中国公共卫生  2009, Vol. 25 Issue (10): 1220-1221   PDF    
引用本文
叶松道, 温怀凯, 竺海波, 杨世昆, 干素娥. 男性精浆IL-8、TNF-α水平与精子动态参数关系[J]. 中国公共卫生, 2009, 25(10): 1220-1221.
YE Song-dao, WEN Huai-kai, ZHU Hai-bo, et al. Relationship between the contents of IL-8, TNF-α in seminal plasma and sperm dynamic indexes in infertile patients[J]. Chinese Journal of Public Health, 2009, 25(10): 1220-1221.
男性精浆IL-8、TNF-α水平与精子动态参数关系
叶松道1, 温怀凯1, 竺海波2, 杨世昆2, 干素娥1     
1. 温州医学院附属第二医院检验科, 浙江温州 325027;
2. 温州医学院附属第二医院泌尿外科
收稿日期: 2009-02-09
基金项目: 温州市科技计划项目(Y2005A417)
作者简介: 叶松道(1975-), 男, 浙江温州人, 主管技师, 本科, 主要从事实验诊断学工作。
摘要: 目的 研究男性不育症患者精浆白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量与精子活力、活率等动态参数的相互关系。 方法 对75例男性不育症患者(精子密度≥20×106/mL)和22名正常生育者进行精液常规参数测定，根据精子活力、活率将男性不育症分别分为精子活力正常组[(a+b)≥50%]和不良组[(a+b) < 50%]，精子活率正常组(≥60%)和下降组( < 60%)。应用放射免疫分析技术对精浆中IL-8、TNF-α含量进行检测分析。 结果 精子活力、精子活率、精子运动速度等多项动态参数及精浆IL-8和TNF-α含量在生育组与不育组之间差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01);TNF-α含量在精子活力正常/不良组、精子活率正常/下降组之间差异均有统计学意义(P < 0.05);精浆IL-8在精子活率正常/下降组之间差异均有统计学意义(P < 0.05)。不育组精浆TNF-α含量与精子活力[(a+b)%]、精子活率、精子直线速度(μm/s)、精子曲线速度(μm/s)、平均路径速度(μm/s)呈负相关，r分别为-0.45，-0.42，-0.31，-0.33，-0.32(均P < 0.05)。精浆IL-8含量与精子活率呈负相关，r=-0.39(P < 0.05)，而与其他动态指标均无明显相关性。 结论 精浆中IL-8、TNF-α含量与男性精子的动态参数密切相关，可反映不育男性的精子运动功能，为探讨男性不育的发病机制以及临床治疗提供依据。
关键词： 不育症     精浆     白细胞介素-8     肿瘤坏死因子α    
Relationship between the contents of IL-8, TNF-α in seminal plasma and sperm dynamic indexes in infertile patients
YE Song-dao, WEN Huai-kai, ZHU Hai-bo, et al     
The 2nd Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325027, China
Abstract: Objective To observe the relationship between the contents of interleuk in-8(IL-8), tumor necrosis factor alpha (TNF) in seminal plasma and sperm dynamic indexes in infertile males. Methods By radio mimuno assay (RIA), we determined the contents of IL-8 and TNF-α in the seminal plasma of 75 infertile (sperm count≥20×106/ml) and 22 normalmales.Accoding to sperm vitality and motility, the infertiles were subdividedintoa normal and abnormal vitality groups and normal and decre sed motility groups. Results The content of IL-8, TNF-α in the seminal plasma of the infertile group was obviously higher.But many dynamic indexes, including sperm vitality, sperm motility and sperm speed, were significantly lower than that of the normal group (P < 0.05 or P < 0.01).In the infertility group, there existed significant differences in the contents of TNF-α be tween the normal and decreased sperm vitality, motility groups (P < 0.05).There existed significant differences in the contents of IL-8 between the normal and decreased sperm motility groups.The contents of TNF-α were negatively correlated with sperm vitality, motility and speed (P < 0.05).The content of IL-8 had a significant negative corelation with sperm motility (r=-0.39, P < 0.05), but had no obvious relation to other dynamic indexes. Conclusion The contents of IL-8, TNF-α inseminal plasma are closely related to sperm dynamic indexes.Determination of IL-8, TNF-α contents can reflects sperm functions, and afford valuable evidence in exploring the mechanism of infertility and in clinical medication.
Key words: infertility     seminal plasma     interleukin 8     tumor necrosis factor alpha    

近年来，男性不育症患者日益增多，其原因有睾丸附睾、染色体、激素、精液及精神异常和生殖道感染等，但精液中细胞因子的变化对精子的发育与成熟也具有重要作用〔1〕。为探讨男性精浆中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子α (TNFˉα)与精子动态参数的相关性，评价其对男性不育的诊治价值，本研究应用放射免疫分析(RIA)技术对75例不育男性和22名正常生育者精浆中IL-8、TNF-α水平进行了分析比较。结果报告如下。

1 对象与方法 1.1 对象

选择2005年11月-2007年7月在温州医学院附属第二医院生殖中心就诊的不育男性75例作为不育组，年龄25~41岁，平均(30.1±4.1)岁；精子密度均≥20× 106/mL，排除少精子症与无精子症者。男性不育症的诊断符合WHO诊断标准〔2〕，即有1年以上的性生活史、未采取避孕措施、排除女方因素而妻子未孕的男性。选择温州市鹿城区妇幼保健所的体检男性22名作为正常生育组，年龄25~40岁，平均(30.5±4.3)岁；婚后已生育，精液常规分析各参数均在正常范围。所有观察对象均排除泌尿、生殖、造血系统及内分泌疾病，以及患其他慢性、隐睾症、性功能低下和接受过放疗或化疗等。

1.2 方法

所有观察对象均禁欲3~5 d，手淫法或利用电动采精器采集1次排出的全部精液，液化后备查。精液完全液化后，按WHO文献方法〔3〕，采用WLJY-9000型伟力彩色精子质量检测系统进行精子密度、精子活力、精子活率等参数分析；另取部分精液以3 000 r /min离心10 min，分离精浆，保存于-20 ℃，以备进行各种细胞因子检测。精浆中IL-8、TNF -α含量测定采用放射免疫法(RIA)试剂盒(北京解放军总医院科技开发中心放免所)。使用SN-695型智能放免λ测量仪(上海核所日环光电仪器有限公司)进行测量，自动拟合曲线并打印结果。根据精子活力〔(a+b) %〕，将不育症者分为:正常组，精子活力≥50%；下降组，精子活力 < 50%；比较2组精浆中IL-8、TNF-α含量。

1.3 统计分析

采用SPSS 13.0软件进行统计分析，组间均值比较采用t检验，多组均值间比较采用方差分析，参数相关性采用单因素相关分析。

2 结果 2.1 生育组与不育组精液动态参数及精浆因子含量比较(表 1)
表 1 生育组与不育组精液部分参数及精浆因子测定结果(x±s)

生育组与不育组的精子活力、精子活率、精子运动速度等动态参数差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)；不育组精浆IL-8和TNF-α含量均高于生育组，差异有统计学意义(P < 0.01)。

2.2 不育症患者精浆IL-8、TNF-α与精子活力关系(表 2)
表 2 不育症患者精子活力正常/下降组精浆IL-8、TNF-α测定结果(x±s, ng/mL)

结果可见，2组的IL-8含量差异无统计学意义(P > 0.05)；而精子活力下降组TNF-α含量明显高于精子活力正常组，差异有统计学意义(P < 0.05)。单因素相关分析结果显示，不育组精浆TNF-α含量与a级精子百分率、(a+b)级精子百分率呈负相关，分别r=-0.44，r=-0.45，差异均有统计学意义(均P < 0.05)；IL-8含量与精子活力则无明显相关性。

2.3 不育症患者精浆IL-8、TNF-α与精子活率的关系(表 3)
表 3 不育症患者精子活率正常/下降组精浆IL-8、TNF-α测定结果(x±s, ng/mL)

根据精子活率，将不育症者分为:正常组，精子活率≥60%下降组，精子活率 < 60%；比较2组精浆中IL-8、TNF-α含量。结果可见，精子活率下降组精浆IL-8、TNF-α含量均明显高于精子活力正常组，差异均有统计学意义(P < 0.05)。单因素相关分析结果显示，不育组精浆IL-8、TNF-α含量与精子活率呈负相关，分别r=-0.39，r=-0.42，差异均有统计学意义(均P < 0.05)。

2.4 不育症患者精浆IL-8、TNF-α含量与精液其他动态参数的相关性

TNF-α与精子直线速度(μm/s)、平均路径速度(μm/s)呈负相关，分别r=-0.31，r=-0.33，r=-0.32，差异均有统计学意义(均P < 0.05)。TNF-α与精子平均移动角度、摆动幅度(μm)无明显的相关性，分别r=-0.13，r=-0.16，差异均无统计学意义(均P > 0.05)。IL-8与精子运动速度、平均移动角度及摆动幅度均无明显相关性(均P > 0.05)。

3 讨论

精子运动功能的强弱直接关系到人类的生殖，引起精子活动能力低下的常见因素有感染、免疫、内分泌等，由此造成的男性不育约占30%。本研究结果显示，不育组在精子活力、精子活率、精子运动速度等多项动态参数上与生育组比较有明显差异，揭示部分不育患者存在精子运动能力低下，原因可能是以上1种或多种原因的综合结果。

研究资料显示，精浆中含IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、IL -10、IL-11、IL-12、TNF-α等多种细胞因子，它们对精子的发生和功能等发挥着直接和间接的生物学作用，从而对男性生育产生影响〔1〕。本研究结果显示，不育组的IL-8和TNF-α含量高于生育组，尤其是精浆TNF-α含量与精子活力、精子活率、精子运动速度等多项运动指标呈负相关，揭示它不仅与精子的运动能力有关，而且与精子的运动方式有关。精浆IL-8含量也与精子活率呈负相关，但与其他动态指标均无明显相关性。结果表明，不育症患者存在精浆IL-8、TNF-α含量增高和精子运动能力下降，两者之间关系密切，但其因果关系值得进一步研究。有研究认为〔4〕，TNF-α对人类精子线粒体功能有影响，干扰精子能量代谢，降低精子受精能力，还可能通过线粒体凋亡途径，促进精子凋亡。而白文俊等发现〔5〕，不育患者存在IL-1β和TNF-αm r NA表达障碍，从而影响了精子的功能。

由此可见，精浆中IL-8、TNF-α的含量与男性精子运动能力和运动方式有关，其含量变化可反映不育男性的精子运动功能。因此，检测精浆IL-8、TNF-α的含量可以反映男性不育症患者精子的运动状态，可为探讨男性不育的发病机制以及临床诊治提供帮助。

参考文献
[1] 熊承良, 吴明章, 刘继红, 等. 人类精子学[M]. 武汉: 湖北科学技术出版社, 2002: 182-189.
[2] Rowe PJ, Comhaire FH, Hargreave B, et al. WHO manual for the standardized investitagion, diagnos is and management of the infertile male[M].Cambrideg, England: Cambridge University Press, 2008.
[3] 世界卫生组织. 人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册[M].4版. 北京: 人民卫生出版社, 2001: 225-229.
[4] 郭贤坤, 边疆, 杜丹, 等. rhTNF-α在体外对人正常精子线粒体和质膜的影响[J]. 生殖与避孕, 2005, 25(2) : 78–82.
[5] 白文俊, 朱积川, 闫征, 等. 细胞因子IL-1β和IL-1α mRNA在人精子表达的变化及意义[J]. 中华泌尿外科杂志, 2001, 22(3) : 172–175.