中国媒介生物学及控制杂志  2015, Vol. 26 Issue (4): 418-419

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黄志光, 胡俊, 叶刚, 鲜军, 孟凤霞
HUANG Zhi-guang, HU Jun, YE Gang, XIAN Jun, MENG Feng-xia
里海伊蚊的抗药性研究
Investigation on Aedes caspius resistance to insecticides
中国媒介生物学及控制杂志, 2015, 26(4): 418-419
Chin J Vector Biol & Control, 2015, 26(4): 418-419
10.11853/j.issn.1003.4692.2015.04.024

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收稿日期:2015-03-01
里海伊蚊的抗药性研究
黄志光1, 胡俊1, 叶刚1, 鲜军1, 孟凤霞2    
1 克拉玛依市疾病预防控制中心, 新疆克拉玛依834000;
2 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
摘要目的 建立里海伊蚊的实验室饲养繁殖方法,了解克拉玛依地区里海伊蚊对常用杀虫剂的抗药性水平。方法 常规饲养里海伊蚊,对繁殖出的子一代采用幼蚊浸渍法,检测其对常用杀虫剂的半数致死浓度(LC50)。结果 在室温(26±1)℃和相对湿度40%~60%的条件下,里海伊蚊卵孵化期为3 d,1~4龄幼虫期为7 d,从卵产下到羽化为11 d,一个卵荚孵化出110~120条幼虫。克拉玛依市敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、双硫磷对里海伊蚊的LC50分别为0.2838、2.7752、0.0024、0.0126和0.0033 mg/L。结论 克拉玛依地区里海伊蚊常用杀虫剂的LC50本底值比已经报道过的白纹伊蚊要高。为了避免交互抗性的产生,该地区里海伊蚊的防治应采取以环境治理和生物防治为主、化学防治为辅的综合治理措施,注重统筹用药和农业合理规划,定期进行抗药性监测,做到科学合理用药。
关键词里海伊蚊     抗药性     浸渍法    
Investigation on Aedes caspius resistance to insecticides
HUANG Zhi-guang1, HU Jun1, YE Gang1, XIAN Jun1, MENG Feng-xia2     
1 Kalamay Center for Disease Control and Prevention, Kalamay 834000, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China;
2 National Institute for Communicable Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention
Abstract:Objective Establishment of Aedes caspius laboratory breeding methods, to evaluate the resistance in Ae. caspius to commonly used insecticides in Kalamay. Methods Conventional breeding Ae. caspius and determined via the dosing method and median lethal dose method to detection F1 generation. Results Under conditions of temperature of (26±1) ℃ and the relative humidity of (40-60) %, the time of egg was 3 d, the time of larva was 7 d, the time of egg to emergence was 11 d, an egg batch resulted in about 110-120 larvae (does Ae. capius lay eggs singly). The LC50 values of DDVP, propoxur, deltamethrin, β-cypermethrin, and biothion to larvae of Ae. caspius were 0.2838,2.7752,0.0024,0.0126, and 0.0033 mg/L respectively. Conclusion The LC50 values for commonly used insecticides to Ae. caspius is similar to Ae. albopictus. Breeding place should be administered first in controlling Ae. caspius and insecticides should be used properly to avoid resistance development.
Key words: Aedes caspius     Insecticide resistance     Impregnation method    

克拉玛依地区位于新疆准噶尔盆地的西侧,昆虫地理区划属中亚细亚亚界,准噶尔盆地是全国有名的石油城市。2000年,克拉玛依市开展引水工程,从400多公里外的鄂尔齐斯河开凿河流,这是中国唯一建在戈壁荒滩中的人工穿城河。水源的引进改善了当地气候条件,推进了该地区农业种植业及畜牧养殖业的发展,也给克拉玛依市的蚊虫提供良好孳生地。里海伊蚊(Aedescaspius)正是这一地区的优势种群,占该地区蚊种的72.15%[1]。克拉玛依市作为全国卫生城市,通过了全国爱卫会病媒生物控制的达标考核。为探讨多年来该地区蚊虫对各类杀虫剂是否已产生耐药性,开展了该项工作。 1 材料与方法 1.1 实验用具

成蚊产卵及羽化用的500ml小烧杯,刚好能放入蚊笼入口。成蚊饲养笼用纱布自制,不锈钢架固定,规格为60cm×60cm×60cm,吸管、平皿、烧杯、加湿器、电动吸蚊器、通用环境实验箱。 1.2 环境条件

温度(26±1)℃,相对湿度40%~60%,光照时间14h。 1.3 饲料

幼蚊饲料为新鲜猪肝通过烤箱烤干,猪肝∶发面馒头=1∶1磨碎;成蚊饲料,10%葡萄糖注射液、昆明白小鼠供血。 1.4 试剂

92.7%敌敌畏、95.56%残杀威、95.95%溴氰菊酯、92.0%高效氯氰菊酯、87.9%双硫磷,均由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提供。 1.5 实验方法 1.5.1 幼虫饲养

在方形塑料盆(或搪瓷盆)内盛脱氯水,将克拉玛依市周边水渠采集到的3~4龄幼蚊150余条放入搪瓷盆中,实验室温度26℃左右,湿度40%~60%。每日加饲料(猪肝∶发面馒头=1∶1磨碎)1~3次,尽量多次少加,如水面有膜,需要去膜。幼虫化蛹后,用吸管将蛹移入盛有脱氯水的烧杯中,置于蚊笼内待其羽化。 1.5.2 成蚊饲养

烧杯中的蛹在饲养笼内羽化后,放入10%葡萄糖注射液浸透的脱脂棉作为饲料,每天更换1次,实验室温度(26±1)℃,湿度40%~60%。成蚊在大量羽化后,将昆明小鼠腹部朝上固定在塑料架上,放入笼内喂血24~48h,雌蚊吸血后3~4d可产卵,产卵期间笼内放入1个500ml的烧杯,将杯壁用纸围好,营造一个避光的环境,内放2/3水。经常观察烧杯内水是否充足,及时补水。 1.6 抗药性测定

实验时以4龄初幼虫为测试对象,以丙酮稀释原药,每只烧杯内加入149ml过夜脱氯水。将待测药剂用丙酮稀释成5~7个系列浓度,然后吸取1ml已配制好的药液滴入水面上,用玻璃棒搅匀,然后吸取20~30只4龄幼虫放入150ml三角量杯内,加脱氯水至50ml,把幼虫连同水全部倒入烧杯内成200ml水溶液,以丙酮为对照,放入通用环境实验箱内。试虫在(26±1)℃、湿度为75%,光照16∶8的条件下,24h调查并记录各处理的死亡虫数。死亡判断标准:用解剖针轻轻触及幼蚊的呼吸管,无反应或身体抽搐不能主动逃避伤害的为死亡。实验重复3次。实验数据采用DPS统计软件分析[2]2 结果 2.1 里海伊蚊发育各历期发育天数和产卵情况

实验室饲养的里海伊蚊在室温(26±1)℃和相对湿度40%~60%的条件下,卵孵化期为3d,1~4龄幼虫期为7d,从卵产下到成蚊羽化为11d,一个卵荚孵化出110~120条幼虫。 2.2 里海伊蚊半数致死量法测定抗药性情况

克拉玛依市里海伊蚊幼虫对敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和双硫磷的抗药性检测结果,LC50分别为0.2838、2.7752、0.0024、0.0126和0.0033mg/L(表 1)。

表 1 克拉玛依市里海伊蚊幼虫对5种常用杀虫药剂的抗药性检验结果
3 讨论

我国已知里海伊蚊组蚊虫均为野栖种[3],克拉玛依地区的里海伊蚊主要分布在农业开发区、机场周边和穿城河周边,是该地区的优势种群。克拉玛依地区每年投入环境消杀的资金估计在400多万元。各种杀虫剂的使用势必对该地区的蚊虫产生影响。在进行里海伊蚊抗药性检测过程中,通过测量周边水体及环境温度,在实验室模拟与之相适应的饲养温度进行繁殖,通过昆明小鼠进行供血,采用报道的白纹伊蚊(Ae.albopictus)饲养繁殖技术,完全能够进行子一代的繁殖,但野外捕获的成蚊很少会吸取鼠血,通过采集水中幼蚊经羽化后放入饲养笼,可以大大增加成蚊的吸血能力。由于新疆沙漠地区空气比较干燥,全年的空气湿度在48%左右,成蚊对饲养环境的相对湿度与白纹伊蚊比较相对较低[4]。可能由于饲养密度和饲养供养的问题,实验室饲养的子一代蚊虫较野生环境中捕获的个体要小一些。

克拉玛依地区里海伊蚊对敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、双硫磷的LC50值分别为0.2838、2.7752、0.0024、0.0126和0.0033mg/L。目前能够检索到的文献还没有关于里海伊蚊的敏感品系或是现场品系的抗药性报道,通过与白纹伊蚊实验室敏感品系[5](敌敌畏、残杀威、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、双硫磷的LC50值分别为0.00218、0.03024、0.00061、0.00042、0.00021mg/L)横向比较,其LC50值很高,其中敌敌畏与相近属的白纹伊蚊敏感品系比较增加了100多倍。与大量使用敌敌畏等杀虫剂有关。为避免交互抗性的产生,本地区里海伊蚊的防治应以环境治理和生物防治为主,化学防治为辅进行综合治理。注重统筹用药和农业合理规划,定期进行抗药性监测,及时了解抗药性状况,对抗药性升高的杀虫剂,应停用或改用其他杀虫剂[6];采用复配杀虫剂,避免连续多年使用单一种类。

参考文献
[1] 黄志光,胡俊,丰宪磊,等. 克拉玛依地区蚊虫调查[J]. 卫生职业教育杂志,2011,29(14):115-116.
[2] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局,中国国家标准化管理委员会. GB/T 26347-2010 蚊虫抗药性检测方法[S].北京:中国标准出版社,2011.
[3] 田兆丰. 里海伊蚊组蚊虫的生物学特性调查研究[J]. 中华卫生杀虫药械,2011,17(6):467-468.
[4] 王佳璐,谭梁飞. 白纹伊蚊的饲养技巧及其卵巢的解剖方法[J].中国媒介生物学及控制杂志,2011,22(4):366-368.
[5] 孙养信,吕文,霍丽霞,等. 陕西省白纹伊蚊抗药性研究和防制策略[J]. 中国媒介生物学及控制杂志,2013,24(1):47-49.
[6] 孙养信,吕文,孙亮. 咸阳市三带喙库蚊对常用杀虫剂的抗药性研究[J]. 中华卫生杀虫药械,2011,17(1):39-41.