会造成资源浪费。 在生物学实验和研究中,所得实验数据往往存在一定差异,这种差异可能是由随机误差引起的,也可能是由实验处理的效应所造成,二者往往混淆在一起,从表面上不容易分开,因此必须通过概率的计算,采用假设检验的方法,才能做出正确的推断[7]。本研究正是应用了假设检验方法,建立了一套关于试虫白纹伊蚊的质量评价体系,提出样本采集、试虫体重数据收集及处理、统计推断等具体评价步骤,而且操作简便、快速、高效,能有效评价试虫白纹伊蚊的质量,对于驱蚊类药物的配方筛选和质量评级均有重要的应用意义。

参考文献
[1] 高健荣,刘金华,刘戟环,等. 近5年广州地区白纹伊蚊研究进展及防制对策[J].中国媒介生物学及控制杂志,2015,25(5):483-485.
[2] 杨舒然,刘起勇. 白纹伊蚊的全球分布及扩散趋势[J].中国媒介生物学及控制杂志,2013,24(1):1-4.
[3] 邵明辉,王雪青,赵文越,等. 板栗花精油的化学组成及对白纹伊蚊驱避作用研究[J].中国媒介生物学及控制杂志,2015,26(1):62-65.
[4] 韩华,石华,史慧勤,等. 15%羟哌酯驱避剂对白纹伊蚊的药效研究[J].中华卫生杀虫药械,2013,19(3):209-210.
[5] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会. GB/T 13917.9-2009 农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价 第9部分:驱避剂[S].北京:中国标准出版社,2009.
[6] 国家农业部. NY/T 1964.3-2010 农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法 第3部分:白纹伊蚊[S].北京:中国农业出版社,2011.
[7] 李春喜,邵云,姜丽娜. 生物统计学[M].北京:科学出版社,2008:49-56.