流行性乙型脑炎（乙脑）是由乙脑病毒（JEV）引起、蚊媒传播的一种急性人兽共患传染病，人感染后引起中枢神经系统疾病，猪感染后主要表现为妊娠母猪流产、产死胎、公猪睾丸炎 ^[1]。乙脑病毒在猪-蚊-人之间存在一个基本的传播模式^[2]，乙脑病毒感染猪后在血中病毒血症期长，病毒载量较高，传染性强，是人感染乙脑的主要传染源^[3]，蚊虫[主要是三带喙库蚊（Culex tritaeniorhynchus）]作为传播媒介，人被携带乙脑病毒的蚊虫叮咬而感染。陇南市是甘肃省乙脑发病最高的地区^[4]，2008年将乙脑减毒活疫苗纳入常规免疫后乙脑发病逐年下降，但2017、2018年发生乙脑暴发疫情^[5]。本研究对陇南市健康人群和猪群开展乙脑病毒血清流行病学调查，以了解健康人群和猪中乙脑病毒IgG抗体水平，为乙脑防控提供实验室数据。

根据陇南市2015－2018年乙脑发病情况，选择发病率高的礼县和西和县，发病率低的武都区和徽县为监测点，采用整群分层抽样的方法在4县（区）各抽取3个行政村（社区），将未患过乙脑，1个月内未接种过乙脑疫苗的人员作为调查对象，选择0~、2~、5~、10~、15~、30~、45~和≥60岁共8个年龄组，每个年龄组随机抽取10人调查。

在采集健康人群血清的监测点采集猪血样，每个调查点随机抽取本年度出生的猪20头，不足可在调查点临近村补充。

每位监测对象采集静脉血3~5 ml，2~8 ℃静置8~24 h，离心半径13 cm，3 000~4 000 r/min离心10 min，分离血清置于塑料螺旋管中，每份不少于0.5 ml，并填写《健康人群血清流行病学监测调查问卷》，4 ℃冷藏运送至陇南市疾病预防控制中心（CDC）乙脑实验室检测，如不能立即检测，则-70 ℃保存，避免反复冻融。猪血样标本的采集由监测点所在县（区）动物CDC专业人员完成，每头猪采集静脉血3~5 ml，血清分离和运输方式与健康人群一致，由监测点所在县（区）CDC负责，并填写《猪血清标本采样送检登记表》。本研究涉及伦理问题经陇南市CDC伦理委员会审批通过。

人乙脑病毒IgG抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒由上海贝西生物科技有限公司生产，并在有效期内使用，乙脑病毒IgG抗体阳性、阴性判断标准：标本吸光度（A）值≥阴性对照A值的2.1倍时，判为阳性；标本A值< 阴性对照A值的2.1倍时，判为阴性。猪乙脑病毒IgG抗体ELISA诊断试剂盒由深圳芬德生物技术有限公司生产，猪乙脑病毒IgG抗体阳性、阴性判断标准：标本A值≥0.38时，判为阳性；标本A值< 0.38时，判为阴性。用样品稀释液将待检血清按40倍稀释，检测步骤严格按照试剂盒说明进行。

使用Excel 2013软件建立数据库，用SPSS 25.0软件进行统计学分析。使用χ²检验对健康人群和猪乙脑病毒IgG抗体阳性率进行比较，以P < 0.05为差异有统计学意义。

共检测888人，阳性809份，阳性率为91.10%。

调查对象男女性别比为1.08∶1，乙脑病毒IgG抗体阳性率分别是90.48%和91.78%，不同性别健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率差异无统计学意义（χ²=0.468，P=0.494）。见表 1。

表 1 甘肃省陇南市不同特征健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率 Table 1 Positive rates of anti-Japanese encephalitis virus IgG antibody among healthy people with different characteristics in Longnan, Gansu province

表选项

调查对象年龄中位数27岁（9月龄~89岁），不同年龄组乙脑病毒IgG抗体阳性率在86.13%~98.00%，其中2~4岁组阳性率最高，为98.00%，其次是0~1岁组（96.55%），再次是5~9岁组（94.12%），15~29岁组最低，为86.13%，各年龄组健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率总体呈下降趋势（χ_趋势²=5.683，P=0.017）。见表 1。

西和县、礼县、徽县、武都区乙脑病毒IgG抗体阳性率分别是92.75%、92.53%、89.67%、89.39%，各地区健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率差异无统计学意义（χ²=2.102，P=0.147）。见表 1。

调查的888人中，无免疫史者585人，有免疫史者297人，免疫史不详者6人，乙脑病毒IgG抗体阳性率分别为89.23%、94.61%和100%。有免疫史和无免疫史的健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=6.997，P=0.008）。见表 1。

共检测240份猪血清样本，阳性202份，阳性率为84.17%。

不同月龄猪乙脑病毒IgG抗体阳性率在74.73%~100%，其中4~5月龄以上猪阳性率为100%，其次是0~1月龄组（85.71%），2~3月龄组最低，为74.73%，不同月龄组猪乙脑病毒IgG抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=22.090，P < 0.001）。见表 2。

表 2 甘肃省陇南市不同月龄组和地区猪乙脑病毒IgG抗体阳性率 Table 2 Positive rates of anti-Japanese encephalitis virus IgG antibody among pigs in different age groups and from different areas in Longnan, Gansu province

表选项

礼县、西和县、徽县、武都区猪乙脑病毒IgG抗体阳性率分别是80.00%、86.67%、80.00%、90.00%，不同地区猪乙脑病毒IgG抗体阳性率差异无统计学意义（χ²=0.893，P=0.345）。见表 2。

调查的240头猪中，养殖场猪183头，散养猪57头，乙脑病毒IgG抗体阳性率分别为81.42%和92.98%，不同类型养殖场所猪乙脑病毒IgG抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=4.360，P=0.037）。

我国、日本学者开展的乙脑生态学研究证明，乙脑在人间流行前先在动物间流行，猪是乙脑病毒的主要增殖宿主和扩散宿主^[6-7]，健康人群乙脑病毒抗体水平主要受两个方面的影响：免疫接种和自然感染^[8]。健康人群乙脑免疫水平与乙脑疫情的风险密切相关，据文献报道，人群乙脑抗体水平在70%以上就不易发生乙脑流行，人群中传染病的IgG抗体阳性率达到85%以上意味着群体免疫屏障的形成^[9]。

2017－2018年陇南市乙脑高发，年平均发病率达4.09/10万，超过了历史发病水平，仅6－9月有病例报告^[5]，陇南市既往无其他黄病毒引起的登革热和森林脑炎病例报告，2019年陇南市武都区开展的蚊虫带病毒情况监测，检出了乙脑病毒，无西尼罗病毒（WNV）检出^[10]，本次乙脑病毒IgG抗体监测提示当地人群中乙脑病毒抗体阳性率较高。评价乙脑免疫效果最可靠的指标是病毒中和抗体的水平，而正常人群中乙脑病毒中和抗体主要以IgG抗体为主^[11]，本次调查于2018年10月23日－11月15日完成，结果显示，陇南市健康人群乙脑病毒IgG抗体阳性率为91.10%，高于2012－2014年肇庆市怀集县的监测结果（85.76%）^[12]，低于2014年天津市静海县乙脑流行季节后的检测结果（94.77%）^[13]，初步说明在自然感染和免疫接种双重作用下，陇南市乙脑群体免疫水平高。本次调查中不同年龄组健康人员乙脑病毒IgG抗体阳性率均高于85.00%，故推断近几年陇南市乙脑流行的风险相对较低，但由于人群中乙脑发病率下降、隐形感染的机会减少，加之随着时间推移，人群体内乙脑保护性抗体水平的衰减，出现乙脑暴发疫情的风险又将会随之增加。男性乙脑病毒IgG抗体的阳性率与女性基本一致，与其他学者的报道相同^[12]，表明不同性别人群乙脑免疫水平无差别。从年龄组看，不同年龄组人群乙脑病毒IgG抗体阳性率差异有统计学意义，总体随着年龄的增加，乙脑病毒IgG抗体阳性率呈下降趋势，与四川、贵州等地区的研究结果一致^{[9, 11]}。2~4岁年龄组乙脑病毒IgG抗体阳性率高于0~1岁组，这是由于乙脑减毒活疫苗免疫接种程序是在8月龄、18~24月龄完成2剂次疫苗接种，2岁组儿童完成了全程免疫，抗体水平高^[13]；45岁及以上年龄组抗体阳性率（91.02%）高于16~44岁组（87.00%），推测是因为2017－2018年陇南市45岁及以上年龄组乙脑报告病例数占病例总数的60.00%（129/215），而可能45岁及以上人群主要在当地从事农业生产，且个人防蚊意识淡薄，被带病毒蚊虫叮咬机会增多，人群隐性感染而获得免疫力的机会也增多，所以乙脑病毒IgG抗体阳性率相对较高。从地区分布来看，调查的4个县（区）乙脑病毒IgG抗体阳性率均高于85.00%，有免疫史和无免疫史人群乙脑抗体阳性率差异有统计学意义，说明接种乙脑减毒活疫苗后人群具有较好的免疫力^[14]。

宿主动物猪乙脑病毒IgG抗体阳性率达84.17%。从猪月龄来看，不同月龄猪乙脑病毒IgG抗体阳性率差异有统计学意义，4月龄及以上猪乙脑病毒IgG抗体阳性率为100%，高于0~3月龄猪的75.51%，有文献报道经过1个流行周期猪乙脑病毒感染率可达100%^[8]。陇南市乙脑主要传播媒介三带喙库蚊密度高峰在7月，乙脑发病高峰在8月，猪乙脑流行高峰早于人间乙脑1个月出现^[4]，本次调查在10月底至11月初开展，4月龄以上猪可能已经经历了一个流行高峰，故乙脑病毒IgG抗体阳性率高。0~1月龄猪乙脑病毒IgG抗体阳性率高于2~3月龄，可能与母体免疫和样本没有代表性有关。从地区分布看，各地猪乙脑病毒IgG抗体阳性率均在80%以上，差异无统计学意义，说明陇南市各县（区）猪乙脑感染的风险无差别。散养户猪乙脑病毒IgG抗体阳性率高于养殖场猪，差异有统计学意义，可能是由于相对于散养户来讲，养殖场规模化养殖，卫生条件好，管理规范，实施了防蚊措施，且地处偏僻，猪感染乙脑的风险相对较小。

乙脑流行监测的方法主要包括：①乙脑病例的监测；②蚊媒强度和带病毒情况监测；③人群乙脑病毒IgG抗体水平监测；④宿主动物（猪）抗体水平监测。既往开展的乙脑病例监测对疾病预防相对滞后，蚊媒监测受监测环境的影响不够稳定，而本研究对健康人群和猪乙脑病毒IgG抗体监测更能客观反映出陇南市乙脑感染发病的风险，对改进乙脑流行监测提供了新的思路和方法。建议定期开展健康人群和猪乙脑病毒抗体水平监测，动态掌握人群乙脑病毒抗体的消退速度和猪乙脑流行情况，预测乙脑流行趋势，及早采取防蚊灭蚊和疫苗接种等预防措施。

本文局限性：中和试验是检测中和抗体的金标准，但检测技术要求高，需要活病毒，在基层实验室难以完成，本次调查采用的ELISA虽操作简单，适合于基层开展疾病检测和流行病学调查的要求，但存在灵敏度和特异度不高的问题。本次调查使用上海贝西公司生产的试剂盒，其稳定性在周志军等^[15]的研究进行了评价，虽肇庆市等多地区健康人群乙脑抗体水平调查均在使用^[12]，然而，鉴于中和抗体具有较高的特异性，今后应进一步开展乙脑病毒中和抗体水平调查。

利益冲突  无