中国媒介生物学及控制杂志  2022, Vol. 33 Issue (6): 906-911

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田锋, 耿合员, 夏侯为民, 张子龙, 郭强, 赵丹云, 孙玉婷, 史燕, 蔡晓雪, 陈超怡, 蒋璐, 程慧
TIAN Feng, GENG He-yuan, XIAHOU Wei-min, ZHANG Zi-long, GUO Qiang, ZHAO Dan-yun, SUN Yu-ting, SHI Yan, CAI Xiao-xue, CHEN Chao-yi, JIANG Lu, CHENG Hui
2020年新疆霍尔果斯口岸地区鼠类及其体表寄生虫携带病原体调查
Investigation of rodents and their ectoparasites and pathogens at Horgos port in Xinjiang, China, 2020
中国媒介生物学及控制杂志, 2022, 33(6): 906-911
Chin J Vector Biol & Control, 2022, 33(6): 906-911
10.11853/j.issn.1003.8280.2022.06.026

文章历史

收稿日期: 2022-05-25
2020年新疆霍尔果斯口岸地区鼠类及其体表寄生虫携带病原体调查
田锋1 , 耿合员2 , 夏侯为民3 , 张子龙4 , 郭强5 , 赵丹云5 , 孙玉婷1 , 史燕1 , 蔡晓雪1 , 陈超怡1 , 蒋璐1 , 程慧1     
1 新疆国际旅行卫生保健中心(乌鲁木齐海关口岸门诊部)医学检验科, 新疆 乌鲁木齐 830011;
2 江苏国际旅行卫生保健中心(南京海关口岸门诊部), 江苏 南京 210000;
3 韶关海关综合技术服务中心技术部, 广东 韶关 512023;
4 上海国际旅行卫生保健中心(上海海关口岸门诊部), 上海 200050;
5 天津国际旅行卫生保健中心 (天津海关口岸门诊部), 天津 300456
摘要: 目的 了解新疆维吾尔自治区霍尔果斯口岸地区鼠种类和携带病原体情况。方法 2020年,在霍尔果斯口岸地区采用夹日法和夹夜法捕鼠,对捕获鼠类及体表寄生虫进行形态鉴定,采集鼠类脾脏和肺组织,用PCR方法检测脾脏的嗜吞噬细胞无形体、莱姆病螺旋体、鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)、斑点热群立克次体,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肺组织的汉坦病毒核酸。结果 2020年,在霍尔果斯口岸地区捕鼠9种142只,优势鼠种为小林姬鼠和大沙鼠;体表寄生蜱类4种25只,优势种为全沟硬蜱;体表寄生蚤类8种203匹,优势种为臀突客蚤。鼠脾中检出嗜吞噬细胞无形体核酸阳性8株和斑点热群立克次体核酸阳性1株,未检测到鼠疫菌、汉坦病毒、莱姆病螺旋体。结论 掌握了霍尔果斯口岸地区鼠类及体表寄生虫的构成以及携带病原体情况,结果对当地鼠、蜱、蚤及相关疾病防控有一定参考价值。
关键词: 鼠类    体表寄生虫    病原体    
Investigation of rodents and their ectoparasites and pathogens at Horgos port in Xinjiang, China, 2020
TIAN Feng1 , GENG He-yuan2 , XIAHOU Wei-min3 , ZHANG Zi-long4 , GUO Qiang5 , ZHAO Dan-yun5 , SUN Yu-ting1 , SHI Yan1 , CAI Xiao-xue1 , CHEN Chao-yi1 , JIANG Lu1 , CHENG Hui1     
1 Medical Examination Department, Xinjiang International Travel Health Care Center (Urumqi Customs Port Outpatient Department), Urumqi, Xinjiang 830011, China;
2 Jiangsu International Travel Healthcare Center (Nanjing Customs Port Outpatient Department), Nanjing, Jiangsu 210000, China;
3 Comprehensive Technical Service Center of Shaoguan Customs, Shaoguan, Guangdong 512023, China;
4 Shanghai International Travel Healthcare Center (Shanghai Customs Port Outpatient Department), Shanghai 200050, China;
5 Tianjin International Travel healthcare Center (Tianjin Customs Port Outpatient Deparment), Tianjin 300456, China
Abstract: Objective To investigate the rodent species and carried ectoparasites and pathogens at Horgos port in Xinjiang, China. Methods Rodents were captured by day snap-trapping and night snap-trapping methods at Horgos port in 2020. Morphological identification was carried out for the captured rodents and ectoparasites. The spleen and lung tissues of rodents were collected. Anaplasma phagocytophilum, Borrelia burgdorferi, Yersinia pestis, and spotted fever group rickettsiae in the spleen tissue were measured by polymerase chain reaction (PCR). Hantavirus nucleic acid in the lung tissue was measured by reverse transcription-PCR. Results In 2020, 142 rodents of 9 species were caught at Horgos port, and the dominant species were Apodemus sylvaticus and Rhombomys opimus. There were 25 parasitic ticks on the body surface belonging to 4 species, and the dominant species was Ixodes persulcatus. There were 203 parasitic fleas on the body surface belonging to 8 species, and the dominant species was Xenopsylla minax. Of the rodent ticks, 8 ticks tested positive for A. phagocytophilum nucleic acid, and 1 tick tested positive for spotted fever group rickettsiae nucleic acid; Y. pestis, hantavirus, and B. burgdorferi were not detected. Conclusion The composition of rodents and ectoparasites, as well as the carried pathogens at Horgos port provide some valuable reference for the prevention and control of rodents, ticks, fleas and related diseases in the local area.
Key words: Rodents    Ectoparasites    Pathogens    

鼠类及其体表寄生虫是多种疾病的传播媒介,目前已证实能携带和传播的病原体达100种之多,其中可使人类致病的病原体有56种。鼠类体表寄生虫主要包括蜱、蚤、螨等7类[1]。随着经济贸易和旅游事业的发展,中国同紧邻国家的往来不断增多,因此口岸地区啮齿动物和体表寄生虫的种类及其携带病原体的调查就显得尤为重要[2]。霍尔果斯口岸位于新疆维吾尔自治区(新疆)伊犁哈萨克自治州霍尔果斯市,属国家一类公路口岸,与哈萨克斯坦隔霍尔果斯河相望,近年来已成为中国西部最大的边境陆路口岸。根据历年对霍尔果斯口岸地区的病媒生物监测[3]和截获情况[4],该口岸地区鼠患严重,且多次检出致病性微生物,存在着巨大的疾病传播风险。为评价当地近年来灭鼠效果,进一步研究霍尔果斯口岸地区鼠类种群分布及病原体携带情况,完善中国-哈萨克斯坦(中哈)边境鼠传疾病流行病学数据,防范相关传染病的传入传出,作者于2020年4-5月在霍尔果斯口岸地区开展鼠类及其体表寄生虫调查,并进行鼠传疾病病原体的检测。

1 材料与方法 1.1 采样方法

2020年4-5月,使用二号鼠夹,采用夹夜法于合作中心口岸、配套区、铁路口岸、公路口岸、都拉塔、70团18连区6个点进行鼠类监测,每个监测点布放不少于100夹,夹间距5 m,行距100 m以上,下午布放鼠夹,次日上午将捕获的鼠装入鼠袋,带回实验室,麻醉后采集体表寄生虫并进行种类鉴定,然后解剖取鼠脾脏和肺组织,保存于-80 ℃超低温冰箱中备用。

1.2 监测指标计算

各监测对象监测指标计算公式:寄生虫携带率=染虫鼠数量/捕获鼠数量×100%,鼠密度=捕获鼠数量/有效夹数量×100%。

1.3 病原体检测 1.3.1 核酸检测

将脾脏或肺组织各20 mg放入1.5 ml的离心管中,加入缓冲液,充分研磨后,分成2部分分别提取DNA和RNA。提取试剂:TIANGEN(手工提取),凯杰(自动提取)。具体步骤参见试剂盒说明书。用PCR方法检测脾脏的斑点热群立克次体(spotted fever group rickettsiae,SFGR)[5]、莱姆病螺旋体(Borrelia burgdorferi[6]、嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum[7]、鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis,鼠疫菌)[8],用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肺组织的汉坦病毒(Hantavirus,HV)[9]

1.3.2 主要仪器和试剂

PCR扩增仪(Biometra Tprofessional),凝胶成像仪(Tsogen Proxima 16),全自动核酸提取仪(QIA CUBE),扩增试剂(ThermoFisher Scientitic),2× PCR Master(ThermoFisher Scientitic)。

1.3.3 引物序列

各病原体核酸检测引物序列见表 1

表 1 病原体核酸检测引物序列 Table 1 Primer sequences for nucleic acid detection of pathogens
1.3.4 进化树构建

利用MEGA 7.0软件,采用邻接法(neighbor-joining method,NJ法)。

2 结果 2.1 捕获鼠种类构成

在霍尔果斯口岸共布放鼠夹2 034夹,回收有效夹1 709夹,捕获啮齿动物9种142只,总捕获率8.31%(142/1 709)。经鉴定隶属于2科9种,含未定种1种。其中小林姬鼠(Apodemus sylvaticus)和大沙鼠(Rhombomys opimus)为优势鼠种,占比分别为28.17%和27.47%。性别比和成幼比:捕获的142只鼠类中,雌性61只,雌雄比为1∶1.33(61∶81),捕获幼鼠21只,成幼比为5.76∶1(121∶21)。见表 2

表 2 2020年新疆霍尔果斯口岸地区各鼠种捕获及携带蚤、蜱情况 Table 2 Species of rodents captured and fleas and ticks carried at Horgos port in Xinjiang, 2020
2.2 捕获鼠监测点分布

本次调查的6个监测点中,铁路口岸捕鼠数量最多,为55只,该区域鼠密度最高(30.56%),其次为70团18连区(16.28%),各区域以小林姬鼠和大沙鼠为优势种。不同监测点捕获鼠种群密度见表 3

表 3 2020年新疆霍尔果斯口岸地区不同监测点捕获鼠密度 Table 3 Rodent density at different monitoring sites at Horgos port in Xinjiang, 2020
2.3 捕获鼠体表寄生虫

本次调查捕获鼠类142只,共47只染有寄生虫,检出寄生虫共228只,总的寄生虫携带率为33.10%。大沙鼠感染蜱、蚤数量最多。见表 2

鼠类体表寄生蜱共4种25只,以全沟硬蜱(16只)最多,主要寄生于大沙鼠和小家鼠(Mus musculus),其他蜱类有边缘革蜱(Dermacentor marginatus)、短垫血蜱(Haemaphysalis erinaceituranica)、残缘璃眼蜱(Hyalomma detritum);寄生蚤共8种203匹,以臀突客蚤(Xenopsylla minax)为优势种,主要寄生于大沙鼠、子午沙鼠(Meriones meridianus)和柽柳沙鼠(M. tamariscinus)。见表 4

表 4 2020年新疆霍尔果斯口岸地区捕获鼠类体外寄生蚤种群数量、分布和构成 Table 4 Population size, distribution, and composition of parasitic fleas on the captured rodents at Horgos port in Xinjiang, 2020
2.4 病原体检测结果

对鼠的肺组织和脾脏组织进行病原体检测,结果检出嗜吞噬细胞无形体8株(其中大沙鼠7株、柽柳沙鼠1株),检出斑点热群立克次体1株(小林姬鼠)。8株嗜吞噬细胞无形体同源性一致,从中选择1株(大沙鼠)构建系统进化树如图 1所示,该嗜吞噬细胞无形体与西班牙鼠无形体型(APV)位于同一进化分支,亲缘关系较近;检出的1株斑点热群立克次体同我国新疆森林革蜱中发现的Rickettsia slovaca属于同一进化分支,同R. raoultii进化距离较远(图 23)。其他莱姆病螺旋体、鼠疫菌、汉坦病毒未检出。总检出率为6.34%(9/142)。

注:图中黄色背景字体菌株表示本研究中检测到的嗜吞噬细胞无形体。 图 1 2020年新疆霍尔果斯口岸地区嗜吞噬细胞无形体进化树 Figure 1 Phylogenetic tree of Anaplasma phagocytophilum at Horgos port in Xinjiang, 2020
注:图中黄色背景字体菌株表示本研究中检测到的斑点热群立克次体。 图 2 2020年新疆霍尔果斯口岸地区斑点热群立克次体进化树 Figure 2 Phylogenetic tree of spotted fever group rickettsiae at Horgos port in Xinjiang, 2020
图 3 2020年新疆霍尔果斯口岸地区斑点热群立克次体基因BALST比对 Figure 3 Nucleic acid BLAST results of spotted fever group rickettsiae genes at Horgos port in Xinjiang, 2020
3 讨论

口岸医学媒介生物监测与控制是口岸核心能力建设工作中一项非常重要的基础性工作[10]。新疆地区鼠患严重,且多次检出致病性微生物[3-4, 11]。近几年来,霍尔果斯口岸经营单位发动了大规模的灭鼠活动。为了解当地灭鼠工作效果,于2020年度对本地鼠类及其携带病原体的情况进行再次调查,并对鼠体表寄生蜱和蚤进行鉴定,掌握了新疆霍尔果斯口岸不同生境鼠种及体表寄生虫分布特点及其病原体携带情况,为口岸鼠类防治措施的制定提供了科学依据[12]

霍尔果斯口岸植被以荒漠和草原为主,是鼠类的主要栖息地。经调查,本地优势鼠种为小林姬鼠,大沙鼠次之,尚未发现新种或新纪录种,种属构成与2016年[3]文献报道略有差异,作者认为是本次调查点和生境类型与2016年不同,多了工作生活区类型的2个调查点,同时调查时间正值小林姬鼠的繁殖高峰期,鼠类外出觅食活动增加,导致小林姬鼠捕获数量最多。此次调查捕获到的优势种小林姬鼠主要是在70团18连区等工作生活区捕获,大沙鼠是在荒漠半荒漠地带捕获,与阿不都热曼·吐尔逊等[13]和郭宝平等[14]研究结果基本吻合。

本次调查的蜱类优势种为全沟硬蜱,其他蜱类有边缘革蜱、短垫血蜱、残缘璃眼蜱;蚤类优势种为臀突客蚤,其他蚤类有同形客蚤指名亚种、长吻角头蚤、秃病蚤尖突亚种、裂病蚤、距细蚤、思博新蚤、叶状切唇蚤突高亚种,体表寄生虫种类与宿主分布范围与贵有军等[15]对周边地区调查结果基本一致。本次调查发现在荒漠地区捕获的大沙鼠染蜱数量和染蚤数量较其他生境中捕获的鼠类寄生蜱、蚤更多,病原体检出率也较其他鼠种更高,其原因可作为今后的研究方向,重点调查该地区大沙鼠及其体表寄生虫分布的影响因素。

嗜吞噬细胞无形体主要通过蜱叮咬进而感染人体,对人体健康影响巨大。本次调查检出8株嗜吞噬细胞无形体阳性样本,感染率与王安东[16]的研究结果相比较低,比郭强等[3]2016年的调查结果增加明显。斑点热群立克次体在新疆、内蒙古等地多次被检出[17-19],虽然此次调查只检出1株斑点热群立克次体阳性,比2016年下降明显,但也存在风险隐患,相关部门应加强相关健康宣教和疾病防治,切实有效保障人群健康。

本调查结果鼠类密度为8.31%,参照国境口岸医学媒介生物控制标准(SN/T1415-2014/)中鼠夹法的控制指标,鼠密度高于该标准,应对鼠类防控多加关注,加大灭鼠力度,尽快降低鼠密度,对鼠类容易栖息的口岸货场、食堂、垃圾场等进一步加强鼠类卫生除害工作,严防境外鼠类及其携带病原体的输入,建立疫病疫情信息预警系统,保障口岸卫生安全。

本次调查获得了新疆霍尔果斯口岸地区鼠、蜱和蚤类的种群资料,还从鼠体表寄生蜱中检出嗜吞噬细胞无形体和斑点热群立克次体核酸阳性,提示当地可能存在这2种疾病的流行,结果对当地鼠、蜱、蚤及相关疾病防控有一定参考价值。

利益冲突  无

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