近年来，病媒生物传染病流行形势日趋严峻，根据世界卫生组织统计，全球大约有17%的传染病是由病媒生物传播造成的，每年有超过70万人死于病媒生物传染病，并且全球80%以上的人口存在被1~2种病媒传染疾病的风险^[1-2]。在我国由病媒生物传播的疾病占法定报告传染病的近1/3^[3]。作为病媒生物的鼠类，能够携带细菌、病毒、真菌、寄生虫等近200余种病原体，其中能使人致病的就有60种^[4-6]。鼠与人类及家畜互动频繁，并可以体外寄生的节肢动物如蜱、螨和跳蚤等为媒介进行病原体传播，给人类健康构成了严重威胁。

海南省三亚市地处热带地区，适宜许多病媒生物生长繁殖，近年来海南省随着国际航线的不断开通，国外传染病的输入，特别是鼠类等病媒生物的传入，使海南省面临病媒、传染病输入的“双重风险”。海南省曾经对不明原因发热的病人进行调查，发现鼠传钩端螺旋体占了22.35%^[7]。本研究对三亚市4种鼠传疾病进行本底调查，现将调查情况汇报如下。

2020年11月、2021年1、3、5、7月，采用笼夜法，用油条作诱饵，分别在天涯区和吉阳区的居民区、酒店、农村、野外等捕鼠。野外沿直线每5 m布放1个，行间距不少于50 m；室内每15 m²放笼1个，晚放晨收，捕捉到的鼠类送回实验室，根据《常见病媒生物分类鉴定手册》^[8]鉴定鼠种，再进行无菌解剖并进行登记。采集鼠肝、肾、脾、肺等组织标本，分别置于无菌管内，-80 ℃冻存待检。

全自动核酸提取仪(江苏硕世生物科技股份有限公司)、LightCycler480型荧光定量PCR仪(南京微是生物科技公司)、高速冷冻离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司)研磨仪QIAGEN TissueLyserⅡ(凯杰企业管理上海有限公司)。

无菌条件下将鼠肝、肾、肺、脾等脏器组织分别剪取50 mg于研磨管中，每个研磨管中加入500 μl裂解液和3颗3 mm的小研磨球，放入充分预冷的适配器中，将研磨仪设定为60 Hz，低温研磨匀浆90 s，制成匀浆液。

把以上匀浆样品分成2份，分别用于提取DNA和RNA(所有的操作均在冰上进行)。DNA抽提用动物基因组DNA快速抽提试剂盒[生工生物工程(上海)股份有限公司，批号：B511324]；RNA提取用Trizol总RNA抽提试剂盒[生工生物工程(上海)股份有限公司，批号：B511321]。按照各自试剂盒的说明进行提取，提取得到的DNA、RNA溶液置-20 ℃冻存待检。

采用单重荧光定量PCR对标本进行致病性钩端螺旋体(Leptospira，钩体)和恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi)2种鼠传致病菌检测，试剂盒均采用TaqMan Fast qPCR Master Mix(批号：B639274，美国BBI公司)；采用单重荧光定量PCR检测大别班达病毒，多重荧光定量PCR检测汉坦病毒(HTNV型、SEOV型)，试剂盒均采用One Step RT-qPCR Probe Kit(批号：B639278，美国BBI公司)。检测所用引物见表 1。

表 1 检测病原体所用的引物和探针序列 Table 1 Primers and probe sequences used to detect pathogens

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采用Excel 2021和SPSS 26.0软件进行数据录入和统计分析，用χ²检验和Fisher精确概率法进行率的比较，P < 0.05为差异有统计学意义。

天涯和吉阳区共布放有效鼠笼10 760只，共捕获1目1科4种229只鼠，鼠密度为2.13%；其中天涯区鼠密度为1.71%(71/4 160)、吉阳区鼠密度为2.39%(158/6 600)，不同区域鼠密度差异有统计学意义(χ²=5.785，P=0.016)。4种优势鼠种从高至低依次为褐家鼠(Rattus norvegicus)、小家鼠(Mus musculus)、黄胸鼠(R. tanzumi)和黄毛鼠(R. losea)，分别占51.09%(117/229)、31.88%(73/229)、16.59%(38/229)和0.44%(1/229)，不同区域鼠种构成比差异无统计学意义(P=0.103)。见表 2。

表 2 海南省三亚市鼠密度和优势鼠种调查 Table 2 Investigation of rodent density and dominant rodent species in Sanya, Hainan Province

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2020年11月至2021年1、3、5、7月共监测5个月，其中1、5和7月鼠密度高，分别达2.82%(62/2 200)、2.65%(58/2 189)和2.14%(50/2 341)，11月鼠密度最低，为1.29%(27/2 100)；从鼠种构成比看，1、3、7和11月以褐家鼠为主，分别占51.61(32/62)、46.88%(15/32)、54.00%(27/50)和66.67%(18/27)，其次是小家鼠，但11月构成比占第2位的小家鼠出现明显下降，仅占7.40%(2/27)；5月以小家鼠为主，占44.83%(26/58)，黄毛鼠仅5月在吉阳区捕获1只，占1.72%(1/58)。见表 3。

表 3 海南省三亚市不同月份鼠密度和种类构成 Table 3 Rodent density and species composition in different months in Sanya, Hainan Province

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从11只鼠(8只褐家鼠，4只黄胸鼠)中检出致病性钩体，汉坦病毒、大别班达病毒和恙虫病东方体均未检出，鼠病原体总阳性率4.80%。在所有鼠组织标本中，16份(6份鼠肺、3份鼠肝、5份鼠肾、2份鼠脾)标本检出致病性钩体，阳性率为6.70%(16/240)，其中4只鼠多个脏器均检出钩体。

从不同区域看，天涯区的检出率比吉阳区高，分别为5.63%(4/71)和4.43%(7/158)；不同鼠种中黄胸鼠感染率最高，为7.89%(3/38)，其次是褐家鼠占6.84%(8/117)，而小家鼠与黄毛鼠检出率均为0，见表 4；11月鼠病原体检出率最高，占25.93%(7/27)，其次是5、7和1月，分别为3.45%(2/58)、2.00%(1/50)、1.61%(1/62)，3月检出率为0，不同月份鼠病原体检出率差异有统计学意义(P < 0.001)。

表 4 海南省三亚市携带致病性钩端螺旋体鼠种分布情况 Table 4 Distribution of rodent species carrying pathogenic Leptospira in Sanya, Hainan Province

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海南省三亚市因其独特的地理位置和生态环境成为热带传染病的高发区域^[9-10]。从监测数据来看，三亚市主城区的鼠种类相对较少，鼠密度为2.13%，主要以褐家鼠为主。相较于20世纪90年代潘祖安等^[11]的研究结果，以及2006－2015年全国鼠类监测数据^[12]，无论是在鼠种多样性还是密度上，均显示出下降趋势。这是因为三亚市近年来一直开展巩固国家卫生城市建设，“除四害”、普及宣传病媒生物危害、灭鼠及采取一系列的环境卫生整治等有力措施，控制鼠类密度收到明显的成效。黄毛鼠是农作物区的主要鼠类之一，但本次监测仅捕获到1只黄毛鼠，可能与该地区农田被征用开发房地产，导致农作物减少致使黄毛鼠生境被破坏所致。此外，选择的监测生境较为单一也会导致结果出现偏差。从鼠区域分布密度看吉阳区比天涯区高，可能由于吉阳区刚从乡镇发展为城中区，周边还有许多乡村、卫生条件相对差，因此需要加强对乡村周围环境整治，防鼠灭鼠，在各村加强宣传提升全民防控意识。从不同季节的鼠密度分布看差异不大，优势鼠种间构成比总体变化也不大，但11月优势种的小家鼠数量构成比(7.40%)呈明显下降趋势，可能是受到三亚天气变化和小家鼠栖息习性的影响。

调查显示，2020年11月至2021年7月三亚市主城区鼠传病原体钩体阳性率为4.80%，与全国重要病媒生物监测网监测的2021年全国各省份鼠类钩体总感染率5.75%相比^[13]，三亚市的感染率略低，但仍需警惕。特别是钩体病曾在海南大流行，潘祖安等^[13]对海南省健康人群进行的钩体血清抗体检测中，检出阳性率高达51.80%。这些历史数据表明，无论是健康人群还是动物，均可能携带有钩体。在本次监测中，黄胸鼠和褐家鼠的感染率较高，尤其是在11月，鼠感染率最高，这可能与三亚市下半年正值雨季和台风高发期有关，容易引发洪涝灾害，促使钩体感染扩散。在钩体的检测中，虽然在鼠的不同脏器中均有发现，但肾脏的检出率最高，达到了18.52%，这与致病性钩体的一些生物特性相符合。某些病原体对不同组织器官或宿主具有亲嗜性与选择性^[14]，例如汉坦病毒对肾脏、肺组织器官具有亲嗜性，而戊型肝炎病毒则主要侵入肝脏组织等，应针对性地选择易受感染的组织作为检测目标，从而提升病原体的检出率。

通过本次调查，发现三亚市存在致病性钩体传播的风险，需要对感染率高的褐家鼠和黄胸鼠加强监测与控制。同时，拓宽宣传渠道，加大宣传力度，提高公众对鼠类及鼠传疾病防治的认识和参与意识，降低致病性钩体的传播风险。在监测过程中，也发现了一些不足之处，如检出率问题、鼠种鉴定的准确性以及生境选择的单一性。针对这些问题，建议建立详细的鼠种鉴定标准和指南，引入分子生物学方法提高鉴定准确性，并改进监测流程和技术方法，以提高检出率并减少资源浪费。此外，应扩大监测范围，覆盖农村居民区、果园、森林、荒地等不同生境，以获得更全面的监测数据。

利益冲突  无