蜱媒传染病是一系列以蜱为传播媒介的传染病总称，病毒、细菌、螺旋体、立克次体和原虫等均可成为其病原；蜱因其能够通过叮咬吸血有效地传播这些病原体，是人畜共患传染病的传播媒介，已成为仅次于蚊虫的第二大疾病传播媒介，严重威胁人类健康^{[1, 2, 3, 4, 5]}。浙江省丽水市在近几年的宿主动物和媒介监测中 ，提示辖区内宿主和媒介感染有巴尔通体、立克次体、查菲埃立克体、嗜吞噬细胞无形体、巴尔通体、莱姆病螺旋体等^{[6, 7]}。但以前该地区从未系统开展蜱媒传染病媒介携带病原情况调查工作，为进一步了解丽水地区蜱种群和携带病原体情况，为下一步蜱媒传染病防控提供依据，2012年开始，我们开展了家畜和野生宿主动物体表蜱的种群及携带病原体监测。现将结果报告如下。

在放养的家畜（牛、羊、犬）和野生动物（野兔、野猪、鼠）体表采集蜱类，按照《中国重要医学昆虫分类与鉴别》对其进行分类鉴定，并按同一宿主同一种成年蜱分装，放入-80 ℃冰箱保存待检。

将蜱用75%乙醇消毒及生理盐水清洗反复3次后，采用QIAamp Tissue Kit（QIAGEN，Hilden，Germany）核酸提取试剂盒，按照产品说明书逐步提取DNA。

采用巢式PCR法对上述标本进行嗜吞噬细胞无形体、查菲埃立克体、巴尔通体、立克次体、莱姆病螺旋体、巴贝西原虫进行检测。PCR反应均采用25 μl体系，由12.5 μl QIA PCR Master MIX，上、下游引物各1.0 μl，蒸馏水7.0 μl，DNA模板3.5 μl。第二轮反应采用3.0 μl第一轮反应产物作为模板。PCR反应条件和引物序列均参照文献^{[8, 9, 10, 11, 12, 13]}报道的PCR反应体系。

将数据录入到Excel软件，计算宿主动物带蜱率与带蜱指数。用SAS 7.0软件进行统计检验。

2012－2013年共检查家养和野生动物宿主740只（头），其中牛29头，羊76只，犬1只，野兔2只，野猪18头，鼠614只，宿主动物以鼠最多（占总检蜱数的82.97%），羊次之；染蜱宿主132只，检获完整的成年蜱922只（均为饱血或半饱血），宿主染蜱率为17.84%，蜱指数为1.25，其中长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）804只（占总捕获数的87.20%），为优势种群；另分别捕获金泽革蜱（Dermacentor auratus）、中华硬蜱（Ixodes sinensis）、血红扇头蜱（Rh. sanguineus）、龟形花蜱（Amblyomma testudinarium）49、61、5和3只，而金泽革蜱和龟形花蜱仅在野猪体表检获，血红扇头蜱仅在牛体表检获；野猪、牛、野兔、犬的带蜱率均为100%，带蜱指数以牛最高为15.07，野猪次之为14.00；野猪体表检获蜱种类最多，同一头野猪体表染有长角血蜱、金泽革蜱、中华硬蜱、龟形花蜱，野兔和犬体表采集的蜱种单一，均为长角血蜱。宿主与蜱染带关系详见表 1。

表 1 浙江省丽水市宿主与蜱染带关系

表选项

采集的蜱（野猪、鼠、牛、羊体表检获数量较多的长角血蜱分别随机抽取20份标本）采用PCR进行检测，共检测标本217份，立克次体、嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体不同蜱种间检出率差异有统计学意义（χ²＝36.801，P＜0.01；χ²＝52.540，P＜0.01；χ²＝80.413，P＜0.01）（表 2）。

表 2 浙江省丽水市媒介蜱病原体携带情况

表选项

对217份蜱标本进行无形体核酸片段检测，结果检出无形体96份，蜱感染无形体阳性率为44.24%。阳性标本分别来自野猪体表采集的34份金泽革蜱、26份长角血蜱、4份中华硬蜱和3份龟形花蜱标本，牛体表采集的9份长角血蜱和2份中华硬蜱，鼠体表采集的5份长角血蜱和1份中华硬蜱，野兔体表采集的7份长角血蜱，羊体表采集的5份长角血蜱。

对217份蜱标本进行查菲埃立克体核酸片段检测，结果检出查菲埃立克体77份，蜱感染查菲埃立克体阳性率为35.48%。阳性标本分别来自野猪体表采集的34份金泽革蜱、12份长角血蜱和3份龟形花蜱标本，野兔体表采集的10份长角血蜱标本，鼠、牛、羊体表采集的各6份长角血蜱。

对217份蜱标本进行立克次体核酸片段检测，结果检出立克次体30份，蜱感染立克次体阳性率为13.82%。阳性标本分别来自野猪体表采集的19份金泽革蜱、3份长角血蜱、3份中华硬蜱和2份龟形花蜱标本，牛体表采集的2份长角血蜱和1份血红扇头蜱。

本研究还对217份蜱标本进行莱姆病螺旋体核酸片段、巴尔通体核酸片段、巴贝西原虫检测，结果从野猪体表采集的20份金泽革蜱标本中检出莱姆病螺旋体，蜱感染莱姆病螺旋体阳性率为9.22%；从鼠体表采集的4份长角血蜱，野猪体表采集的1份金泽革蜱标本中检出巴尔通体，蜱感染巴尔通体阳性率为2.30%；从野猪体表采集的14份金泽革蜱和2份长角血蜱，鼠体表采集的3份长角血蜱、野兔体表采集的2份长角血蜱标本中检出巴贝西原虫，蜱感染巴贝西原虫阳性率为9.68%。

本次调查对同一份标本进行了多种病原体的检测，发现有多份蜱标本中存在复合感染情况。同一野兔体表采集的2份长角血蜱标本同时感染4种病原体，分别为嗜吞噬细胞无形体、查菲埃立克体、立克次体和巴贝西原虫；同一野猪体表采集的2份龟形花蜱标本同时感染3种病原体，分别为立克次体、嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体；同一鼠体表采集的1份长角血蜱标本同时检出嗜吞噬细胞无形体、立克次体和巴贝西原虫。

蜱是寄生在家畜及野生动物体表的吸血寄生虫，它的危害不仅限于吸血骚扰，还能从动物体内获得多种病原微生物，继而通过叮咬健康人传播疾病^{[1, 2, 3, 4, 5, 8, 9, 10, 14, 15]}。丽水市位于浙西南山区，地形以丘陵为主，森林资源丰富，野生动物种群和数量繁多，十分有利于蜱类生长繁殖，发生蜱传疾病的可能性高。本研究以放养的牛、羊、犬和野生的兔、鼠、猪为研究对象，共检获成年蜱922只，以长角血蜱为优势种，与浙江省金华市近年调查结果相似^[15]。

本研究所检测的蜱标本中，立克次体的平均检出率为13.82%，在所检测的蜱种中均有检出，以龟形花蜱检出率（66.67%）最高，金泽革蜱检出率（38.78%）次之，与以往认为的立克次体主要以中华硬蜱传播存在差异，可能与本次检测的金泽革蜱和龟形花蜱均来自野猪体表有关。

无形体的平均检出率（44.24%）较高，其中龟形花蜱、金泽革蜱、长角血蜱检出率分别为100%、69.39%和52.53%；查菲埃立克体检出率平均为35.48%，其中龟形花蜱、长角血蜱、金泽革蜱检出率分别为100%、40.40%和69.39%，这两种病原体的检出率明显高于文献报道^{[1, 5, 15]}，可能与本次研究检测的金泽革蜱（49只）、龟形花蜱（3只）数量较少且均由同一头野猪体表采集有关。当地金泽革蜱、龟形花蜱中嗜吞噬细胞无形体的感染率还有待进一步研究。

引起莱姆病的莱姆病螺旋体仅在金泽革蜱中检出，检出率为40.82%，而在长角血蜱、中华硬蜱中未检出；在丽水山区，金泽革蜱可能为当地莱姆病的主要传播媒介。巴尔通体在长角血蜱中检出率为4.04%，金泽革蜱检出率为2.04%，与以往报道的浙江省巴尔通体以中华硬蜱带病毒率高存在差异^{[16, 17]}，可能与此次调查未采集到中华硬蜱，研究所检测样本量的局限性有关。但同时也证明除中华硬蜱外，长角血蜱和金泽革蜱等其他蜱中也存在传播巴尔通体的可能。巴贝西原虫平均检出率为9.68%，其中长角血蜱检出率为7.07%，金泽革蜱检出率为28.57%，高于危芙蓉等^[14]在多省份警犬体表采集蜱开展巴贝西原虫检出率（5.30%）。需进一步明确当地巴贝西原虫的主要储存宿主和主要传播媒介。

龟形花蜱已证实是查菲埃立克体及其他多种蜱媒传染病的传播媒介之一，其在此次研究中查菲埃立克体和嗜吞噬细胞无形体的阳性率均达到100%，但由于此次检获的龟形花蜱仅有3只，数量较少，且3只蜱均来源于同一头野猪，因此它是否是丽水地区蜱媒传染病的主要传播媒介还有待于进一步研究。

另外，对本研究中不同蜱种间病原体检出率进行统计学检验发现，立克次体、嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体不同蜱种间检出率差异有统计学意义，但由于龟形花蜱仅检测3只，且均为同一头野猪体表捕获，因此统计检验结果可能会存在一定的偏倚。

本研究还发现，寄生在同一宿主的同一类蜱中存在2种及以上不同病原体的复合感染现象，采集于同一野猪体表的金泽革蜱、同一野兔和鼠体表的长角血蜱复合感染情况突出，且有同一份长角血蜱标本同时检出无形体、查菲埃立克体、立克次体和巴贝西原虫复合感染；同一份龟形花蜱标本同时检出立克次体、无形体和查菲埃立克体复合感染。

2012－2013年通过对浙江省丽水市放养和野生动物的体表蜱检测，宿主的总染蜱率为17.84%，蜱指数为1.25，并存在多种蜱类，部分蜱类同时携带多种不同的病原体，提示丽水地区发生蜱传疾病流行的风险高，应引起公共卫生部门重视。本研究所列疾病中丽水市仅在2012年报告1例巴贝西原虫病例^[17]，无其他病种报告，可能是由于丽水市蜱媒传染病监测系统尚不完善，且所研究的疾病不属于法定传染病，均未开展系统的人间疫情监测，仅靠宿主检测无法真实反映蜱媒传染病流行状况与传播走向。因此需要进一步扩大监测，建立蜱媒传染病综合监测体系，为丽水市蜱媒传染病的预防和控制提供保障。