活化部分凝血活酶时间(APTT); 纤维蛋白原(FBI)冬季作战、恐怖活动、地震和海啸等突发事件时可见大批低体温伤员, 低体温可引起多方面的血液系统障碍, 严重者可导致不良的预后^〔1〕。创伤学研究发现, 低体温和凝血机制紊乱是致命的重要原因^〔2〕。本实验观察了大鼠于-30℃冷暴露环境中, 导致低体温时及复温后凝血因子的动态变化, 进一步了解低体温状况下凝血功能变化及病理机制。

材料与方法

(1)材料:①实验动物:健康雄性Wistar大鼠88只(中国医科大学动物实验中心), 体重200~220 g, 自由饮食、饮水。②主要仪器与试剂:寒冷环境模拟实验室(沈阳一冷冷冻机有限公司, 模拟温度范围20~-50℃, 温度波动范围为0.3℃); 普利生C-2 000全自动血凝分析仪(北京普利生公司)。凝血酶原时间(PT)测定试剂盒、活化部分凝血活酶分析仪(APTT)测定试剂盒、纤维蛋白原(FBI)含量测定试剂盒(上海太阳生物技术有限公司)。(2)方法:①动物分组:Wistar大鼠于18~22℃环境中适应饲养1周, 随机分为11组, Ⅰ组为对照组, Ⅱ~XI组为实验组, 每组8只。10个实验组大鼠单笼置于寒冷环境模拟实验中, 于-30℃环境进行冷暴露。Ⅱ~IV组为低体温组, 以肛温 < 35℃为判断低体温标准, Ⅱ~IV组分别冷暴露30, 60, 80 min其肛温为33.28, 34.16, 28, 23℃; Ⅴ~Ⅵ组为低体温后复组, 冷暴露80 min。后室温自然复温, 分别于复温4, 8, 12, 16, 25, 72, 120 h后进行实验。②指标测定:采集血液标本, 立即与0.109 mol/L枸橼酸钠按1:9(V/V)混匀, 离心取上层血浆, 按照试剂盒方法测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)和纤维蛋白(FIB)含量。(3)统计分析:应用SPSS 10.0统计软件进行方差分析。

结果

低体温大鼠凝血功能检测(表 1)。对低体温大鼠PT、APTT和FIB含量测定结果表明, -30℃冷暴露30 min, 低体温大鼠PT较Ⅰ组缩短, 随着冷暴露时间延长, PT继续缩短, 复温后4 h最短, 与Ⅰ组比较, 差异有统计学意义(P < 0.05);之后PT呈波动式变化, 复温后16 h时PT较Ⅰ组明显延长(P < 0.01)。-30℃冷暴露30 min低体温大鼠APTT开始缩短, 随着冷暴露时间延长, APTT持续缩短, 冷暴露80 min时与Ⅰ组比较, 差异有统计学意义(P < 0.01), 之后呈波动式变化。-30℃冷暴露30 min低体温大鼠FIB含量明显高于Ⅰ组, 差异有统计学意义(P < 0.05);冷暴露30, 60, 80min及复温4, 8, 12, 16, 24, 72, 120 h大鼠FIB含量均高于Ⅰ组, 其中复温16, 24, 72 h明显增加(P < 0.05或P < 0.01)。

讨论

本实验结果表明, 大鼠暴露于深低温冷环境中心体温迅速下降, -30℃冷暴露30 min, 中心体温下降到35℃以下。低体温时血液循环系统发生变化, 而凝血机制是维持正常血液循环、保持内环境温度的重要因素。正常情况下凝血、抗凝系统处于平衡状态, 当平衡失调时则有血栓形成的危险或出血倾向^〔3〕。有研究报道, 低温主要通过凝血酶等因子的引起凝血功能紊乱, 血中纤维蛋白原明显增加, 血液粘滞度上升^〔4〕, 出现广泛微血栓^〔5〕, 体温过低会加重凝血机制紊乱^〔2〕, 低体温程度与死亡率密切相关^〔6〕。本实验结果表明, 深低瘟冷环境造成的低何况, PT、APTT明显缩短, FIB含量明显增加, 血液处于高凝状态, 复温过程中, PT、APTT均延长, PT延长差异明显, FIB含量亦明显增多, 整个低体温和复温过程凝血机制发生紊乱。