2022, Vol. 33扩展功能
文章信息
- 钟建跃, 王金娜, 杨辉, 曹国平, 吴瑜燕, 陈韦华, 余樟有, 方春福
- ZHONG Jian-yue, WANG Jin-na, YANG Hui, CAO Guo-ping, WU Yu-yan, CHEN Wei-hua, YU Zhang-you, FANG Chun-fu
- 浙江省衢州市农村地区2020－2021年小兽分布及其病原体携带情况调查
- An investigation of small mammal distribution and their infection with pathogens in rural areas of Quzhou, Zhejiang province, China
- 中国媒介生物学及控制杂志, 2022, 33(6): 805-808
- Chin J Vector Biol & Control, 2022, 33(6): 805-808
- 10.11853/j.issn.1003.8280.2022.06.007
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文章历史
- 收稿日期: 2022-06-30
2 浙江省疾病预防控制中心传染病预防控制所, 浙江 杭州 330051
2 Institute of Infectious Disease Prevention and Control, Zhejiang Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou, Zhejiang 330051, China
小兽种类繁多，分布广泛，是鼠疫（plague）、钩端螺旋体病（leptospirosis，钩体病）、肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS）等多种自然疫源性疾病的宿主[1]，严重危害人类健康。衢州市自20世纪60年代首次报告钩体病和HFRS以来，曾多次暴发流行，现已成为浙江省钩体病和HFRS等鼠传疾病的主要疫源地之一[2-6]。本研究通过对衢州市农村地区小兽开展监测，并对钩体、汉坦病毒（Hantavirus，HV）、发热伴血小板减少综合征病毒（Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus，SFTSV）、恙虫病东方体（Orientia tsutsugamushi，Ot）等4种常见鼠传疾病病原体进行检测，进一步掌握衢州市小兽分布及其病原体携带情况，为鼠传疾病防治措施的制定提供依据。
1 材料与方法 1.1 调查时间和现场生境选择选取衢州市柯城区石梁镇、九华乡和龙游县庙下乡为监测点，其中柯城区石梁镇和九华乡选择农田林地生境，龙游县庙下乡选择农村居民区和农田林地生境，于2020年9月－2021年7月期间逢单月开展监测。
1.2 标本采集采用夹夜法，用生花生米作诱饵，晚放晨收。逢单月布放鼠夹400夹，其中农村居民区布放100夹，农田林地布放300夹。农村居民区沿墙根布放，农田林地沿直线或田埂、沟渠等自然地形布放，每5 m布放1夹，行间距不少于50 m。对捕获小兽进行编号，记录其种类、性别、捕获地点等信息。现场无菌解剖取小兽肝、脾、肾和肺等内脏，带回衢州市疾病预防控制中心实验室-80 ℃冰箱保存待检。
1.3 病原体检测 1.3.1 试剂和仪器新型布尼亚病毒核酸检测试剂盒（荧光定量PCR法）、汉滩型病毒和汉城型病毒核酸检测试剂盒、钩体核酸检测试剂盒（荧光定量PCR法）及Ot核酸检测试剂盒均为广东省深圳市科源生物股份有限公司生产。Eppendorf 5425高速离心机，宁波新芝Scientz-48高通量组织破碎仪，BIORad扩增仪。
1.3.2 标本处理SFTSV选取小兽肝、肺、脾组织混合标本进行检测，钩体和Ot选取小兽肝、肾、脾组织混合标本进行检测，HV选取鼠肺组织标本进行检测。利用破碎仪将小兽内脏标本破碎后制成细胞悬液，按提取试剂盒说明书对标本进行RNA和DNA提取。-40 ℃保存，备用。
1.3.3 检测方法采用荧光定量PCR法检测SFTSV、Ot、钩体和HV核酸，检测方法及引物序列按照《全国病媒生物病原学监测方案（试行）》（中疾控传发〔2020〕13号）要求进行。阳性样本结果判定，SFTSV：循环数阈值（cycle threshold value，Ct值）≤37.5；Ot：Ct值≤36；钩体：Ct值≤36；HV：Ct值≤37。
1.4 统计学分析对小兽种类分布及其病原体携带情况采用SPSS 21.0软件进行统计分析，率的比较采用χ2检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 小兽种类构成与分布本次调查共布放有效夹2 487夹次，共捕获小兽210只，总捕获率为8.44%，其中黑线姬鼠（Apodemus agrarius）占61.91%（130/210），黄胸鼠（Rattus tanezumi）占15.24%（32/210），褐家鼠（R. norvegicus）占9.52%（20/210）。不同生境小兽种类构成不同，农村居民区以黄胸鼠为主（53.70%），其次为褐家鼠（29.63%）；农田林地以黑线姬鼠为主（79.49%），其次为北社鼠（Niviventer confucianus）（5.13%）和针毛鼠（N. fulvescens）（4.49%）。见表 1。
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捕获的210只小兽中，龙游县捕获107只（50.95%），柯城区捕获103只（49.05%）；农田林地156只（74.29%），农村居民区54只（25.71%）。3月（41只）、9月（37只）和11月（44只）是小兽活跃高峰，逢单月捕获小兽情况见图 1。
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| 图 1 2020－2021年浙江省衢州市农村地区不同生境小兽密度逐月分布 Figure 1 Monthly distribution of small mammal density in various habitats in rural areas of Quzhou, Zhejiang province, 2020-2021 |
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210份小兽内脏样本中，18份标本病原体核酸阳性，总阳性率为8.57%，其中，柯城区小兽内脏标本阳性率为10.68%（11/103），龙游县为6.54%（7/107），二者差异无统计学意义（χ2=1.146，P=0.284）。HV阳性率为6.19%（13/210），钩体阳性率为3.33%（7/210），SFTSV和Ot未检出，4种病原体阳性率差异有统计学意义（χ2=24.176，P < 0.001）。此外，柯城区石梁镇的2份黑线姬鼠标本中同时检出HV和钩体核酸阳性，混合感染率为0.95%（2/210）。
2.2.2 不同小兽种类病原体携带情况捕获的8种小兽中，仅在黑线姬鼠中检出HV核酸阳性，阳性率为10.00%（13/130）。在褐家鼠、黑线姬鼠、黄胸鼠中检出钩体核酸阳性，阳性率分别为5.00%（1/20）、3.85%（5/130）和3.13%（1/32），各鼠种间阳性率差异无统计学意义（χ2=0.114，P=0.945）。大足鼠（R. nitidus）、臭鼩（Suncus murinus）、北社鼠、小家鼠（Mus musculus）、针毛鼠内脏标本中均未检出4种病原体。
3 讨论衢州市地处浙江省西部，山地丘陵地貌，属亚热带湿润季风气候区，四季分明、温度适宜、物产丰富，适宜小兽生存。本次调查选取的龙游县、柯城区是衢州市主要的鼠传疾病自然疫源地。调查显示，衢州市农村地区小兽活跃高峰为3、9和11月，与浙江省情况基本一致[7]；黑线姬鼠、黄胸鼠和褐家鼠为衢州市农村地区优势种，农村居民区以黄胸鼠、褐家鼠为主，农田林地以黑线姬鼠、北社鼠和针毛鼠为主，与上海市、金华市等地区的监测结果类似[8-9]，但与温州市优势种为褐家鼠和臭鼩略有不同[10]，这可能与当地的气候、地理环境等因素有关。
本次调查采用荧光定量PCR检测方法，与血清学检测法相比，具有灵敏度高、操作简便、耗时短等优点。2个监测点均检测出HV及钩体核酸阳性，其中HV核酸阳性检出率最高，提示HFRS应当作为当地鼠传疾病防控的重点。此外还发现，HV及钩体2种病原体在黑线姬鼠体内存在混合感染现象，与浙江省台州市[11]、福建省三明市[12]研究类似，混合感染可增加病原体在人类感染的风险，对人体产生更为严重的影响。直接接触、间接接触和气溶胶传播是鼠传疾病主要传播途径，鼠传疾病人间流行强度与鼠种数量和病原体携带率密切相关[13]。衢州市小兽中HV核酸阳性率为6.19%，高于浙江省余姚市（4.84%）和华东邻近5省（3.50%）的报道[14-15]，可能与衢州市小兽HV阳性率高有关，也可能与检测方法不同有关，有待进一步深入研究。作为衢州市农村地区优势鼠种的黑线姬鼠，其HV携带率为10.00%，是衢州市HV的主要携带鼠种；而HV另一重要宿主褐家鼠中未检测出HV，与台州市的报道一致[11]。本次调查在褐家鼠、黑线姬鼠和黄胸鼠体内均检出钩体核酸阳性，总阳性率为3.33%，高于施旭光等[5]对浙江省小兽钩体感染的调查结果。龙游县作为衢州市钩体病的主要疫区，秋收时节是其发病高峰，以青壮年农民为主要发病人群[4]。在褐家鼠、黑线姬鼠和黄胸鼠等多种小兽标本中检出钩体，证实钩体病在衢州市农村地区小兽间的流行，虽然近几年衢州市钩体病散在发病，但该病暴发的风险仍然存在，需高度重视。蜱叮咬是发热伴血小板减少综合征（SFTS）的主要传播途径，包括中华硬蜱（Ixodes sinensis）、粒形硬蜱（I. granulatus）等多种蜱类寄生于小兽体表[16]，曹国平等[17]在衢州市城区公园蜱体内检出SFTSV，而本次调查未在小兽中检出SFTSV，可能与调查地点不同、样本量太小、样本运输保存及检测方法有关，小兽在SFTS传播链中作用需进一步研究和探讨。
本次调查证实黑线姬鼠、黄胸鼠和褐家鼠为衢州市农村地区优势种，在农田林地、居民区均可捕获，黑线姬鼠携带HV和钩体，黄胸鼠和褐家鼠携带钩体。当市民户外作业或郊游，尤其是农民秋收劳作时，有发生HFRS及钩体病的风险。应加强鼠传疾病防治知识宣传，开展爱国卫生运动降低小兽密度，有效降低鼠传疾病的感染风险。
利益冲突 无
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