蜱可携带和传播细菌、病毒、立克次体、螺旋体和寄生虫等上百种病原体，是仅次于蚊的第二大病媒生物^[1]。近年来我国蜱传疾病形势日益严峻，传统的蜱传疾病感染人数显著增加，疫区范围快速扩大，新的蜱传病原体不断被发现，近40年来我国新发现的蜱传病原体接近40种^[2]，其中大别班达病毒（Bandavirus dabieense），又称发热伴血小板减少综合征病毒（Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus，SFTSV），是我国于2010年首次从患者血液样本和蜱中分离到^[3]，并提示蜱为该病的传播媒介^[4-5]。2017年东阳市首次报告SFTSV感染引起的发热伴血小板减少综合征（SFTS）病例，截止2019年底，东阳市累计报告SFTS病例7例，死亡2例，病死率28.57%，病例分布于全市4个镇，其中湖溪镇3例，东阳江镇2例，南马镇和马宅镇各1例。

不同种类的蜱喜欢不同的生境或环境，这决定了它们的地理分布，从而决定了人类蜱传播感染的风险区域。东阳市位于浙江省中部，地形以丘陵和盆地为主，属亚热带季风气候，适宜蜱生长和繁殖，但之前东阳市未曾开展过蜱的本底调查。为了解东阳市蜱种类、季节消长及SFTSV感染情况，作者于2019－2020年连续开展监测工作，完成了环境游离蜱与常见家养动物、野外鼠类动物体表寄生蜱的调查，并进行蜱中SFTSV的检测，现将结果报告如下。

根据东阳市地理地形特征，随机选择盆地（六石街道、歌山镇）、丘陵（南马、湖溪镇）、山地（东阳江、佐村镇）3种地形地貌的6个镇（街道）为游离蜱和家养动物寄生蜱的调查地，每个调查地分别确定2个行政村作为调查点（其中湖溪镇、东阳江镇各有1个调查村既往曾确诊SFTS病例，其他村在调查时未曾确诊过SFTS病例），于2019－2020年每年的3、6、9和11月各进行1次调查；歌山镇作为鼠类动物体表寄生蜱的调查点。

采用人工布旗法，每次每点监测30 min，将长×宽为100 cm×60 cm的长方形纯棉白色布旗，系于100 cm左右长的布旗杆上，监测者手执布旗杆，旗的下缘至少40 cm拖于地面，在草丛、灌木丛中慢速直线行走，每5 min查看1次布旗，将布旗上或拖蜱者身上的蜱用镊子捡起放于有盖螺口管中，并记录采集地点和时间，鉴定、计数后计算蜱密度指数。蜱种类鉴定在解剖镜下进行，依据《中国经济昆虫志第三十九册蜱螨亚纲硬蜱科》鉴定。

式中，s为拖蜱距离，单位：m；x为各布旗采获蜱数，单位：只。

检查监测点农户饲养的犬、牛、羊等家养动物体表，检拾寄生蜱，将捕获的蜱进行分类鉴定、计数，计算染蜱率和蜱指数；根据捕获时间、动物宿主、蜱种类进行分组后存放于-80 ℃冰箱。

2019年在东阳市鼠疫监测点歌山镇于4、6、8和10月开展鼠类体表寄生蜱调查，将捕获的鼠类麻醉后捡拾体表蜱，将捕获的蜱进行分类鉴定、计数，计算染蜱率和染蜱指数；根据捕获时间、鼠种类、蜱种类进行分组后存放于-80 ℃冰箱。

将同一时间、同一地点、同一寄生宿主捕获的相同性别和虫态的同一种蜱类，单只或分组进行病毒检测，采用反转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测SFTSV核酸：取单组蜱样本，用75%乙醇溶液消毒及生理盐水反复清洗3次，滤纸吸干水分后，捣碎加入90 ml TE使蜱细胞悬浮起来，再按照核酸提取试剂盒说明书进行核酸提取，试剂盒为TaKaRa Bio公司生产的One Step PrimeScript RT-PCR Kit（货号为RR046A），荧光定量PCR仪为ThermoFisher的7500 Real-Time PCR System，引物和探针由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，名称及序列见表 1，扩增片段为SFTSV的S基因片段。SFTSV检测所用体系：Buffer 12.5 μl，Enzyme 1.0 μl，Primer-probe mix 1.5 μl，H₂O 5.0 μl，模板5.0 μl。RT-qPCR反应条件：45 ℃ 10 min；95 ℃ 10 min；94 ℃ 15 s，51 ℃ 45 s，45个循环。

表 1 实时荧光定量RT-PCR检测大别班达病毒引物及Taqman探针序列 Table 1 Primers and Taqman probe sequences of real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction for detection of Sever fever with thrombocytopenia syndrome virus

表选项

数据用Excel 2019软件录入，应用SPSS 19.0软件进行统计分析，率的差异采用χ²检验，捕获蜱数量差异采用Fisher确切概率检验，P < 0.05为差异有统计学意义。

2019－2020年东阳市6个镇（街道）共捕获游离蜱740只，蜱密度为30.83只/（布旗·100 m）。其中成蜱35只（占4.73%）、若蜱700只（占94.59%）、幼蜱5只（占0.68%），优势虫态为若蜱。35只成蜱隶属于1科3属6种，分别为长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）17只、褐黄血蜱（H. flava）和中华硬蜱（Ixodes sinensis）各5只、豪猪血蜱（H. hystricis）4只、台岛血蜱（H. formosensis）3只、镰形扇头蜱（Rhipicephalus haemaphysaloides）1只，优势蜱种为长角血蜱；705只若、幼蜱均为血蜱属种类。调查的6个镇（街道）除六石街道外，其他镇均捕获到蜱，其中蜱密度最高的为东阳江镇，其次为湖溪和佐村镇；捕获蜱种类最多的为湖溪镇，捕获6种成蜱及血蜱属的若蜱和幼蜱，其次为东阳江镇，捕获4种成蜱及血蜱属的若蜱和幼蜱。见表 2。

表 2 浙江省东阳市2019－2020年6个镇（街道）游离蜱分布 Table 2 Distribution of free-living ticks in six towns (streets) in Dongyang, Zhejiang Province, 2019-2020

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调查犬、牛、羊3种家养动物共235只，蜱阳性动物44只，染蜱率为18.72%，羊染蜱率最高，为21.43%，牛染蜱率最低为11.54%，但3种动物染蜱率差异无统计学意义（χ²=2.281，P=0.320）；共获蜱222只，蜱指数0.94；优势虫态为成蜱，占72.07%（160/222）。222只蜱中，成蜱160只，隶属于1科3属8种，优势蜱种为镰形扇头蜱（101只），其次为血红扇头蜱（R. sanguineus，30只），其他分别为中华硬蜱、长角血蜱、微小扇头蜱（R. microplus）、褐黄血蜱、豪猪血蜱和台岛血蜱；若蜱56只，分别为血蜱属54只和扇头蜱属2只；幼蜱6只，均为血蜱属。犬的寄生蜱种类最多，捕获7种成蜱、2属若蜱及1属幼蜱，牛体表检获3种成蜱及1属若蜱，羊体表检获2种成蜱及1属若蜱（表 3）。单只动物寄生蜱最多的为犬，达2种41只，单只动物体表检获≥2种寄生蜱的以犬最多，为8只，牛2只，羊1只。

表 3 浙江省东阳市2019－2020年家养动物体表寄生蜱分布 Table 3 Distribution of parasitic ticks on the body surface of domestic animals in Dongyang, Zhejiang Province, 2019-2020

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共捕获鼠类9种710只，其中黑腹绒鼠（Eothenomys melanogaster）333只，占46.90%，为东阳市歌山镇监测点的优势鼠种，次优势种为黑线姬鼠（Apodemus agrarius，291只），占40.98%，捕获其他鼠种有北社鼠（Niviventer confucianus）、针毛鼠（N. fulvescens）、青毛巨鼠（Berylmys bowersi）、巢鼠（Micromys minutus）、黄胸鼠（Rattus tanezumi）、褐家鼠（R. norvegicus）、小泡巨鼠（Leopoldamys edwardsi）。从6种61只鼠类中检获蜱，鼠染蜱率为8.59%，获蜱153只，蜱指数为0.22，其中成蜱53只、若蜱98只，幼蜱2只。53只成蜱隶属1科2属3种，其中粒形硬蜱（I. granulatus）50只、中华硬蜱2只、长角血蜱1只，优势蜱种为粒形硬蜱；98只若蜱隶属1科3属，其中扇头蜱属蜱类44只，血蜱属40只，硬蜱属14只；2只幼蜱隶属1科2属，扇头蜱属和革蜱属（Dermacentor）各1只。见表 4。

表 4 浙江省东阳市2019年捕获鼠类体表寄生蜱分布 Table 4 Distribution of parasitic ticks on the body surface of captured rodents in Dongyang, Zhejiang Province, 2019

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每个季度均有捕获，其中一季度捕获447只，占全部的60.41%，二季度次之，捕获236只，占全部蜱的31.89%，一、二两个季度捕获的蜱占捕获总数的92.30%（主要为东阳江镇横锦村监测点游离若蜱，一季度捕获若蜱295只，二季度捕获若蜱113只），三季度最少。山区、丘陵和盆地在不同季度蜱数差异有统计学意义（Fisher确切概率法检验P < 0.001）。见表 5。

表 5 浙江省东阳市2019－2020年游离蜱季节分布 Table 5 Seasonal distribution of free-living ticks in Dongyang, Zhejiang Province, 2019-2020

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对捕获蜱中的794只共分成185组进行SFTSV核酸检测，其中镰形扇头蜱、粒形硬蜱等9种成蜱275只87组，血蜱属、扇头蜱属、硬蜱属若蜱510只94组，血蜱属、扇头蜱属和革蜱属幼蜱9只4组，结果均阴性。见表 6。

表 6 浙江省东阳市2019－2020采获蜱带病毒情况 Table 6 Detection of viruses carried by harvested ticks in Dongyang, Zhejiang Province, 2019-2020

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东阳市2019－2020年调查发现有4种血蜱、3种扇头蜱、2种硬蜱及未鉴定到种革蜱共4属10种蜱，蜱的种类丰富，远超苏州、济南等市^[6-7]。长角血蜱为捕获游离蜱的优势种群，该蜱种适应性强，在全国大部分地区广泛分布，监测中频繁捕获^[8]，有研究表明长角血蜱能携带高达49种病原体，是我国迄今为止携带病原体种类最多的蜱^[9]，也是SFTS的主要宿主和传播媒介^[10]。东阳市调查的6个镇（街道）中，5个镇（街道）自然环境中检出长角血蜱或血蜱属的若、幼虫，说明该蜱种在东阳市也广泛分布，应引起重视。寄生蜱与游离蜱调查监测点相同，但家养动物寄生蜱优势种群为镰形扇头蜱，与游离蜱优势种群不同，推测是由于寄生蜱调查对象中犬类占了大多数，犬是镰形扇头蜱的重要宿主动物，而游离蜱调查的生境长角血蜱的主要宿主牛、羊活动更多。鼠类体表寄生蜱的优势种群为粒形硬蜱，符合硬蜱的吸血习性。在山地、丘陵及盆地不同类型地形中，2个山区镇及丘陵地区中的湖溪镇比其他调查镇蜱密度要高、种群也更丰富，其中东阳江镇和湖溪镇两地毗邻，均位于大磐山脉北侧，部分村沿山脉分布，2017－2019年报告SFTS病例数以这2个镇为主，占71.43%，蜱和相关传染病的分布趋势一致。

东阳市家养动物平均染蜱率为18.72%，3种动物中羊染蜱率最高，牛最低，但不同动物染蜱率差异无统计学意义。平均蜱指数为0.94，低于2018、2019年国家监测点平均蜱指数2.25和1.85^{[8, 11]}，远低于与东阳市毗邻的义乌市报道的5.76^[12]。鼠类动物平均染蜱率为8.59%，蜱指数为0.22；染蜱率高于潘志明等^[13]、余向华等^[14]报道的广东省和温州市，而蜱指数低于广东省、高于温州市。3种监测动物中犬体表染蜱种类和数量均最多，而在日常的生活中犬与人类接触最为密切，应高度重视因犬类活动引起的居住地周边蜱密度增高及接触，加强蜱活动、预防和控制相关知识的健康教育，降低通过犬等动物感染蜱及蜱相关传染病的风险；3种动物均存在多种蜱共同感染情况，助推了病原体在不同蜱和动物中的传播和扩散^[15]。

东阳市蜱季节性分布明显，与浙江省其他地区报道基本相似^[16]，春、夏季蜱密度较高，种类丰富，为蜱活动高峰期，提示要加强此时间段的蜱类监测和防控，做好公众从事农业活动及野外踏青时蜱类防护的宣传教育。

本研究中，若、幼蜱因可获得文献原因未做种类鉴定，对结果分析产生一定的影响。本研究对185组794只蜱检测SFTSV特异性核酸，结果均为阴性，这可能是因蜱带病毒率不高，检测的数量有限所致，也可能与检测的蜱以若、幼蜱为主有关，今后需进一步研究。近年来，我国陆续报道包括SFTSV在内的30余种新发蜱媒病原体^[17-19]，浙江省也先后报道了莱姆病、无形体、埃立克体、立克次体等蜱媒传疾病和蜱媒病原体^[20]，严重威胁人群健康，今后东阳市在开展蜱虫SFTSV研究的同时应加强其他蜱媒病原体的携带感染情况的研究。

利益冲突  无