景洪市隶属于西双版纳傣族自治州，位于云南省南部，1993年证实为黄胸鼠（Rattus tanezumi）鼠疫自然疫源地，主要宿主动物为黄胸鼠，主要传播媒介为印鼠客蚤（Xenopsylla cheopis）^[1]。1993－2007年景洪市有7个年份发生了鼠疫流行，其中1993年发生2例人间鼠疫病例^[2]，是云南省鼠疫流行强度较大的地区之一。云南省黄胸鼠鼠疫疫源地自2007年后进入流行间歇期，2008－2015年，全省黄胸鼠鼠疫疫源地未再监测到鼠疫流行。2016年，景洪市普文镇发生鼠间鼠疫流行并波及人间^[3]，提示该地区鼠疫疫源地可能再次活跃。普文镇是景洪市2016年的新发鼠疫疫点，为及时掌握普文镇和周边区域的鼠疫流行态势，为鼠疫的监测和防治提供依据，本研究于2022年9月，在景洪市普文镇和大渡岗乡开展了疫源地调查，现将结果分析如下。

根据景洪市2016年鼠疫疫点的位置，选择疫点所在的普文镇和比邻的大渡岗乡作为调查样区，每个乡镇选择3个村寨作为调查点。见图 1。

标准地图审图号：GS（2020）820号 图 1 云南省景洪市黄胸鼠鼠疫疫源地2016年新发鼠疫样点调查采样点分布图 Figure 1 Distribution of sampling sites in new plague foci with a new outbreak in 2016 in the plague foci of Rattus tanezumi in Jinghong, Yunnan Province

图选项

根据鼠疫监测方案，每个乡镇选择2个居民区和3个野外样点开展宿主动物调查取样。居民区每个调查点布放300笼次。野外每个调查点布放鼠夹不少于250个，以自制油条为诱饵，采用5 m夹线法布放鼠夹，晚放晨收，同时捡拾自毙鼠类，将获得的小型兽类（小兽）以布袋单只分装，带回实验室进行分类鉴定，物种名称按照《中国兽类名录（2021版）》进行标注^[4]。

带回实验室的小兽置于大号整理箱内用乙醚进行体表寄生蚤麻醉后，分别置于白塑料方盘内检蚤，捡获的蚤分装至采样管中编号保存，分类鉴定后进行鼠疫细菌学检验。

鼠疫F1抗体检测间接血凝（indirect hemagglutination assay，IHA）试剂盒、鼠疫F1抗原检测反向间接血凝（reverse IHA，RIHA）试剂盒由兰州生物制品研究所有限责任公司生产，鼠疫耶尔森菌（Yersinia pestis，鼠疫菌）选择敏感培养基由北京陆桥技术有限责任公司生产，鼠疫菌双色核酸检测试剂盒由上海辉睿生物科技有限公司生产，DNA提取试剂盒由天根生化科技（北京）有限公司生产。使用设备为恒温水浴箱、美国Agilent实时荧光定量PCR仪（Stratagene Mx3000P）。

取得犬和猫主人同意后，使用自制工具将动物固定，采用真空采血管采集股动脉血3~5 ml，分离血清备检。

采到的血液离心分离血清后，56 ℃水浴灭活30 min，采用IHA微量法检测鼠疫F1抗体；无菌解剖采集自毙鼠的肝、脾、肺组织，加样本保存液1 ml研磨，制成1∶10混悬液，1 200×g离心5 min，取上清液采用RIHA检测鼠疫F1抗原，方法按试剂盒说明书进行。

无菌操作解剖小兽，取肝、脾切面压印接种于鼠疫菌选择敏感培养基上，划线置28 ℃恒温培养箱培养，连续观察3 d；小兽体表寄生蚤按同地点同寄主同蚤种分组拉胃接种在选择敏感培养基上，划线置28 ℃恒温培养箱培养，连续观察5 d。培养物若发现可疑菌落，将可疑菌落重新接种于2个选择敏感培养基上做纯培养和噬菌体裂解试验加以验证。

无菌操作解剖小兽，取肝、脾标本，使用天根DNA提取试剂盒，按试剂盒说明书提取DNA，使用荧光定量PCR检测鼠疫菌caf1和YPO0392基因，操作按照试剂盒说明书进行。

本次调查共捕获和捡拾小兽动物2目3科4属7种61只，其中捕获小兽59只，捡拾自毙鼠2只。居民区捕获小兽22只，均为黄胸鼠，捕获率为1.83%；野外捕获小兽37只，捕获率为3.01%，优势种为黄胸鼠（67.57%）和北社鼠（Niviventer confucianus，10.81%），捡拾自毙鼠2只，经鉴定为黄胸鼠，2种生境黄胸鼠合计占比79.66%，见表 1。捕获的7种小兽只有黄胸鼠染蚤，在16只黄胸鼠体表捡获蚤35匹，均为印鼠客蚤，平均染蚤率为21.12%（16/59），总蚤指数为0.59（35/59）。

表 1 云南省景洪市黄胸鼠鼠疫自然疫源地2016年新发鼠疫疫点和周边地区不同生境内捕获小型兽类的物种组成及数量分布 Table 1 Species composition and quantitative distribution of small mammals captured in different habitats in new plague foci with a new outbreak in 2016 and vicinal regions in the plague foci of Rattus tanezumi in Jinghong, Yunnan Province

表选项

6个采样点共捕获主要宿主黄胸鼠47只，黄胸鼠在调查区域的居民区和野外均为优势种。居民区黄胸鼠捕获率为0.33%~3.00%，野外黄胸鼠捕获率为0.44%~5.16%，普文镇城子村采样点居民区和野外的黄胸鼠捕获率分别为3.00%和5.16%，在6个采样点中均属最高。共梳检印鼠客蚤35匹，居民区的蚤指数为1.00~2.00，野外的蚤指数为0.00~0.38。见表 2。

表 2 云南省景洪市黄胸鼠鼠疫自然疫源地2016年新发鼠疫疫点和周边地区鼠疫主要宿主及媒介蚤的分布和密度 Table 2 Distribution and density of main plague hosts and vector fleas in new plague foci and vicinal regions in the plague foci of Rattus tanezumi in Jinghong, Yunnan Province, 2016

表选项

本次调查共采集指示动物（犬或猫）血清91份，黄胸鼠血清26份，采用IHA法进行鼠疫F1抗体检测。指示动物血清检验结果均为阴性，2份黄胸鼠血清鼠疫F1抗体阳性，总血清阳性率1.71%，宿主动物血清阳性率为7.69%。2份黄胸鼠血清标本均采集自普文镇2016年疫点所在的居民区，抗体滴度分别为1∶640和1∶160。

捡拾到的2只自毙鼠和2只鼠疫F1抗体阳性鼠，用RIHA法检测鼠疫F1抗原，结果为阴性。

捡拾到的2只自毙鼠和2只鼠疫F1抗体阳性鼠，用荧光定量PCR法检测鼠疫菌caf1和YPO0392基因，结果为阴性。

对捕获的59只小兽及捡拾到的2只自毙鼠肝、脾标本和35匹蚤进行鼠疫菌分离培养，均未培养到鼠疫菌。

本次调查共捕获小兽7种59只，检获蚤1种35匹，种类和数量均较少，可能与调查的区域较小有关。另外，生境的复杂程度决定物种的多样性，植被对鼠类分布和密度起重要作用^[5-6]。本次野外调查点主要在茶叶、水果和咖啡等种植区域，这些区域生境较为单一，不利于鼠类生存。在6个调查点中，普文镇城子村居民区和野外的小兽捕获率均最高，普文镇城子村居民区调查点周边有农贸市场、餐馆等场所，鼠类食物来源丰富，现场调查也发现居民区环境卫生条件差，野外调查点距离居民区较近，并且种植有玉米、蔬菜等作物，丰富的食物来源和复杂的生境可能是普文镇调查点小兽捕获率较高的原因。鼠疫是一种自然疫源性疾病，鼠疫的发生与流行受自然和社会等诸多因素的影响，但高的宿主动物和媒介种群密度是鼠疫发生和流行的重要条件^[7-10]。因此，建议普文镇大力开展爱国卫生运动和人居环境整治，消除鼠、蚤孳生环境，有效降低鼠、蚤密度，从而降低鼠源疾病流行的风险。

调查结果显示，黄胸鼠和印鼠客蚤是调查区域的优势宿主动物和优势媒介蚤，与以往的监测结果相似^[11]，因此仍然存在鼠间鼠疫发生的风险。除普文镇城子村外，其他调查区域鼠的捕获率和蚤指数总体不高，指示动物也未发现感染鼠疫的线索，因此，发生大范围鼠疫流行的可能性较低。应持续加强监测，密切关注鼠疫主要宿主动物和媒介蚤的动态变化，当宿主动物密度和蚤指数增高时，及时预警并采取预防性灭鼠灭蚤措施。

本次调查从主要宿主动物黄胸鼠中检出2份鼠疫F1抗体阳性血清，抗体滴度分别达到了1∶640和1∶160。以往的研究表明，黄胸鼠感染鼠疫菌后，有75.3%的个体在感染后的第5~240天，血清抗体滴度≥1∶160，而后抗体滴度下降^[12]，从抗体滴度来看，这2只血清抗体阳性鼠可能是在本次调查前一段时期发生的感染，捕获地点位于2016年疫点区域，说明普文镇鼠疫疫点持续存在鼠间鼠疫的流行。本次调查在居民区捕获到了鼠疫F1抗体阳性鼠，提示当地人群发生感染的风险较高。因此，应进一步加强这一区域的鼠疫监测和健康教育工作，严防人间鼠疫的再次发生。

利益冲突  无