2023, Vol. 34扩展功能
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- 牛艳芬, 周松, 刘广, 刘晓伟, 张懿晖, 王海峰, 段然, 王鑫, 杨晓燕, 杜越聪, 王汐, 赵升, 金春霞, 杜国义, 史献明, 崔耀仁, 闫萍
- NIU Yan-fen, ZHOU Song, LIU Guang, LIU Xiao-wei, ZHANG Yi-hui, WANG Hai-feng, DUAN Ran, Xin WANG, YANG Xiao-yan, DU Yue-cong, WANG Xi, ZHAO Sheng, JIN Chun-xia, DU Guo-yi, SHI Xian-ming, CUI Yao-ren, YAN Ping
- 河北省鼠疫自然疫源地小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌的调查研究
- Investigation of Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica in the natural focus of plague in Hebei province, China
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2023, 34(1): 91-93
- Chin J Vector Biol & Control, 2023, 34(1): 91-93
- 10.11853/j.issn.1003.8280.2023.01.016
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文章历史
- 收稿日期: 2022-09-06
牛艳芬, 周松, 刘广, 刘晓伟, 张懿晖, 王海峰, 段然, 王鑫, 杨晓燕, 杜越聪, 王汐, 赵升, 金春霞, 杜国义, 史献明, 崔耀仁, 闫萍. 河北省鼠疫自然疫源地小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌的调查研究[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2023, 34(1): 91-93.
NIU Yan-fen, ZHOU Song, LIU Guang, LIU Xiao-wei, ZHANG Yi-hui, WANG Hai-feng, DUAN Ran, Xin WANG, YANG Xiao-yan, DU Yue-cong, WANG Xi, ZHAO Sheng, JIN Chun-xia, DU Guo-yi, SHI Xian-ming, CUI Yao-ren, YAN Ping. Investigation of Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica in the natural focus of plague in Hebei province, China[J]. Chin J Vector Biol & Control, 2023, 34(1): 91-93.
河北省鼠疫自然疫源地小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌的调查研究
1 河北省鼠疫防治所检验科/流行病科, 河北 张家口 075000;
2 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所, 北京 102206;
3 张家口市地方病防治所, 河北 张家口 075000
2 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所, 北京 102206;
3 张家口市地方病防治所, 河北 张家口 075000
摘要: 目的 调查河北省鼠疫自然疫源地小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌分布情况，为鼠传疾病防控提供科学依据。方法 采集宿主动物舌根部和回盲肠部标本，分别用培养、PCR方法检测小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌，并采用Fisher确切概率法比较阳性率的差异。结果 共采集样本1 048份，其中舌根部543份，回盲肠部505份。致病性耶尔森菌细菌培养全部阴性。假结核耶尔森菌PCR初筛全部阴性。小肠结肠炎耶尔森菌PCR初筛铁草胺菌素受体蛋白基因（foxA）阳性2份，年阳性率为0.41%（2/490），舌根部和回盲肠部标本foxA阳性率差异无统计学意义（χ2=4.629，P=0.112）。结论 河北省鼠疫自然疫源地部分地区主要宿主携带小肠结肠炎耶尔森菌，鼠疫监测同时需要加强其他致病性耶尔森菌的监测。
关键词:
河北省鼠疫自然疫源地 小肠结肠炎耶尔森菌 假结核耶尔森菌 调查
Investigation of Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica in the natural focus of plague in Hebei province, China
1 Department of Laboratory/Department of Epidemiology, Anti-plague Institute of Hebei Province, Zhangjiakou, Hebei 075000, China;
2 National Institute for Communicable Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China;
3 Institute for Endemic Disease of Zhangjiakou, Zhangjiakou, Hebei 075000, China
2 National Institute for Communicable Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China;
3 Institute for Endemic Disease of Zhangjiakou, Zhangjiakou, Hebei 075000, China
Abstract: Objective To investigate the distribution of Yersinia pseudotuberculosis and Y. enterocolitica in the natural focus of plague in Hebei province, China, and to provide a scientific basis for rodent borne diseases prevention and control. Methods Samples from the lingual root and ileocecum of host animals were collected, and culture and polymerase chain reaction (PCR) were used to detect Y. enterocolitica and Y. pseudotuberculosis. Results A total of 1 048 samples were collected, including 543 samples from the lingual root and 505 samples from the ileocecum. All bacterial cultures were negative for pathogenic Yersinia. All samples were negative for Y. pseudotuberculosis with PCR screening. Two foxA+ (ferrioxamine receptor gene) samples for Y. enterocolitica were screened out by PCR, and the annual positive rate was 0.41% (2/490). Conclusion The main host in some natural foci of plague in Hebei province carries Y. enterocolitica, and the surveillance of other pathogenic Yersinia should be strengthened at the same time of plague surveillance.
Key words:
Natural foci of plague in Hebei province Yersinia enterocolitica Yersinia pseudotuberculosis Survey
河北省鼠疫自然疫源地地处河北省北部，现疫疫源县位于康保县，但历史上河北省鼠疫流行分布情况还包括张家口市的张北、尚义、沽源县和承德市的丰宁满族自治县（丰宁县）、围场满族蒙古族自治县（围场县）[1]。自1971年在康保县首次分离到鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）从而证实河北省鼠疫自然疫源地存在后，河北省共有5次动物间鼠疫流行[2-4]。对人类和动物致病的耶尔森菌主要有鼠疫菌、小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌，研究发现同一疫源地中致病性耶尔森菌间存在互相抑制作用[5-6]。为了分析河北省鼠疫自然疫源地致病性耶尔森菌的分布情况及其关系，探讨鼠疫菌在自然界的长存机制，我们进行了本次调查。
1 材料与方法 1.1 材料来源在河北省鼠疫监测点尚义县大苏计乡、张北县两面井乡、沽源县高山堡乡、丰宁县鱼儿山镇和围场县的御道口镇采集主要宿主动物。
1.2 主要仪器和试剂PCR扩增仪[TC-96/G/H（b）B，购自杭州博日科技有限公司]、Premix TaqTM（Version 2.0 plus dye，购自TaKaRa公司）、细菌基因组DNA提取试剂盒（DP302，购自天根生化北京有限公司）、耶尔森菌选择培养基（购自OXOID）、改良磷酸盐缓冲液（购自Fluka）、脑心浸液培养基（购自北京陆桥技术有限责任公司）、Api 20E生化鉴定条（购自法国梅里埃公司）。
1.3 小肠结肠耶尔森菌和假结核耶尔森菌筛查 1.3.1 样本处理采集疫源地宿主动物舌根部和回盲肠部标本，剪碎分别置入改良磷酸盐缓冲液，4 ℃冷增菌21 d。
1.3.2 PCR筛查冷增菌，吸取增菌液按照DNA提取试剂盒说明书提取标本核酸，扩增并电泳初筛铁草胺菌素受体蛋白基因（foxA）、粘附侵袭位点基因（ail）和侵袭素基因（Inv），扩增程序和阳性判定标准参考《耶尔森菌病诊断》团体标准[7]。
1.3.3 菌株分离及生化鉴定参照文献[8]PCR初筛阳性标本接种于耶尔森菌选择培养基上，25 ℃培养24 h后挑选“公牛眼”状可疑菌落接种于脑心浸液培养基，25 ℃继续培养24 h后挑取菌落至生理盐水中，研磨细菌制作菌悬液，按照说明书要求使用Api 20E肠杆菌生化鉴定条进行鉴定，28 ℃培养24 h判定结果。
1.4 统计学分析采用Excel 2010软件录入调查数据及实验结果，采用SPSS 19.0软件进行统计分析。计数资料用率/百分比（%）表示，四格表中理论频数 < 1，组间阳性率比较采用Fisher确切概率法。P < 0.05表示差异有统计学意义。
2 结果 2.1 河北省鼠疫自然疫源地致病性耶尔森菌调查标本情况2020－2021年河北省致病性耶尔森菌调查中共采集样本1 048份，其中舌根部543份，占调查总数的51.81%，回盲肠部505份，占48.19%；共捕获宿主动物6种，其中达乌尔黄鼠（Spermophilus dauricus）样本最多，占捕获总数的91.98%，1 048份样本采自于5个鼠疫监测区。见表 1。
表 1 河北省鼠疫自然疫源地致病性耶尔森菌标本来源及检出情况
Table 1 Specimen source and detection of pathogenic Yersinia in natural foci of plague in Hebei province
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1 048份样本中PCR初筛小肠耶尔森菌foxA阳性2份，年阳性率为0.41%（2/490），假结核耶尔森菌PCR初筛全部阴性。小肠耶尔森菌foxA阳性样本来自丰宁县鼠疫监测点，宿主动物为达乌尔黄鼠，舌根部和回盲肠部阳性样本各1份，不同部位中foxA阳性率差异无统计学意义（χ2=4.629，P=0.112）。细菌培养全部阴性。PCR初筛小肠结肠炎耶尔森菌foxA阳性结果见表 1和图 1。
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| 注：foxA铁草胺菌素受体蛋白基因；foxA+ 阳性标本；-阴性对照；+ foxA+对照。 图 1 PCR初筛小肠结肠炎耶尔森菌foxA阳性结果 Figure 1 PCR positive result of the Yersinia enterocolitica foxA+ gene |
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本次调查结果显示，小肠结肠炎耶尔森菌主要存在于丰宁县鼠疫监测地区，远离河北省鼠疫菌存在的康保地区，Wang等[9]和段然等[10]研究发现同一鼠疫疫源地内鼠疫菌和小肠结肠炎耶尔森菌呈“同心圆”分布，离鼠疫菌越远地区，小肠结肠炎耶尔森菌分离率越高，与本研究结果一致。本研究中小肠结肠炎耶尔森菌PCR阳性样本均采自5月，可能因为小肠结肠炎耶尔森菌是嗜冷菌，适宜生活于低温潮湿环境[11]，而本次样本采集时间主要集中于春夏季，因此阳性率不高。徐大琴等[12]对甘肃省阿拉善黄鼠（S. dauricus alaschnicus）疫源地致病性耶尔森菌的调查研究中也发现春夏季小肠结肠炎耶尔森菌检菌率较低；刘谊等[13]调查2010－2012年四川省现场检查与感染状况时还发现冬春季小肠结肠炎耶尔森菌的检出率高于夏季。河北省鼠疫疫源地中长爪沙鼠（Meriones unguiculatus）为主要宿主，达乌尔黄鼠为次要宿主，但近年来随着植被的改变，生境的变化[14]，过去宿主主要为长爪沙鼠的监测地区达乌尔黄鼠逐渐变为优势种[15]，本次调查中91.98%的样本来自达乌尔黄鼠，因此该疫源地达乌尔黄鼠小肠结肠炎耶尔森菌携带率是否高于其他种类宿主动物还需进一步调查研究。鼠疫监测的同时调查小肠结肠炎耶尔森菌在该疫源地的分布规律，探索其对鼠疫菌分布的影响，对河北省鼠疫防控有重要的意义。
利益冲突 无
参考文献
| [1] |
牛艳芬, 张懿晖, 闫东, 等. 2016年河北省鼠疫疫源地居民鼠疫健康素养调查研究[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2018, 29(1): 64-67. Niu YF, Zhang YH, Yan D, et al. Survey on the plague literacy of residents in the plague foci in Hebei province, 2016[J]. Chin J Vector Biol Control, 2018, 29(1): 64-67. DOI:10.11853/j.issn.1003.8280.2018.01.016 |
| [2] |
王玉梅, 白万翔. 鼠疫防治与应急处理指南[M]. 北京: 中国社会出版社, 2007: 3-7. Wang YM, Bai WX. Guide to plague prevention and emergency treatment[M]. Beijing: China Society Press, 2007: 3-7. |
| [3] |
牛艳芬, 刘合智, 张懿晖, 等. 河北省长爪沙鼠鼠疫疫源地鼠体蚤与气象因素关系分析[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2021, 32(1): 41-44. Niu YF, Liu HZ, Zhang YH, et al. An analysis of the relationship between rodent fleas and meteorological factors in Meriones unguiculatus plague foci in Hebei province, China[J]. Chin J Vector Biol Control, 2021, 32(1): 41-44. DOI:10.11853/j.issn.1003.8280.2021.01.008 |
| [4] |
杜国义, 闫东, 史献明, 等. 河北省动物鼠疫疫情处理经验探讨[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2019, 30(3): 324-326. Du GY, Yan D, Shi XM, et al. Discussion on the experience in dealing with animal plague epidemic in Hebei province, China[J]. Chin J Vector Biol Control, 2019, 30(3): 324-326. DOI:10.11853/j.issn.1003.8280.2019.03.022 |
| [5] |
Fukushima H, Hao Q, Wu KL, et al. Yersinia enterocolitica O9 as a possible barrier against Y. pestis in natural plague foci in Ningxia, China[J]. Curr Microbiol, 2001, 42(1): 1-7. DOI:10.1007/s002840010168 |
| [6] |
潘珠, 梁秋光, 岑清泉, 等. 3种致病性耶尔森菌对宿主鼠的交叉免疫反应研究[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2020, 31(5): 540-544. Pan Z, Liang QG, Cen QQ, et al. Study on cross-immune responses of three pathogenic Yersinia species to host rats[J]. Chin J Vector Biol Control, 2020, 31(5): 540-544. DOI:10.11853/j.issn.1003.8280.2020.05.008 |
| [7] |
中华预防医学会. 耶尔森菌病诊断(T/CPMA 005-2019)[J]. 中华流行病学杂志, 2019, 40(9): 1035-1043. Chinese Preventive Medicine Association. Diagnosis of Yersiniosis (T/CPMA 005-2019)[J]. Chin J Epidemiol, 2019, 40(9): 1035-1043. DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2019.09.003 |
| [8] |
徐大琴, 席进孝, 春花, 等. 甘肃夏河、碌曲县鼠疫主要宿主动物耶尔森菌感染状况调查[J]. 中华地方病学杂志, 2021, 40(4): 303-308. Xu DQ, Xi JX, Chun H, et al. Investigation of infection status of Yersinia in main host animals of plague in Xiahe and Luqu counties of Gansu province[J]. Chin J Endemiol, 2021, 40(4): 303-308. DOI:10.3760/cma.j.cn231583-20200522-00130 |
| [9] |
Wang X, Cui Z, Jin D, et al. Distribution of pathogenic Yersinia enterocolitica in China[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 2009, 28(10): 1237-1244. DOI:10.1007/s10096-009-0773-x |
| [10] |
段然, 梁俊容, 张婧, 等. 我国西南3省交界处静息鼠疫疫源地致病性耶尔森菌研究[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2017, 28(3): 260-263. Duan R, Liang JR, Zhang J, et al. Research on pathogenic Yersinia within natural plague focus during rest periods on the border of three provinces in southwest of China[J]. Chin J Vector Biol Control, 2017, 28(3): 260-263. DOI:10.11853/j.issn.1003.8280.2017.03.011 |
| [11] |
张涛, 卢世堂, 秦长育, 等. 宁夏鼠疫自然疫源地耶尔森氏菌分布调查[J]. 中国地方病防治杂志, 2004, 19(5): 289-291. Zhang T, Lu ST, Qin CY, et al. To investigate the distribution of Yersinia genus form Ningxia natural plague foci[J]. Chin J Ctrl Endem Dis, 2004, 19(5): 289-291. DOI:10.3969/j.issn.1001-1889.2004.05.012 |
| [12] |
徐大琴, 席进孝, 段然, 等. 甘肃黄鼠疫源地鼠疫宿主动物致病性耶尔森菌调查分析[J]. 中国人兽共患病学报, 2021, 37(7): 664-667. Xu DQ, Xi JX, Duan R, et al. Investigation and analysis of pathogenic Yersinia in plague host animals in the Spermonphilus alaschanicus plague foci of Gansu province[J]. Chin J Zoonoses, 2021, 37(7): 664-667. DOI:10.3969/j.issn.1002-2694.2021.00.102 |
| [13] |
刘谊, 李燕春, 祁腾, 等. 2010-2012年四川省小肠结肠炎耶尔森菌感染状况[J]. 预防医学情报杂志, 2016, 32(9): 895-898. Liu Y, Li YC, Qi T, et al. Study on condition of Yersinia enterocolitica in Sichuan province from 2010 to 2012[J]. J Prev Med Inf, 2016, 32(9): 895-898. |
| [14] |
袁星, 杨林生, 李海蓉, 等. 2000-2018年内蒙古长爪沙鼠疫源地地表景观特征及变化[J]. 地理研究, 2022, 41(3): 867-879. Yuan X, Yang LS, Li HR, et al. Landscape pattern changes of Meriones unguiculatus plague foci in Inner Mongolia from 2000 to 2018[J]. Geogr Res, 2022, 41(3): 867-879. DOI:10.11821/dlyj020210128 |
| [15] |
白雪薇, 牛艳芬, 陈永明, 等. 2001-2020年河北省鼠疫自然疫源地长爪沙鼠与达乌尔黄鼠密度变化趋势研究[J]. 中华卫生杀虫药械, 2021, 27(3): 226-230. Bai XW, Niu YF, Chen YM, et al. Study on the density change trend of Meriones unguiculatus and Spermophilus dauricus in the plague natural foci in Hebei province from 2001 to 2020[J]. Chin J Hyg Insect Equip, 2021, 27(3): 226-230. DOI:10.19821/j.1671-2781.2021.03.010 |