发热伴血小板减少综合征（severe fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS）病人是在2007年5月河南省首次发现，类似的病例分别在山东、江苏、湖北、辽宁出现^{[1 – 2]}，临床表现为发热、腹痛、恶心、呕吐、胃肠出血、转氨酶升高等症状，该疾病的初始病死率30 %左右。SFTS的病原体即SFTS病毒（severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus，SFTSV）是布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新病毒^[1]，最有可能的传播媒介是蜱虫。据公开研究表明，SFTS在丘陵和山区居民发生率较高。SFTS已被确认在中国东部16个省份发病，韩国和日本也有病例报道^{[3 – 4]}。该病的发病率在辽宁非常高，尤其是生活在丘陵和山区的大连，丹东等地居民^{[5 – 7]}。辽宁省大连市普兰店区2014年发现7例SFTS确诊病例，2015年发现1例，2016年发现2例，2017年发现5例，本研究调查了普兰店地区家养动物的SFTSV血清抗体阳性率，来确定SFTSV潜在的宿主动物和动物的感染状况。

确定有SFTS病例报道的同益乡和乐甲乡为本次调查研究地点，因为在2个地方病例报告较多且较早出现SFTS的确诊死亡病例，其中1例为大连市首例新布尼亚病毒感染确诊病例，乐甲乡在2014年发生1起聚集性的SFTS病例。将这2个乡镇SFTS患者居住地周边居民饲养的家养动物作为调查对象，包括牛、羊、狗和鸡这4种家养动物。

动物血液样本收集时间自2017年7月开始。在调查工作之前，设计了调查问卷，向参与调查的农民获得饲养动物的有关信息。受调查的家养动物除部分狗之外，绝大多数为散养状态。每个动物采血5毫升。将所有的血样品离心，分离到的的血清保存在 – 80 ℃冰箱中。

动物血清用双抗原夹心法（double antigen sandwich）测定SFTSV抗体，试剂由上海双赢生物科技有限公司提供。实验步骤：加标准品连续等倍稀释5孔和样本稀释血清50 μl（样本稀释度1:4）到每个反应孔中，用封板膜封板后置37 ℃水浴中孵育30分钟。洗板5次，除了空白孔外，于各孔内加入HRP标记抗原试剂50 μl，置37 ℃水浴中孵育30分钟。洗板5次，加入显色剂A、B液各50 μl，轻拍混匀后置37 ℃水浴中孵育10分钟。后加终止液50 μl，轻柔震荡10秒混匀。酶标仪在450纳米阅读光密度值（optical density，OD）。通过标准曲线计算样品中新布尼亚病毒抗体IgG的浓度。

调查数据通过EPI 2003系统建立数据库，利用SAS 9.21软件进行分析。采用 χ²检验进行单因素分析，P < 0.05具有统计学意义。

收集于普兰店地区的346份家养动物血液样本183份ELISA检测SFTSV抗体阳性，阳性率为52.89 %。羊、牛、狗、鸡的SFTSV抗体阳性率分别为85.23 %（75/88），64.63 %（53/82），21.59 %（19/88）和40.91 %（36/88），这些动物血清阳性率存在明显差异（卡方检验（χ²）= 81.14；P < 0.01）。

乐甲乡家养动物SFTSV抗体阳性率（56.67 %，102/180）比同益乡（48.80 % ，81/166；）较高。在被调查地区的动物中，乐甲乡羊的SFTSV抗体阳性率明显高于同益乡（χ² = 15.00，P < 0.01），而同益乡的狗的SFTSV抗体阳性率明显高于乐甲乡（ χ² = 11.92，P < 0.01），其余家养动物抗体水平差异无统计学意义。

表 1

表 1 普兰店地区不同乡镇的动物SFTSV血清阳性率 动物 同益乡 乐甲乡 χ2值 P值 检测数 阳性数 阳性率 % 检测数 阳性数 阳性率 % 狗 48 17 35.42 % 40 2 5.00 % 11.923 5 < 0.01 鸡 38 12 31.58 % 50 24 48.00 % 2.408 4 > 0.05 羊 38 26 68.42 % 50 49 98.00 % 15.003 7 < 0.01 牛 42 26 61.90 % 40 27 67.50 % 0.280 6 > 0.05 总计 166 81 48.80 % 180 102 56.67 % 2.147 5 > 0.05

表 1 普兰店地区不同乡镇的动物SFTSV血清阳性率

不同的动物血清SFTSV抗体水平随着年龄增长而不同。狗在6 — 12月龄时SFTSV抗体阳性率SFTSV抗体阳性率最高，阳性率为41.67 %（5/12），1 — 2岁和2 — 3岁的SFTSV抗体阳性率分别为27.78 %（10/36）和10.81 %（4/37），不同月龄的狗SFTSV抗体阳性率存在明显差异（χ² = 6.03，P < 0.05）；鸡在 < 6月龄时SFTSV抗体阳性率最高，阳性率为51.35 %（19/37），1 — 2岁和2 — 3岁的SFTSV抗体阳性率分别为31.03 %（9/29）和38.46 %（5/13）；羊在1 — 2岁时SFTSV抗体阳性率最高，阳性率为93.33 %（42/45），6 — 12月龄的SFTSV抗体阳性率分别为75 %（30/40），不同月龄的羊SFTSV抗体阳性率存在明显差异（ χ² = 5.49，P < 0.05）；牛在2 — 3岁时SFTSV抗体阳性率最高，阳性率为75 %（21/28），1 — 2岁和3岁以上的牛SFTSV抗体阳性率分别为47.62 %（10/21）和69.23 %（18/26）。

在调查地区的家养动物中，雌性与雄性家养动物的SFTSV抗体阳性率无明显差异。

表 2

表 2 不同性别动物的SFTSV血清阳性率 动物 雄性 雌性 检测数 阳性数 阳性率 % 检测数 阳性数 阳性率 % 狗 56 13 23.21 % 32 6 18.75 % 鸡 41 19 46.34 % 47 17 36.17 % 羊 47 40 85.11 % 41 35 85.37 % 牛 12 5 41.67 % 70 48 68.57 % 总计 156 77 49.36 % 190 106 55.79 %

表 2 不同性别动物的SFTSV血清阳性率

尽管目前SFTSV的传播途径和动物宿主仍不清楚，但蜱虫的可能性较大^[8]。在对1例SFTSV感染病人的流行病学调查中发现，周边饲养的牛、羊、狗和鸡等家养动物身上存在大量蜱虫。调查期间收集了牛、狗、羊、鸡的血样，通过双抗原夹心ELISA方法检测这些动物的SFTSV抗体血清阳性率，结果表明，SFTSV感染的发生率与动物生活方式是相关的。自由放养的生活方式的羊、牛和鸡的感染率高，同多数处于拴养状态的狗相比，受蜱虫叮咬的风险大一些。目前我国不同省份的羊、牛、狗和鸡血清SFTSV抗体阳性情况的研究，表明在所有的动物物种中羊的SFTSV血清反应阳性率最高^[9]。这些研究表明，国内SFTSV动物中间宿主可能会扩大。丁等^[10]最近报道通过ELISA方法检测了山东省莱州市家养动物SFTSV血清阳性率，在部分调查结果中取得了较为一致的结论。该报道还检测了猪的血清，未发现阳性标本，这可能与猪被圈养而避免了蜱虫叮咬有关，蜱虫叮咬应该是新布尼亚病毒的重要传播方式。本研究详细分析了普兰店地区SFTSV抗体流行分布、季节性流行和不同的动物以及性别分布情况。本调查家养动物的总体血清阳性率为52.89 %，同江苏省报道的47.7 %的血清阳性率较为接近^[8]，表明我国的新布尼亚病毒的流行区域广大。乐甲乡的SFTSV阳性率为56.67 %，略高于同益乡（48.80 %），截止2017年，同益乡有3例SFTSV病例（发病率，13.63/100 000），乐甲乡有5例报告（发病率，23.28/100 000）。因此，SFTSV病例的数量和动物SFTSV血清阳性率在2个地区有积极的相关性。研究进一步明确了SFTSV的动物宿主。以上研究认为，SFTSV的控制和预防策略应考虑改善家养动物的饲养环境，使用化学药品杀灭蜱虫来控制蜱虫的数量。