寨卡病毒于1947年首次在乌干达发现^[1]，1952年，乌干达及塔桑尼亚发现人感染寨卡病毒^[2]，随后仅有该病的零星报告，直至2007年，位于南太平洋地区密克罗尼亚联邦雅浦岛发生寨卡病毒暴发流行^[3]，2013年法属波利尼西亚发生寨卡病毒暴发^[4]，2014年以来，美洲多个国家相继发生寨卡病毒感染病例流行，欧洲、亚洲、大洋洲等国也有输入病例报告。2016年2月初我国报告首例寨卡病毒病输入病例，2月下旬开始，广东省江门市也陆续报告多例寨卡病毒病输入病例。在寨卡病毒疫情防控过程中，对寨卡病毒感染者的血液、尿液和唾液样品进行跟踪检测。本研究于2016年2－4月采集寨卡病毒感染者生物样品检测病毒核酸，现将结果报告如下。

按照《寨卡病毒病诊疗方案(2016年第2版)》^[5]中的寨卡病毒病确诊病例和隐性感染者的病例定义，调查2016年2－4月在广东省江门市出现的寨卡病毒病确诊病例和隐性感染者。

对2016年2月1日－4月30日在广东省江门市恩平发生的寨卡病毒病确诊病例和隐性感染者进行流行病学调查；每天采集病例和隐性感染者的血液5 mL、尿液20 mL和唾液标本1 mL，直至病毒核酸检测结果为阴性。

按照《寨卡病毒病诊疗方案(2016年第2版)》^[5]中附件《寨卡病毒实验室检测技术方案》开展寨卡病毒核酸检测，采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real time reverse transcription-polymerase chain reaction，qRT-PCR)方法检测血液、尿液和唾液3种生物样品。检测试剂厂家是中山大学达安基因股份有限公司。

自一种生物样品首次寨卡病毒核酸检出阳性计为首日阳性，至最后一次检测阳性为止，这段时间为此种生物样品核酸阳性持续时间，且最后一次检出阳性之后的连续两天或多天的核酸检测结果均为阴性。同一感染者血液、尿液和唾液3种生物样品至少1种生物样品首日寨卡病毒核酸检测阳性，而其余某种生物样品在首日检测阴性，次日或连续多日仍为阴性，判定此种生物样品核酸结果为阴性，核酸阳性持续时间为0 d。感染者某种生物样品有检出核酸阳性结果，但之后无连续至少2 d的阴性结果，判定为无连续检测。

采用Excel 2007和SPSS 17.0软件统计分析数据。数据比较采用完全随机设计多样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis H检验)，两两比较采用扩展t检验法，P＜0.05为差异有统计学意义。

表 1

表 1 13例寨卡病毒感染者流行特征 感染者序号 性别 年龄(岁) 职业 发病时间(年-月-日) 国内居住地点 1 男性 5 散居儿童 2016-02-24 市区 2 男性 20 商业服务 2016-02-24 农村 3 女性 7 散居儿童 2016-02-26 市区 4 女性 37 商业服务 2016-02-26a 市区 5 男性 39 商业服务 2016-02-28 市区 6 女性 6 散居儿童 2016-03-04 农村 7 男性 46 商业服务 2016-03-04 农村 8 男性 18 商业服务 2016-03-06 农村 9 男性 43 商业服务 2016-03-10a 农村 10 女性 11 学生 2016-03-23 农村 11 女性 12 学生 2016-03-28 农村 12 女性 7 散居儿童 2016-04-04 市区 13 女性 32 商业服务 2016-04-08a 市区 注：a代表隐性感染者，时间为首次检出核酸阳性日期。

表 1 13例寨卡病毒感染者流行特征

2016年2－4月广东省江门市共确诊10例寨卡病毒病病例和发现3例寨卡病毒隐性感染者。13例感染者中，2月报告5例，3月6例，4月2例；4月9日至截稿时，无新发病例和感染者报告。13例感染者均为江门市的县级市恩平市报告，且均自委内瑞拉回国，在国内的现住址中有6例居住在市区，7例居住在农村。13例感染者中，男性6例，女性7例；最小年龄5岁，最大年龄46岁，中位数是19岁，≤14岁儿童占46.15%(6/13)。53.85%(7/13)为商业服务，30.77% (4/13)为散居儿童，15.38%(2/13)为学生。

在13例感染者中，对13例感染者的血液样品，10例感染者的尿液样品，12例感染者的唾液样品追踪至核酸阴性为止；其中有9例感染者的血液、尿液和唾液3种生物样品均追踪检测至阴性为止。

表 2

表 2 寨卡病毒感染者病毒核酸阳性持续时间情况 感染者序号 血液(d) 尿液(d) 唾液(d) 1 1 6 6 2 0 5 4 3 0 32 5 4a 4 11 7 5 4 20 10 6 0 2 3 7 1 12 6 8 1 3 - 9a 0 - 0 10 0 3 0 11 2 - 2 12 0 3 3 13a 0 - 0 注：a代表隐性感染者；－代表无连续检测；核酸结果阴性标记为0 d。

表 2 寨卡病毒感染者病毒核酸阳性持续时间情况

寨卡病毒病感染者生物样品病毒核酸阳性持续时间为：血液最短0 d，最长4 d，中位数0 d；≤1 d有10例，占76.92%(10/13)；2~4 d有3例，占23.18%(3/13)。尿液最短2 d，最长32 d，中位数5.5 d；0~4 d 4例，占40.00%(4/10)；5~9 d、10~14 d、≥20 d各有2例，均占20.00%(2/10)。唾液最短0 d，最长10 d，中位数3.5 d；0~4 d 7例，占58.33%(7/12)；5~9 d 4例，占33.33%(4/12)；10~14 d 1例，占8.33%(1/12)。经检验，3组生物样品病毒核酸阳性持续时间长短不一，差异有统计学意义(H_C=13.80，P＜0.01)；尿液样品比血液样品病毒核酸阳性持续时间长，差异有统计学意义(t=4.54，P＜0.01)；唾液样品比血液样品病毒核酸阳性持续时间长，差异有统计学意义(t=2.81，P＜0.05)；尿液样品与唾液样品的病毒核酸阳性持续时间相比，差异无统计学意义(t=1.83，P＞0.05)。

13例感染者中，血液样品检出寨卡病毒核酸阳性有6例，占46.15%(6/13)；尿液样品有13例，占100.00%(13/13)；唾液样品有9例，占69.23%(9/13)。3例隐性感染者中，其中1例的血液、尿液和唾液样品中均检出寨卡病毒核酸阳性；另2例仅尿液样品检出寨卡病毒核酸阳性。

表 3

表 3 寨卡病毒核酸阳性首次检出时间与发病时间间隔情况 病例序号 血液(d) 尿液(d) 唾液(d) 1 2 2 2 2 － 3 3 3 － 0 0 4 -2 -2 -2 5 － 1 1 6 1 1 1 7 3 3 3 8 6 6 － 9 － 1 － 10 － 2 2 注：-代表该种生物样品寨卡病毒核酸阴性；首次检出时间与发病时间为同一天，时间间隔记为0 d。

表 3 寨卡病毒核酸阳性首次检出时间与发病时间间隔情况

病例血液、尿液和唾液3种生物样品首次寨卡病毒核酸检出阳性时间与发病时间间隔，血液和尿液均为：最早发病前2 d，最迟发病后6 d；血液中位数是发病后2 d，尿液中位数是发病后1.5 d；唾液最早发病前2 d，最迟发病后3 d；中位数是发病后1.5 d。10例病例中，有4例病例的血液、尿液和唾液3种生物样品首次寨卡病毒核酸检测均为阳性，其发病时间距离检出时间间隔是：1例在发病前2 d检出，另3例分别是发病后1、2和3 d检出。

1例39岁的男性病例，在出现症状前2 d血液、尿液和唾液样品均检出寨卡病毒核酸阳性；1例12岁的女性病例，仅尿液样品检出寨卡病毒核酸阳性；1例37岁的女性隐性感染者，血液、尿液和唾液样品均检出寨卡病毒核酸阳性，直至上述3种生物样品寨卡病毒核酸转阴性，未出现临床症状。

世界卫生组织统计显示，2007年1月1日－2016年3月3日，52个国家和地区已经相继确认了寨卡病毒在当地传播^[6]，大部分病例集中于美洲地区，包括巴西、哥伦比亚、委内瑞拉、墨西哥、海地以及巴巴多斯^[7]。2016年2－4月江门市报告的13例寨卡病毒感染者均是从寨卡病毒病疫区委内瑞拉回国的华侨。因此，现阶段江门市寨卡病毒病防控主要措施是防止输入病例和早期发现输入病例。另外随着气温升高和雨水增多，江门市白纹伊蚊密度增高，加强防蚊、灭蚊、消灭蚊虫孳生地等预防控制措施，防范出现本地病例的发生和流行。有文献报道寨卡病毒感染者中80%为亚临床感染^[8]，本次研究中，13例感染者有3例为隐性感染者，隐性感染比例为23.07%，证实隐性感染的存在，另外此3例隐性感染者均为年龄>30岁的成年人，未见有＜20岁儿童青少年隐性感染情况。由于本次研究个案数较少，因此其隐性感染率与文献报告的数据有较大差别。本研究有1例隐性感染者的血液样品检出寨卡病毒核酸阳性，且自首日检出阳性后，连续4d阳性，显示隐性感染者作为传染源可能通过伊蚊传播^[9]或血液传播^[10-12]。卢桂阳等^[13]认为：Zika病毒隐性感染者数量众多，难以识别，且活动不受限制，在Zika病毒的传播中有重要的意义。

寨卡病毒病在我国没有发生本地病例和流行的情况下，建议对血液样品寨卡病毒核酸阳性的隐性感染者采取居家隔离观察的措施，直至相隔24 h两次血液样品寨卡病毒核酸阴性方可解除居家隔离观察；且隔离期间不能进行献血。有研究显示，在患者中，通过PCR方法，Zika病毒在唾液及血液中的平均检出时间为出现症状后的3.5及3.3 d^[14]。本次研究中12例感染者唾液阳性持续时间中位数为3.5 d，与上述研究近似；但血液阳性持续时间与上述研究有差异，除了与本次研究个案数少有关外，也与本次研究有占53.84%的个案血液样品寨卡病毒核酸阴性有关。一项对6例患者的研究显示，所有患者在症状发作后10 d全部尿检阳性，其中1例在30 d后仍尿检阳性^[15]。本次研究10例感染者尿检阳性持续时间中位数5.5 d，比上述研究持续时间短；本次研究也有1例尿检阳性持续32 d。监测到1例隐性感染者，其血液、尿液和唾液样品阳性持续时间分别是4 d、11 d和7 d。经统计分析，尿液和唾液阳性持续时间均比血液长。尿检阳性中位数和上限的天数均比唾液大，但统计学上无差异。13例感染者中尿检全部阳性，唾液阳性率为69.23%，血液阳性率为46.15%；分析13例感染者血液和尿液阳性检出的先后顺序，有5例是同时检出阳性，有7例是尿液阳性，血液阴性，有1例是血液检出时间早于尿液；根据上述数据，如需要开展较大规模的寨卡病毒感染情况筛查工作，建议首先采集尿液样品进行检测，如尿检阳性再采集血液样品进行检测，这样既提高工作质量，也提高工作效率，同时也大大减少检测试剂的消耗。但如果筛查工作中发现有类似症状的病例，各种生物样品需同时采集和检测。

本次研究发现1例病例发病前2 d在其血液、尿液和唾液样品中检出寨卡病毒核酸阳性，显示病例在潜伏期内有可能具有传染性。张硕等^[16]的研究提到，寨卡病毒感染的潜伏期尚不十分明确, 约为数天至一周；另有文献报道，人感染Zika病毒后，约20%在经历了3~12 d的潜伏期后出现临床症状^[17]，本次研究也证实了寨卡病毒潜伏期的存在。

本研究存在的局限性：首先是研究的病例数相对较少，检出寨卡病毒核酸阳性持续时间不具普遍代表性；本次研究属于回顾性现况研究，未能做到发病前或发病当天采样检测，以及每天的持续采样检测，造成分析数据的偏倚。

综上所述，本研究初步展示了寨卡病毒病的流行病学特征，特别在对感染者的检测结果上进行了较详细的分析，表明寨卡病毒的感染具有潜伏期、也有隐性感染的存在，潜伏期和隐性感染有可能存在传染性。感染者的尿液和唾液寨卡病毒核酸阳性持续时间较长，血液持续时间较短，这些对落实寨卡病毒病防控措施提供了一定的数据支持，也为进一步对寨卡病毒的研究起到提示作用。