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文章信息
- 黄艳辉, 罗勇, 张利萍
- HUANG Yan-hui, LUO Yong, ZHANG Li-ping
- 白纹伊蚊试虫质量评价方法研究
- Quality evaluation system of Aedes albopictus population in the laboratory
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2016, 27(1): 50-51
- Chin J Vector Biol & Control, 2016, 27(1): 50-51
- 10.11853/j.issn.1003.4692.2016.01.016
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文章历史
- 收稿日期: 2015-08-20
白纹伊蚊(Aedes albopictus)是重要的病媒生物防制对象之一[1, 2],是驱蚊实验的主要试虫[3, 4],是卫生杀虫剂室内药效实验中评价驱避剂的基本实验素材[5]。农药登记用卫生杀虫剂室内实验试虫白纹伊蚊(简称白纹伊蚊)的质量直接影响着驱蚊产品的药效检测结果,而药效检测结果是驱蚊产品配方筛选及质量定级的主要依据。我国农业部已于2010年12月发布了白纹伊蚊的室内养殖标准,并规定饲养控制指标[6],但是对具体的评价方法,包括样本采集、体重称量方法以及体重计算方法等均未作规定。本研究应用统计推断方法中的大样本平均数的假设检验——u检验方法[7],以白纹伊蚊室内养殖标准规定的雌蚊体重≥1.6 mg/♀的白纹伊蚊试虫为总体,建立了试虫白纹伊蚊质量评价体系,并结合实例,进行进一步阐述。
1 材料与方法 1.1 试虫所用白纹伊蚊引自广东省疾病预防控制中心,在本实验室标准化饲养8年。试虫养殖条件:温度(26±2)℃,湿度(75±10)%,光照14 h∶10 h (L∶D)。饲养笼规格为30 cm×30 cm×30 cm,控制每笼成蚊的密度为500~600只。成虫羽化第3~6天,在饲养笼中放入用固定夹固定的小白鼠,供雌蚊吸血6~12 h,使其产卵。
1.2 仪器、器皿与试剂德国Sartorius CPA225D 1/105电子天平〔赛多利斯科学仪器(北京)有限公司生产〕;30 mm×50 mm称量瓶、培养皿、镊子、捕蚊器、乙醚。
1.3 质量评价以笼为单位,在试虫用于测试之前,对用于驱蚊测试的白纹伊蚊进行质量评价。白纹伊蚊实验用成蚊体重控制指标为雌蚊体重≥1.6 mg/♀。
1.3.1 随机抽样随机抽取3笼成蚊,抖动蚊笼,使蚊虫飞舞,充分混匀,用捕蚊器在每笼成蚊中随机捕捉雌蚊30只。
1.3.2 体重测定每笼雌蚊分开称重,将待测雌蚊用乙醚麻醉后,将30只雌蚊随机分成6组,每组5只,以组为单位称量试虫体重(精确至0.01 mg),并记录体重值。
1.3.3 统计学分析数据处理与计算均采用Excel软件。
1.3.3.1 数据整理计算每组雌蚊的体重平均值和各样本的平均值,然后再计算样本平均数及样本标准差,见表 1。
1.3.3.2 统计推断总体方差σ2未知,但样本为大样本(n=90),可用样本方差s2代替总体方差,采用u检验,检验所取样本平均数(x)的总体平均数(μ)是否属于某一平均数(μ0,体重≥1.6 mg/♀)的指定总体。u检验公式:
质量评价的具体过程及结果:(1)由于试虫体重只有≥1.6 mg/♀时才符合要求,故用单尾检验。假设H0:μ<1.6 mg,即待测试虫达不到标准中规定的试虫体重,对于HA:μ≥1.6 mg;(2)确定显著水平α=0.05;(3)检验计算:sx==0.003;u=(2.17-1.6)/0.003=190;(4)推断:当α=0.05时,单尾检验临界值u0.05=1.64。样本的|u|>u0.05,则P<0.05,那么在0.05显著水平上否定H0,接受HA,认为待测试虫的体重符合标准试虫的体重要求,试虫合格。
3 讨 论在室内饲养白纹伊蚊时,一般会使用蚊笼来收集同一天羽化的成虫。本研究提出以每笼白纹伊蚊成虫为评价单位,分别对用于驱蚊药效测试的白纹伊蚊成虫进行质量评价。充分保证用于驱蚊药效测试的白纹伊蚊为合格试虫,进一步保证驱蚊药效测试结果的可靠性。
对于样本容量为30只的选择,首先是考虑统计推断的可靠性,因为抽样调查是用局部对整体进行估计和判断的一种方法,抽样的样本容量越大,抽样误差就越小[7],在生物统计中,样本容量30已属于大样本范畴;其次是考虑操作简易及避免资源浪费等因素,因为如果样本太大,会造成称量时间过长、蚊虫苏醒且不易控制等困难,而且取出的成虫已不能再用于药效测试,抽取太多会造成资源浪费。 在生物学实验和研究中,所得实验数据往往存在一定差异,这种差异可能是由随机误差引起的,也可能是由实验处理的效应所造成,二者往往混淆在一起,从表面上不容易分开,因此必须通过概率的计算,采用假设检验的方法,才能做出正确的推断[7]。本研究正是应用了假设检验方法,建立了一套关于试虫白纹伊蚊的质量评价体系,提出样本采集、试虫体重数据收集及处理、统计推断等具体评价步骤,而且操作简便、快速、高效,能有效评价试虫白纹伊蚊的质量,对于驱蚊类药物的配方筛选和质量评级均有重要的应用意义。
[1] | 高健荣,刘金华,刘戟环,等. 近5年广州地区白纹伊蚊研究进展及防制对策[J].中国媒介生物学及控制杂志,2015,25(5):483-485. |
[2] | 杨舒然,刘起勇. 白纹伊蚊的全球分布及扩散趋势[J].中国媒介生物学及控制杂志,2013,24(1):1-4. |
[3] | 邵明辉,王雪青,赵文越,等. 板栗花精油的化学组成及对白纹伊蚊驱避作用研究[J].中国媒介生物学及控制杂志,2015,26(1):62-65. |
[4] | 韩华,石华,史慧勤,等. 15%羟哌酯驱避剂对白纹伊蚊的药效研究[J].中华卫生杀虫药械,2013,19(3):209-210. |
[5] | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会. GB/T 13917.9-2009 农药登记用卫生杀虫剂室内药效试验及评价 第9部分:驱避剂[S].北京:中国标准出版社,2009. |
[6] | 国家农业部. NY/T 1964.3-2010 农药登记用卫生杀虫剂室内试验试虫养殖方法 第3部分:白纹伊蚊[S].北京:中国农业出版社,2011. |
[7] | 李春喜,邵云,姜丽娜. 生物统计学[M].北京:科学出版社,2008:49-56. |