病媒生物指能直接或间接传播疾病（一般指人类疾病），危害、威胁人类健康的生物^[1]，鼠类[含其他小型兽类（小兽）]属于全国重要病媒生物监测的对象之一。鼠类体型较小、繁殖力强、食性广泛、适应力强、与人类生活密切，可携带问号钩端螺旋体（Leptospira interrogans，钩体）、恙虫病东方体（Orientia tsutsugamushi，Ot）、汉坦病毒（Hantavirus）和大别班达病毒（Dabie bandavirus）等病原体，是多种自然疫源性疾病的重要传染源。遵义市位于中国西南部，介于北纬27°8´~29°12´、东经105°36´~108°13´，属于亚热带湿润季风气候，冬无严寒，夏无酷暑，雨量充沛，日照充足，处于云贵高原向湖南丘陵和四川盆地过渡的斜坡地带，有大片粮食、油料作物种植耕地，良好的气候条件加以复杂的地理环境，为各类生物繁衍生息提供了有利条件。根据中国疾病预防控制信息系统数据显示，遵义市2010－2021年间，报告钩体病15例、恙虫病38例、肾综合征出血热（HFRS）605例（死亡6例）、发热伴血小板减少综合征（SFTS）3例，鼠传疾病多发，危害居民身体健康，但遵义市未开展过相关调查，因此本文对遵义市2022年度鼠类及其病原学监测结果进行分析，旨在逐步掌握遵义市鼠类病媒生物基底情况，了解遵义市鼠种类、密度及其携带病原体情况，为遵义市鼠类防制工作提供科学依据，更好的开展灭鼠工作，进而减少鼠传疾病的发生。

参照根据《全国病媒生物监测实施方案》修订完善形成的《遵义市2022年病媒生物监测方案》，2022年度监测工作时限为2021年10月－2022年10月（以下统称2022年）。监测点覆盖全市14个县（市、区），各县（市、区）均设置东、南、西、北、中5个采样区域，共70个采样点，生境类型包括城镇居民区、农村居民区、重点行业（餐饮、食品制售、建筑工地、屠宰场和酿造厂等）和农田耕地4类生境。

个人防护用品、中号鼠夹、鼠袋、眼科剪、手术剪、镊子、液氮罐、移动解剖台等现场标本采集工具均为市场采购，无菌冻存管（比克曼生物）。

采用夹夜法。以花生米为诱饵，晚放晨收。室内按每15 m²布放1个鼠夹，超过100 m²的房间沿墙根每5 m布放1个鼠夹，室外每5 m布放1个鼠夹。居民区以外环境为主，重点行业（餐饮、食品制售）以室内环境为主，各种房间（厨房、库房等）均兼顾，农村居民区室内外均匀布夹。截止监测结束，每一监测点布夹不少于300有效夹夜（1个鼠夹布放1晚为1夹夜，简称“夹”）。无效夹指丢失或不明原因击发的鼠夹。

根据《常见病媒生物分类鉴定手册》^[2]和《中国哺乳动物多样性（第2版）》^[3]对捕获的小兽进行分类鉴定。

组织细胞破碎仪（美国Next Advance公司），高速冷冻离心机（美国默克公司），核酸提取试剂盒（西安天隆科技有限公司），2× TaqMan Fast qPCR Master Mix（Low Rox）试剂盒、2× one step RT-qPCR Probe Mix试剂盒[生工生物工程（上海）股份有限公司]，GeneRotex 96全自动核酸提取仪、Gentier 96E全自动医用PCR分析系统（西安天隆科技有限公司）。

采用磁珠法。取出待检测的组织标本，根据待检测病原体所需脏器标本组织分别剪取适量的标本组织置于对应的无菌研磨管中混合并进行研磨，然后将研磨均匀的组织按照试剂盒说明书提取核酸，并保存于-20 ℃冰箱内待病原体检测。

按照《全国病媒生物病原学监测方案（试行）（修订版）》中技术规范执行，采用Taqman荧光定量PCR/反转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法，对单只小兽的肝、脾、肾标本检测问号钩体、Ot，肝、脾、肺标本检测大别班达病毒，肺标本检测汉坦病毒。反应使用试剂盒自带的阳性、阴性对照。反应条件见表 1，核酸检测引物和探针序列见表 2。

表 1 本研究中小型兽类携带病原体检测反应条件 Table 1 Reaction conditions for pathogen detection in small mammals

表选项

表 2 本研究中小型兽类携带病原体检测所用引物和探针序列 Table 2 Primers and Probes for pathogen detection in small mammals

表选项

（1）阳性质控：循环数阈值（Cq）值≤30，且有明显指数增长。

（2）阴性质控：Cq值> 40或者无Cq值。

（1）阳性：恙虫病东方体Cq值≤33，钩体、汉坦病毒以及大别班达病毒Cq值≤35，且具有明显指数增长。需要注意的是上述阈值会因扩增仪型号而异，实际操作中应根据阳性对照的结果重新评估检测阈值。

（2）灰区：样本检测结果Cq > 阳性检测阈值，但是 < 40，此时应对样本进行复检，如果重复试验Cq仍在上述范围，且有明显指数增长，则判定为阳性；否则则判定为阴性。

（3）阴性：Cq值> 40或者无Cq值。

（1）恙虫病东方体、钩体检测：FAM通道阳性（+），说明标本中存在上述2种病原体，阴性（-）则说明无。

（2）汉坦病毒检测：FAM通道阳性（+），说明标本中存在汉滩型汉坦病毒（HTNV）；HEX通道阳性（+），说明标本中存在首尔型汉坦病毒（SEOV）；阴性（-）则说明无。

（3）大别班达病毒检测：FAM通道阳性（+），说明标本中存在M基因型大别班达病毒；HEX通道阳性（+），说明标本中存在L基因型大别班达病毒；TexasRed通道阳性（+），说明标本中存在S基因型大别班达病毒；阴性（-）则说明无。

采用Excel 2021软件进行数据整理，SPSS 26.0软件进行统计学分析，计数资料分析采用率或构成比之间的χ²检验，P < 0.05为差异有统计学意义。

各采样点共布放有效夹9 969夹次，共捕获小兽549只，小兽总密度为5.51%，除去鼩鼱（Sorex sp.）类，捕获鼠类522只，总鼠密度为5.24%，各县（市、区）中红花岗区鼠密度最高，为12.94%，其次为凤冈县（12.34%），赤水市鼠密度最低（1.80%），各县（市、区）鼠密度见表 3，各县（市、区）鼠密度差异有统计学意义（χ²=195.619，P < 0.001）。

表 3 贵州省遵义市各县（市、区）2022年小型兽类密度和鼠密度 Table 3 Densities of rodents and rodent-like animals in counties/districts of Zunyi, Guizhou province, China, 2022

表选项

4种不同的生境类型中，城镇居民区、农村居民区和重点行业的优势鼠种均为褐家鼠（Rattus norvegicus），农田耕地以黑线姬鼠（Apodemus agrarius）为优势鼠种（表 4）。不同生境小兽种类构成差异有统计学意义（χ² =402.688，P < 0.001）。

表 4 贵州省遵义市2022年不同生境小型兽类种类构成 Table 4 Species composition of small mammals in different habitats of Zunyi, Guizhou province, China, 2022

表选项

将遵义市14个县（市、区）划分为4个区域：中部地区（红花岗、汇川、播州区和桐梓、绥阳县）、北部地区（正安、道真仡佬族苗族自治县、务川仡佬族苗族自治县）、东部地区（凤冈、湄潭、余庆县）、西部地区（习水、赤水、仁怀县）。各区域小兽种类及构成见表 5，各区域小兽种类构成差异有统计学意义（χ²=117.357，P < 0.001）。

表 5 贵州省遵义市2022年不同区域小型兽类种类构成 Table 5 Species composition of small mammals in different regions of Zunyi, Guizhou province, China, 2022

表选项

共随机抽取检测标本343份（只），检出5种病原体阳性共27份（只），阳性病原体均为问号钩体，检出率为7.87%。其中鼩鼱检出率最高，为16.00%，其次为黑线姬鼠（12.35%），褐家鼠最低（1.64%）（表 6），不同种类小兽检出率差异有统计学意义（χ²=14.372，P=0.002）。

表 6 贵州省遵义市2022年小型兽类病原体检测情况 Table 6 Pathogen detection results of small mammals in Zunyi, Guizhou province, China, 2022

表选项

4种生境类型中，城镇居民区和农村居民区小兽未检出问号钩体，农田耕地小兽问号钩体检出率最高，为9.66%（26/269），重点行业小兽问号钩体检出率为2.94%（1/34），不同类型生境小兽问号钩体检出率差异无统计学意义（χ²=5.171，P=0.160）。

遵义市14个县（市、区）中，湄潭县小兽问号钩体检出率最高，为27.03%；其次为绥阳县（25.00%）；仁怀市、凤冈和余庆县小兽未检出问号钩体（表 7）。不同地区小兽问号钩体检出率差异有统计学意义（χ²=35.409，P=0.001）。

表 7 贵州省遵义市2022年不同地区小型兽类问号钩端螺旋体检出情况 Table 7 Detection results of Leptospira interrogans in small mammals in different regions of Zunyi, Guizhou province, China, 2022

表选项

监测结果显示遵义市鼠密度为5.24%，各县（市、区）鼠密度均 > 1.00%，与邹志辉等^[4]研究结果相似。红花岗区鼠密度最高，为12.94%，可能与红花岗区属于老城区有关，老城区人口密集、餐饮业发达、卫生条件较差、地下管道密集陈旧等因素均有利于鼠类繁衍生息。遵义市鼠密度较高，提示遵义市鼠害发生风险较高，既可危害农作物，致其产量下滑，影响农业发展^[5]，也可导致鼠传疾病的发生，威胁人类的健康，应采取以“环境治理”为主的综合防制策略，加大环境整治和春、秋季灭鼠工作力度，如加强垃圾站、中转站及其周边的环境卫生治理工作，垃圾日产日清，减少垃圾留存时间^[6]。在应用常规灭鼠方法的同时，根据实际情况可学习引入安全、高效、绿色、环保的灭鼠技术，如：围栏陷阱法（trap-barrier system，TBS）灭鼠技术^[7]等，以提升灭鼠工作效率，降低遵义市鼠密度，降低鼠传疾病发生风险。

本次监测发现，城镇居民区、农村居民区和重点行业的优势鼠种均为褐家鼠，与魏尊^[8]、唐丽玲等^[9]、周博等^[10]研究结果相似。褐家鼠栖息场所广泛，但大多数在居民区，主要栖居于住房和各类建筑物中，特别是在牲畜圈棚、仓库、食堂、屠宰场等处数量最多，是城市下水道中唯一鼠种^[4]。农田耕地优势种为黑线姬鼠，与尹文书和杨再学^[11]研究结果相似。黑线姬鼠主要生活在野外，作物区常见，极少进入家中，食性杂^[2]。提示应将褐家鼠作为遵义市居民区和重点行业主要防制对象，将黑线姬鼠作为遵义市农田耕地主要防制对象，可针对其生活特性开展防制工作。遵义市4个区域小兽种类构成差异有统计学意义，可能与各区域的海拔高度、地形特点和气候条件等因素有关，可对主要种类生态学特征开展进一步研究，为遵义市更有针对性地开展鼠类防制提供科学依据。

从343只小兽标本中共检出问号钩体阳性27份，提示在遵义市境内问号钩体可能存在鼠间流行情况，人感染风险较高。问号钩体可引起钩体病，虽然遵义市2010－2021年仅报告15例钩体病病例，发病水平较低，但仍需警惕人间钩体病的发生。钩体病是人兽共患病，人类接触污染了钩体的疫水或疫土而感染^[12]，可使患者出现流感、伤寒样症状，严重者可伴随肺出血、肝肾损伤，甚至导致死亡^[13]。27份问号钩体阳性标本中，鼠类以黑线姬鼠病原体检出率最高，达12.35%，提示黑线姬鼠是遵义市鼠携带问号钩体的主要宿主和传染源，应加强对主要宿主的灭杀，以减少病原体的鼠间传播，进一步减少鼠传疾病发生。鼩鼱类病原体阳性检出率较各鼠种均高，其可通过尿液或粪便排出钩体污染水源或土壤，增加疾病感染风险，提示在开展灭鼠工作的同时，应适当进行鼩鼱类的灭杀工作，可根据鼩鼱的肉食特性，以鱼干、虾米和蚯蚓等荤腥食物为基饵制成的毒饵比以稻谷和花生等素食为基饵制成的毒饵对鼩鼱具有更好的适口性，具有更好的防制效果^[14]。不同类型生境小兽病原体检出率差异无统计学意义，与陶晓颖等^[15]研究结果一致，提示鼠类钩体感染状况暂不具有环境特异性。不同地区小兽体内病原体调查中，湄潭县病原体检出率最高（27.03%），绥阳县次之（25.00%），提示湄潭和绥阳县钩体病病例发生的风险较高，应引起重视，重点加强防制工作。此次监测未检出汉坦病毒，而遵义市在2010－2021年间报告HFRS 605例（死亡6例），是存在检测技术上的缺陷，还是因为其他原因，有待进一步明确，后续将针对鼠类感染汉坦病毒情况开展专项调查。

综上，遵义市鼠密度较高，检出病原体均为问号钩体，需警惕相应疾病的发生，各地应积极响应，加强春、秋季灭鼠工作，根据各生境优势鼠种和病原体检出情况结合各地区实际采取综合防制措施，降低鼠密度，防止鼠传疾病的发生。灭鼠工作取得成效后，可探讨建立相关灭鼠工作长效管理机制，达到维护生态平衡、有效控制鼠密度和发挥长效灭鼠工作的目的^[16]。此次监测初步了解了遵义市鼠种类、密度及其病原体携带情况，可作为遵义市鼠类病媒生物本底资料，为遵义市鼠类及鼠传疾病防制提供参考。

利益冲突  无