香格里拉县与德钦县相连，位于青藏高原向南伸延部分，横断山脉腹地，为金沙江、澜沧江、怒江三江并流核心区。澜沧江和金沙江自北向南贯穿全境，两县境内山高谷深，气候随海拔升高而变化，从香格里拉海拔1503m的金沙东河谷到海拔6740m的德钦梅里雪山，形成“一山分四季”的典型立体气候。香格里拉县东、北与四川省稻城、木里、香城3县接壤；西、南与玉龙县、维西县隔金沙江相望。德钦县西南与维西傈僳族自治县、怒江州贡山独龙族自治县接壤，西北与西藏自治区的芒康、左贡、察隅县山水相连；东南同四川省的巴塘县、得荣县接壤，两县总面积19209km2。近年来，与德钦县相邻的芒康、巴塘县以及与香格里拉县相邻的玉龙县先后被证实为鼠疫自然疫源地^{[1, 2, 3]}。为了解两县是否存在鼠疫流行信息以及鼠疫自然疫源地，我们对两县鼠疫指示动物犬类的F1抗体进行调查，现将结果报告如下。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 材料来源

2011－2014年对香格里拉3个乡镇和德钦县地域金沙江和澜沧江流域6个乡镇，海拔在2200～3600m的农户所饲养的家犬（宠物犬、土犬、藏獒）进行调查，采用真空抽血器从其股动脉抽血5ml，放置2h，离心分离血清。同时对部分居民进行鼠疫流行病学回顾性调查。血清来源分布及犬类构成见表 1。

表 1 香格里拉和德钦县血清来源分布及犬类构成

表选项

鼠疫F1抗体检测间接血凝试验（IHA）试剂盒由吉林博德医学免疫制品有限公司生产，批号：20100101，20111215，20130101，20140101；双抗原夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒由兰州生物制品研究所有限公司提供，批号：20111202，20120102，20140401；胶体金免疫层析试纸条（GICA）由云南省地方病防治所自制，批号：20110401，201201，201301，201401。 1.2 检测方法

采用IHA微量法、双抗原夹心ELISA和GICA3种方法对血清进行检测。间接血凝初筛阳性血清进行血凝抑制试验，当抑制列抑制2孔以上、对照列阴性、凝集效价≥1∶16＋＋时判定为阳性；ELISA初筛阳性血清再做确证试验，当抑制列抑制2孔以上，被检测孔A值≥阴性对照孔的2.1倍时，最高稀度作为血清的效价终点；GICA检测时，取10 min内质控线和检测线均出现紫红色带判定为阳性。 2 结果 2.1 鼠疫F1抗体检测

采用IHA、ELISA、GICA 3种方法共检测不同犬类血清1124份。香格里拉县73份犬血清IHA检测为阴性，德钦县1051份犬血清中检测到IHA 阳性3 份（血凝滴度为佛山土犬1∶80＋＋，云岭哈巴狗1∶80＋＋，霞若土犬1∶20＋＋），ELISA阳性32份，GICA阳性14份，阳性率分别为0.29%、3.04%和1.33%，德钦县196 份藏獒血清ELISA 阳性7 份，GICA 阳性2 份，637 份土犬血清IHA阳性2份，ELISA阳性19份，GICA阳性8份；218 份哈巴狗血清IHA阳性1份，ELISA阳性6份，GICA阳性4份（表 2）。

表 2 3种不同方法检测德钦县不同犬类血清鼠疫F1抗体阳性情况

表选项

2011－2014年， 入户对居民进行鼠疫流行病学回顾性访问，在7个乡镇中未曾访问到近几年有大量自然死鼠现象，也未访问到因淋巴结肿大或剥食旱獭而入院的患者。 3 讨论

犬类是一种活动范围广，喜好嗅吻的动物，在家野两型鼠疫流行时均容易被感染，同时对鼠疫菌又是具有高抗性低敏感性，感染鼠疫后所产生的F1抗体能较长时间保持在体内^[4]，在鼠疫疫源地调查中为指示性动物。通过对犬类F1抗体的调查，对是否存在鼠疫自然疫源地，确定疫源地范围具有重要意义。

犬类是鼠疫流行期间的短期宿主，1963年在青藏高原喜马拉雅旱獭（Marmota himalayana）鼠疫自然疫源地从犬体内检出第1 株鼠疫菌，其后又多次从犬体内分离到鼠疫菌^[4]。1990年戴翔等^[5]在新疆维吾尔自治区首次从自毙犬中分离出鼠疫菌，说明犬类能短期带菌，而体表主要寄生人蚤（Pulexirritans），人蚤有传播鼠疫的能力^[6]，因此犬类具有双重（短期宿主、指示动物）流行病学意义。在鼠疫监测中啮齿动物F1抗体检测阳性率偏低，2000－2009年云南省鼠疫血清学监测，鼠类血清F1抗体阳性率为0.11%^[7]，盈江县1990年鼠疫流行期调查，鼠类血清F1抗体阳性为0，犬类血清F1抗体阳性则达44.44%^[8]，梁江明等^[9]2000年对广西隆林、西林两县鼠疫血清学调查，鼠类血清F1抗体阳性0.69%，而指示动物（犬、猫）为6.42%，因此在鼠疫监测中应重视对犬类的监测，尤其在鼠疫静息期和鼠疫疫源地调查中更为重要。

通过对两县1124只家犬的调查，藏獒249只，占22.15%；土犬655只，占58.27%；哈巴狗220只，占19.57%。由于藏獒具有生活在海拔较高地区的特点，主要用于看家和放牧，因此，它更有可能接触到高海拔地区的喜马拉雅旱獭，但此次调查中并未从它身上检获到鼠疫F1抗体。在另外两种犬类的检测中发现3份鼠疫F1抗体阳性血清，其中两份位于澜沧江谷底的佛山、云岭，另一份位于金沙江谷底霞若乡，滴度均不超过1∶80，3个阳性点距离在10km以上，在回访调查中未发现3只动物有相关性。

对两县1124份犬血清IHA检测F1抗体阳性率为0.27%，以F1抗体阳性乡镇佛山、云岭、霞若进行统计阳性率也仅分别为0.37%、0.37%和0.61%。据广西梁江明和杨进业^[10]统计，在对鼠疫自然疫源地和现疫流行县指示动物犬类鼠疫F1抗体调查中，阳性率一般均在5%～70%。1982－2000年，张安宁等^[11]用IHA检测来自甘肃省鼠疫历史疫源地的犬血清，阳性率达13.71%。2000年，梁江明等^[12]用IHA检测犬血清，阳性率为5.20%，宋志忠等^[3]对云南省丽江市调查，犬血清阳性率为23.50%，而本次香格里拉和德钦县犬类鼠疫F1抗体调查阳性率偏低。

1965年，云南省流行病研究所（现云南省地方病防治所）对两县进行过系统的鼠疫疫源性调查，未获取任何有价值的鼠疫流行线索，此次调查也对部分村民进行鼠疫流行病学回顾性调查，尚未获取有价值的鼠疫流行线索。

综合分析，虽然调查中发现3份鼠疫F1抗体阳性血清，但尚未获得当地存在鼠疫自然疫源地或曾经发生过鼠疫流行的其他线索。因此，应根据所获得的线索，制定相应的监测方案，进一步加强对该地区鼠疫疫源性的调查和持续监测的力度。