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文章信息
- 刘仰青, 付仁龙, 杨树, 李辉
- LIU Yang-qing, FU Ren-long, YANG Shu, LI Hui
- 江西省南昌市2020和2023年白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性监测
- Insecticide resistance of Aedes albopictus in Nanchang, Jiangxi Province, 2020 and 2023
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2024, 35(4): 451-456
- Chin J Vector Biol & Control, 2024, 35(4): 451-456
- 10.11853/j.issn.1003.8280.2024.04.012
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文章历史
- 收稿日期: 2024-03-04
白纹伊蚊(Aedes albopictus)是登革热传播的主要媒介之一,也是目前南昌市登革热唯一的传播媒介。近年来登革热广泛流行于热带和亚热带地区,是全球最受关注的虫媒传染病之一[1]。2019年我国28个省(自治区、直辖市)报告病例2.2万余例,仅次于2014年我国登革热大暴发[2],其中江西省共报告登革热病例1 279例,报告的病例数排名全国第6位,其中本地病例波及6个市21个县(区)[3]。南昌市2019年首次暴发登革热本地感染疫情,共报告登革热病例113例,是2010-2018年累计报告病例数的7.53倍[4],2020-2023年每年均有1~5例输入性病例报告,防控形势较严峻。
由于目前尚无有效疫苗,各地在发生登革热疫情后,使用化学杀虫剂迅速降低伊蚊密度仍是目前有效防控登革热疫情的重要手段之一。2016和2018年南昌市白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性监测结果显示,白纹伊蚊对多种杀虫剂产生了中度至高度抗性[4-5]。为及时了解2019年南昌市登革热疫情暴发应急控制后白纹伊蚊对常用卫生杀虫剂的抗药性现状及发展趋势,本研究于2020和2023年在全市开展了白纹伊蚊对常用杀虫剂的抗药性监测,旨在为合理选择杀虫剂,有效防制白纹伊蚊提供科学依据。
1 材料与方法 1.1 试虫来源抗药性监测白纹伊蚊幼蚊采自南昌市东湖、西湖、青山湖、青云谱、新建、红谷滩、高新、经开、湾里管理局、南昌、安义和进贤12个县(区),各县(区)按照属地东、南、西、北、中的采样原则分别选择居民区(城中村)、公园、医院、工地和汽修厂等特殊场所生境进行白纹伊蚊幼蚊采集,每个生境在废旧轮胎、闲置容器、贮水池/缸、盆景、托盘积水等孳生容器采集白纹伊蚊幼蚊共不少于200只。2020年和2023年全市统一在每年的6月完成野外幼蚊采集,采集完后将所有县(区)采集的幼蚊按每县(区)等数量混合后实验室随机分盆饲养。饲养1~2代,取3龄末4龄初幼虫和羽化后3~5 d的未吸血雌性成蚊分别进行抗药性测定(2023年未开展幼蚊抗药性监测)。白纹伊蚊成蚊种类鉴定参考《中国重要医学昆虫分类与鉴别》进行[6]。
按照江西省疾病预防控制中心(疾控中心)下发的《关于开展江西省登革热重点县区媒介伊蚊专项调查的通知》要求,2020年选择了2019年出现登革热本地病例最多的南昌县和未出现本地病例的西湖区单独作为抗药性调查点开展监测。
1.2 供试杀虫药剂 1.2.1 成蚊药膜0.03%溴氰菊酯、0.4%氯菊酯、0.07%高效氟氯氰菊酯、0.4%高效氯氰菊酯、0.08%高效氯氰菊酯、0.5%马拉硫磷、2%毒死蜱、0.2%杀螟硫磷、0.2%
97.80%吡丙醚、98.32%残杀威和90.10%双硫磷。
以上药膜和杀虫剂原药均由中国疾控中心传染病预防控制所媒介室提供,所有药膜和原药-20 ℃低温保存备用。
1.3 抗药性测定方法 1.3.1 幼蚊测定方法采用浸渍法[5]。蚊虫在温度(25±1) ℃,相对湿度(70±5)%条件下饲养;实验选用3龄末4龄初的健康F2代幼虫试虫。将药液用丙酮按等比或等差稀释成5~7个浓度梯度,在250 ml烧杯中加入200 ml隔夜脱氯水,用移液枪从各烧杯中吸出0.1 ml水,加入25只白纹伊蚊幼蚊,再分别向每烧杯中加入0.1 ml药液,对照组加入0.1 ml丙酮。处理后24 h观察并记录幼蚊死亡情况,实验重复3次。蚊虫死亡判定标准:用镊子尖头轻轻触碰幼虫,无逃避反应或反应麻痹视为死亡。
1.3.2 成蚊测定方法采用接触筒法[5]。用电动吸蚊器从饲养笼中吸取蚊虫,用CO2麻醉后在冷冻台上挑起雌蚊放入恢复筒内,每组25只,待蚊虫完全苏醒活动后,把恢复筒安装在放隔板的一面,然后关闭隔板,在隔板另一端装上有药膜的接触筒,把隔板抽开,将恢复筒内蚊虫全部轻轻吹入装有药膜的接触筒,迅速关上隔板,将筒放平,开始计算接触时间,接触60 min后抽开隔板将蚊虫吹回恢复筒,取下恢复筒直放,尼龙网朝上并放置浸有5%葡萄糖水的棉花团,每试验重复3次以上,每次实验设置对照组,放入(25±2)℃的培养箱,24 h后观察、记录试虫死亡数并计算死亡率。试虫完全不动,或仅躯体、翅、足或触角等震颤视为已死亡。
1.4 抗性水平判定标准[5] 1.4.1 幼蚊抗性倍数 < 3为敏感,3≤抗性倍数 < 10为低抗,10≤抗性倍数 < 40为中抗,抗性倍数≥40为高抗。
1.4.2 成蚊98%≤死亡率≤100%为敏感种群(S),80%≤死亡率 < 98%为可能抗性种群(M),死亡率 < 80%为抗性种群(R)。
1.5 杀虫剂使用情况调查以现场查看和表格设计调查的方法,收集整理南昌市各县(区)城区各级爱国卫生工作负责部门、疾病预防控制机构及负责城区公共外环境病媒生物防制的有害生物防制公司2019年灭蚊蝇卫生杀虫剂的使用情况。调查表格主要记录卫生杀虫剂采购单位、商品名、农药登记证号、有效成分及含量、剂型、生产厂家、用途、采购量及使用量等,并统一记录单位。
1.6统计学处理采用SPSS 22.0软件对幼蚊生物测定数据进行分析,计算半数致死浓度(LC50)及95%置信区间,获得回归方程,计算成蚊死亡率及幼蚊抗性倍数。运用Excel 2007对杀虫剂使用量进行整理、汇总和制图。
2020和2023年抗性监测结果显示,南昌市白纹伊蚊野外种群对杀螟硫磷、毒死蜱、马拉硫磷、残杀威和
2020年南昌市白纹伊蚊幼蚊对残杀威和双硫磷LC50分别为2.357和0.040 4 mg/L,对应的抗性倍数分别为8.89和30.61,抗性水平分别为低抗和中抗。不同县(区)抗药性监测结果显示南昌县和西湖区白纹伊蚊幼蚊对残杀威分别表现为中抗和低抗,抗性倍数分别为12.71和7.30;对双硫磷分别表现为高抗和中抗,抗性倍数分别为40.15和24.55。见表 2。
2.3 南昌市外环境卫生杀虫剂使用调查结果2019年对南昌市12个县(区)级爱国卫生工作负责部门、疾病预防控制机构和负责城区公共外环境病媒生物防制的7家有害生物防制公司灭蚊蝇杀虫剂采购、使用情况进行了全面的调查和收集汇总。2019年全市共使用灭蚊蝇卫生杀虫剂7 275 kg,包括颗粒剂、热雾剂、乳油、水乳剂、悬浮剂、微乳剂和烟剂等7个剂型。其中灭蚊幼剂1 684 kg,灭成蚊、蝇杀虫剂5 591 kg,涉及的卫生杀虫剂有效成分主要有氨基甲酸酯类的残杀威、茚虫威;拟除虫菊酯类的高效氯氟氰菊酯、顺式氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、烯丙菊酯、反式氯丙炔菊酯、右旋苯醚氰菊酯和四氟醚菊酯等;有机磷类的辛硫磷、倍硫磷、双硫磷和甲基嘧啶磷;昆虫生长调节剂吡丙醚和生物源杀虫剂苏云金芽孢杆菌等。见表 3。
南昌市城区外环境灭蚊、蝇成、幼虫剂使用量的构成比见图 1。灭蚊、蝇幼虫使用量最大的为1%双硫磷杀虫颗粒剂,占比达到59.38%;其次为5%倍硫磷颗粒剂(37.65%)、苏云金芽孢杆菌(1.78%)和幼剋杀虫颗粒剂(有效成分0.5%吡丙醚和4.5%倍硫磷)(1.19%)。灭蚊、蝇成虫使用量最大的为菊酯+菊酯类复配卫生杀虫剂,占总杀虫剂用量的40.24%,其次为菊酯类+残杀威复配杀虫剂(28.19%)、单一菊酯类杀虫剂(20.75%)、菊酯类+有机磷复配杀虫剂(10.64%)和茚虫威烟剂(0.18%)。
3 讨论监测结果显示2019年登革热本地感染暴发后南昌市白纹伊蚊成蚊整体对有机磷类和氨基甲酸酯类杀虫剂敏感,对拟除虫菊酯类杀虫剂普遍已产生不同程度的抗药性,这与全国多数省市研究结果相似[9-11]。拟除虫菊酯类杀虫剂因具有杀虫高效、广谱、低毒和对环境友好等特点,近年来被广泛、大量应用于蚊蝇等病媒生物的防制。2020和2023年南昌市白纹伊蚊对高效氯氰菊酯等拟除虫菊酯类杀虫剂产生了抗药性,与2016年和2018年监测结果基本一致[4-5];溴氰菊酯和高效氟氯氰菊酯呈现可能抗性到抗性的趋势,这与杭州市研究结果相似[12],但2019年的用药情况调查显示并未使用含有效成分为溴氰菊酯的杀虫剂,对其产生抗性的原因一方面与大量使用了其他拟除虫菊酯类杀虫剂而对其产生了交互抗性有关;另一方面由于本次仅对2019年南昌市杀虫剂的使用情况进行了调查,其他年份是否大量使用了含溴氰菊酯类杀虫剂还有待于做全面和深入调查证实。
本次监测是南昌市首次开展双硫磷对白纹伊蚊幼蚊的抗药性测定,结果显示南昌市白纹伊蚊幼蚊对双硫磷产生中至高度抗性,这与国内部分省市研究结果相似[13],产生抗性的原因一方面源于双硫磷具有较好的灭幼蚊效果且近年来南昌市用量较大,仅2019年调查结果显示双硫磷的使用量占总使用量的59.38%;另一方面由于前期未对本地区蚊虫双硫磷的抗药性开展测定,未及时掌握其抗性现状曾大量使用有关。由于2023年未开展幼蚊的抗性测定,2020和2023年幼蚊抗性发展趋势无法比较,需后续测定后进一步比较;但残杀威抗性倍数已由2016年的3.42倍上升至2020年的8.89倍,这可能与近年来南昌市外环境使用了有效成分含残杀威的化学杀虫剂有关,2019年含残杀威有效成分的杀虫剂用量占总用量的28.19%。但本次监测结果显示成蚊对残杀威表现为敏感,幼蚊则产生抗性,与2016年监测结果相同[5],出现同一种群白纹伊蚊成蚊和幼蚊对同种杀虫剂抗药性结果不一致情况,一方面源于目前国内尚无共同参考的幼蚊敏感基线,参考不同的敏感基线可能抗性倍数变化较大,而成蚊的诊断剂量全国统一,具有较好的可比较性,因此可能会造成成蚊和幼蚊的抗性水平不一致、不匹配问题;另一方面可能成蚊和幼蚊的抗性机制存在差异,特别是胃毒抗性、行为抗性和击倒抗性的差异性也会导致成、幼蚊抗性水平的一致,因此还需从酶学及分子抗性机制等方面进一步研究确证。在实际用药和操作中,含有效成分残杀威的杀虫剂主要用于成蚊、成蝇的防制,很少用于白纹伊蚊幼蚊的杀灭,因此针对成蚊和幼蚊出现抗性结果不一致时,WHO推荐使用成蚊抗性测定结果来指导成蚊的防控,不宜采用幼蚊抗药性监测结果来指导成蚊的防控[14-15]。
监测结果提示南昌市后期要重点加强蚊虫孳生地治理,从源头上减少蚊虫孳生,及时开展抗药性监测并根据监测结果制定全市伊蚊防制用药指南,指导全市合理选择使用杀虫剂,少用或停用对成蚊已产生中、高抗性的拟除虫菊酯杀虫剂和对幼蚊已产生中、高抗性的双硫磷等,轮换使用对成蚊仍敏感的有机磷类、氨基甲酸酯类等杀虫剂,以延缓抗药性进一步发展。
利益冲突 无
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