肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome，HFRS）又称流行性出血热，是一种自然疫源性疾病，由汉坦病毒（Hantavirus，HV）属的多型病毒所引起，以鼠类为主要传染源，是我国重点防控的乙类传染病之一^[1-4]。HFRS分布于五大洲，多达70个国家，以亚洲为主，其次是欧洲和非洲，病例数较少的是美洲^{[1, 5-6]}。HFRS在我国流行范围广，病情严重，病死率较高^[5]。我国是世界上HFRS发病数最多的国家，发病数占世界报道的90%以上，到2010年底，报告的HFRS病例已涉及大陆地区31个省（自治区、直辖市）^{[4-5, 7-8]}。HFRS在我国的流行趋势是老疫区报告的发病数逐渐减少，同时新疫区报告的发病数不断增加^[1]。HFRS通过多种方式传播，主要通过呼吸道、消化道和接触传播等^{[1, 3, 9]}。HFRS在人群中普遍易感，在流行地区隐性感染率较高，可达到4%左右^{[1, 6]}。HFRS的高发人群主要是农村青壮年，这不仅危害人民身体健康和生命安全，还影响社会经济发展^[7]。HFRS疫情防控依然是我国一个重要的公共卫生问题。因此，我们对内蒙古自治区（内蒙古）近5年HFRS流行病学特征及宿主动物监测结果进行分析，为建立有效的、针对性的预防策略和措施提供依据。

1 材料与方法 1.1 资料来源 1.1.1 HFRS疫情数据

数据来自中国疾病预防控制信息系统，即由各级各类医疗机构和疾病控制机构通过传染病监测系统报告的内蒙古地区常驻居民2016年1月－2020年12月HFRS的监测数据以及流行病学调查资料。

1.1.2 人口数据

人口学资料来自内蒙古统计局，主要包括内蒙古各盟（市）及呼伦贝尔市各县（区）2016－2020年常驻人口数据。

1.2 人群HFRS隐性感染监测 1.2.1 标本来源

2016－2020年春季和秋季巴彦淖尔市疾病预防控制中心（CDC）工作人员采集16~70岁高危人群血清样本（均签署知情同意书）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人群血清IgG抗体。

1.2.2 试验材料

① 纯化的重组汉坦病毒核蛋白抗原预包被酶标板；②辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体；③缓冲液包括：pH值9.6的碳酸缓冲液作为包被液，pH值7.4磷酸盐缓冲液（PBS，含5%脱脂奶）稀释液，pH值7.4的0.05%吐温-20洗涤液；④TMB显色液为A/B 2种；⑤4 N H₂SO₄终止液；⑥酶标板、酶标仪。

1.2.3 检测步骤

① 将待检血清用稀释液从1∶100开始做2倍连续稀释，加入抗原孔，100 μl/孔，同时设阴性、阳性对照，37 ℃水浴1 h；②弃去血清，用洗涤液洗涤6次；③加酶结合物，用稀释液按工作浓度稀释，100 μl/孔，37 ℃水浴1 h；④弃去酶标抗体，用洗涤液洗涤6次，甩干；⑤于各反应孔内加A/B液各1滴，37 ℃，避光3~5 min；⑥加终止液于每反应孔，1滴/孔。

1.2.4 结果判断

于450 nm（TMB）阳性对照孔吸光度（A）值/阴性对照孔A值，即P/N≥2.1，对照成立；若待检血清孔A值/阴性对照孔A值≥2.1，则标本为HFRS IgG抗体阳性，反之为阴性（阴性对照孔A值< 0.05按0.05记，若 > 0.05按实际数值计算）。

1.3 HFRS宿主动物监测 1.3.1 标本来源

2016－2020年春季和秋季由呼伦贝尔市莫力达瓦达斡尔族自治旗（莫旗）和巴彦淖尔市CDC工作人员在居民区和野外布放鼠夹，对捕获鼠进行无菌解剖，取肺组织，于液氮罐中保存。采用实时荧光反转录聚合酶链式反应（real time RT-PCR）开展鼠肺汉坦病毒核酸检测。

1.3.2 主要试剂及仪器

配制各种液体的化学试剂均为分析纯或分子生物学纯级。RNA提取试剂盒为QIAGEN RNeasy MiniKit，real time RT-PCR试剂盒为Invitrogen的SuperScript^® III One-step RT-PCR System with Platinum^®Taq High Fidelity，RT-PCR用的试剂盒为QIAGen One-step RT-PCR Kit。PCR仪为赛默飞公司ABI 7500fast型和美国伯乐公司PTC-200型。

1.3.3 RNA提取

切取冷冻的鼠肺30 mg，放于盛有液氮的研钵中，迅速将其粉碎，用600 μl含有1%巯基乙醇的裂解液进行冲洗，将冲洗液转入1.5 ml离心管中，离心半径13.5 cm、4 000 r/min离心5 min，取上清液，之后按QIAGEN RNeasy Mini Kit的步骤提取病毒RNA。

1.3.4 引物设计与合成

Real time RT-PCR引物序列由中国CDC病毒病预防控制所出血热室提供，序列见表 1。上述引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。

1.3.5 各指数计算 1.3.6 Real time RT-PCR检测汉坦病毒

使用SuperScriptⅢOne-Step RT-PCR System与real time RT-PCR引物，按步骤进行操作。

1.4 资料整理与统计学分析

运用Excel 2016软件进行数据整理，并对发病率、构成比等相关指标进行计算。用SPSS 22.0软件进行秩和检验、直线相关、回归分析和聚类分析，采用描述性流行病学方法，描述HFRS的时间、人群、空间分布特征。P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果 2.1 流行病学特征分析 2.1.1 内蒙古地区HFRS总体概况

2016－2020年除乌海市、巴彦淖尔市、阿拉善盟外，全区共有9个盟（市）累计报告HFRS病例572例，死亡5例。2016－2020年全区HFRS发病率为0.45/10万（表 2），死亡率为3.96×10^-3/10万。

2016－2020年全区发病率5年均居于前2位的是呼伦贝尔市和兴安盟。呼伦贝尔市累计报告HFRS病例387例，占总病例数的67.66%；发病率为3.06/10万。兴安盟累计报告HFRS病例78例，占13.64%；发病率为0.97/10万。

2.1.2 时间分布

2016－2020年内蒙古地区HFRS发病率在0.22/10万~0.66/10万。与2016年HFRS的发病率比较，2017年的发病率下降至0.37/10万；而2018和2019年HFRS发病率均呈现连续上升趋势，2019年发病率最高，为0.66/10万；2020年发病率降低且达到近5年的最低水平（0.22/10万）。

2016－2020年内蒙古地区HFRS发病呈秋冬季单峰分布，全年均有病例发生。采用SPSS 22.0软件对各月HFRS发病例数进行聚类分析，若聚为3类，则11月为一类，10和12月为一类，1－9月为一类。11月为HFRS高发期，2016－2020年累计报告病例106例，占总病例数的18.53%；其次为10和12月，累计报告136例，占23.78%；HFRS病例主要集中在秋冬季，呈单峰分布。见图 1、2。

2.1.3 人群分布

2016－2020年内蒙古地区HFRS发病以农民为主，占总病例数的62.24%。其次是家务及待业人员，占15.38%。

2016－2020年内蒙古地区报告的HFRS病例以青壮年男性为主，发病者年龄多集中在25~54岁之间，男女发病趋势一致，占全部发病例数的64.51%。其中以50~54岁年龄组发病例数最多，占全部发病例数的15.73%。各年龄组男性发病者数量均多于女性，男女性别比为3.43∶1。见图 3。

2.1.4 地区分布

2016－2020年内蒙古地区HFRS疫情分布具有高度散发又相对集中的特点。全区共有9个盟（市）报告HFRS病例，各盟（市）发病率差异有统计学意义（P < 0.001），其中呼伦贝尔市发病率高于呼和浩特和包头市（P=0.011，P=0.002），呼伦贝尔市和兴安盟发病率均高于鄂尔多斯市（P=0.001，P=0.012）。疫情仍主要集中在东北部地区，由内蒙古东北部向西南部逐渐递减。其中近5年均有病例发生的盟（市）有呼伦贝尔市、兴安盟、通辽市、赤峰市、乌兰察布市和呼和浩特市，累计发病数依次分别为387、78、33、31、20和8例，以呼伦贝尔市的发病率最高，近5年发病率为3.06/10万；鄂尔多斯市仅于2018年报告HFRS病例3例；乌海市、巴彦淖尔市、阿拉善盟这5年均无HFRS病例报告。见表 2。

2016－2020年呼伦贝尔市大部分旗（区、市）均有HFRS病例报告，9个旗（区、市）累计报告HFRS病例387例。各旗（区、市）HFRS发病率差异有统计学意义（P < 0.001），其中莫旗和鄂伦春自治旗（鄂旗）发病率均高于根河市、鄂温克族自治旗和额尔古纳市（P < 0.05）。病例分布具有明显的地区性，主要集中在位于东北部的鄂旗、莫旗、阿荣旗和扎兰屯市。尤其是莫旗和鄂旗的HFRS病例数较多，分别为170和126例，占2016－2020年呼伦贝尔市总病例数的76.49%，发病率分别为12.30/10万和11.87/10万。鄂温克族自治旗、额尔古纳市、根河市偶有病例发生；前两旗（市）在2016年分别报告HFRS病例1例，根河市于2020年报告HFRS病例1例。陈巴尔虎旗、新巴尔虎左旗、新巴尔虎右旗近5年均无HFRS病例出现。见表 3。

2.2 HFRS监测结果分析 2.2.1 国家级监测点HFRS疫情概况

内蒙古地区共2个国家级监测点。2016－2020年巴彦淖尔市5年均无HFRS病例发生；莫旗共报告HFRS病例170例，占全区报告病例数的29.72%。莫旗5年中2018年发病率最高，为20.30/10万，2017年发病率最低，为6.92/10万。

2.2.2 人群HFRS隐性感染监测

2016－2020年巴彦淖尔市监测点对健康人群HFRS隐性感染状况进行调查，阳性率平均为6.06%，阳性率从2016年的15.93%逐年降低至2020年的2.00%（表 4）。其中2017－2020年人群HFRS隐性感染率呈线性趋势关系（F=26.208，r=-0.964，P=0.036）。

2.2.3 HFRS宿主动物监测

2016－2020年莫旗和巴彦淖尔市的平均鼠密度分别为18.84%和8.68%（表 5、6）。莫旗的鼠密度高于巴彦淖尔市（t=7.174，P < 0.001）。2016－2020年莫旗秋季鼠密度高于春季（Z=-7.226，P < 0.001）。

经鼠肺汉坦病毒核酸检测，2016－2020年莫旗鼠带病毒率为10.34%，其中仅2019年秋季鼠肺为阴性，其余年份春季和秋季鼠带病毒率在6.00%~15.45%；2016－2020年巴彦淖尔鼠肺仅于2017年春季检出阳性1份，鼠带病毒率为0.87%，其余年份春季和秋季鼠肺汉坦病毒核酸检测结果均为阴性。见表 5、6。

2016－2020年莫旗人群发病率、鼠密度、鼠带病毒率变化趋势如表 7所示。对发病率、鼠密度、鼠带病毒率进行正态性检验，结果均呈正态分布。经假设检验，发病率与鼠密度和鼠带病毒率均无线性相关关系（P=0.856，P=0.524）。

3 讨论

2016－2020年内蒙古共有9个盟（市）报告HFRS病例，与2011－2015年比较发病例数和死亡例数分别下降了10.20%和28.57%，平均发病率下降了11.76%^[10]。这5年HFRS疫情较2011－2015年有所缓解。在每年春季和秋季鼠活跃高峰期CDC人员深入重点地区莫旗和巴彦淖尔市开展防控HFRS的宣传教育活动和相关的行为干预工作，并根据监测结果适时对重点人群开展HFRS疫苗接种，有效的预防控制策略和措施对疫情的防控具有重大意义。

2016－2020年内蒙古地区HFRS发病呈秋冬季单峰分布，11月为发病高峰期。内蒙古大部分地区处于中温带地区，这与此前研究表明中温带地区HFRS发病秋季高峰明显相一致^[11]。内蒙古地区发病率最高的呼伦贝尔市是以姬鼠型为主的混合型疫源地，发病呈明显的秋冬季单峰分布^[12]。与我国HFRS发病疫源地类型不同，其季节分布的模式和变化也会有所不同的观点相一致^{[4, 13-14]}。

2016－2020年内蒙古HFRS发病数职业构成仍以农民为主。2005－2010、2013和2014年全国报告HFRS病例的职业分布构成农民占全部病例的比例均为最大，在67.60%~71.19%^{[4, 13-14]}。内蒙古地区HFRS的职业分布与全国一致，农民仍是HFRS的高危人群，主要与农民的职业特点有关，经常在野外从事劳动，其次居住条件和生活环境卫生较差，直接或间接接触感染鼠的血液、唾液及排泄物的机会较大。应加强对该人群HFRS疫情的防控和相关预防策略和措施的制定。

2016－2020年内蒙古地区HFRS疫情分布具有高度散发又相对集中的特点。全区共有9个盟（市）报告HFRS病例，疫情仍主要集中在东部地区，发病率最高的是呼伦贝尔市。该市的莫旗和鄂旗HFRS疫情最为严重，与2009－2013年报告的发病率相比，莫旗上升了21.66%，鄂旗发病率下降了3.10%^[15]。近20年呼伦贝尔市HFRS的发病率仍居首位，该地区疫情防控仍然值得重视^{[10, 16]}。HFRS在内蒙古地区流行范围较大。在1955年，全区仅有呼伦贝尔市报告HFRS疫情，但至今除乌海市和阿拉善盟外全区累计已有10个盟（市）报告HFRS病例^[16-17]。

2016－2020年巴彦淖尔市无HFRS病例报告。健康人群隐性感染率与2000－2005年比较降低了38.28%^[18]。自1999年巴彦淖尔市报告首例HFRS病例，该地区HFRS发病率在十几年内呈逐渐上升趋势，发病率在2005年达到最高峰^[18]；2001－2010年成为内蒙古地区第二大HFRS流行地区，而2011－2015年HFRS病例数开始降低^{[10, 16]}。与此同时，2001年内蒙古开始实施在HFRS高发地区进行疫苗预防接种，并于2008年全区实施扩大国家免疫规划，对重点盟（市）的高发旗（县）的高危人群进行双价HFRS纯化疫苗的预防接种^[16]。该地区HFRS疫情防疫成功与在高危人群中开展预防接种等其他有效的防控策略和措施密切相关。2016－2020年，莫旗发病率仍然居于呼伦贝尔市的首位。自从1955年呼伦贝尔市报告首例HFRS病例以来，莫旗的HFRS报告病例数始终居于呼伦贝尔市的前2位^{[12, 19-20]}。今后该地区HFRS疫情仍应被高度重视，并且应该对重点地区的高危人群采取有效的、针对性的预防控制措施。

2016－2020年莫旗的平均鼠密度为18.84%，高于2009－2013年的平均水平^[15]。该地区鼠间疫情不容乐观，鼠间疫情的居高不下，对人间HFRS疫情的影响较大。应积极开展爱国卫生运动，有针对性的开展春秋季灭鼠工作，人间HFRS的流行即可得到有效控制。

利益冲突  无