金黄色葡萄球菌是一种条件致病菌，可引起人皮肤及软组织炎症、骨关节炎、菌血症等各种疾病，甚至死亡^[1]。其广泛定植于儿童及青少年的口腔和鼻腔^[2]，是危害儿童及青少年健康的重要病原体。环境既是金黄色葡萄球菌的储存库，又是人携带或感染金黄色葡萄球菌的重要来源^{[3 – 4]}。本研究于2016年4 — 6月采集广州市6所小学的课室、厕所、走廊或楼梯的环境样品，并对分离到的金黄色葡萄球菌进行耐药谱分析，以了解小学学校环境金黄色葡萄球菌的耐药现况。

于2016年4 — 6月采集广州市6所小学的课室、厕所、走廊或楼梯的环境样品共1 040份，通过实验分离鉴定出98株金黄色葡萄球菌。质控菌株金黄色葡萄球菌 ATCC 25923购自广州环凯微生物科技有限公司。

7.5 % 氯化钠甘露醇培养基、营养琼脂培养基、血平板、冻干血浆、M-H琼脂培养基购于广州环凯微生物科技有限公司，革兰氏染液Ⅰ-Ⅳ购于珠海贝索生物科技有限公司，过氧化氢溶液购于广东光华科技股份有限公司，药敏纸片购于中国赛默飞世尔科技有限公司。

通过增菌培养、革兰染色试验、触媒试验、溶血试验和血浆凝固酶试验^[5]，从6所小学1 040份环境样品中分离并鉴定金黄色葡萄球菌。

选取头孢西丁、利奈唑胺、青霉素、庆大霉素、替考拉宁、红霉素、复方新诺明、氯霉素、莫西沙星、利福平、四环素和克林霉素共12种常用抗生素，依据2015年国际公认的 CLSI 标准^[6] 对金黄色葡萄球菌进行药物敏感试验。将头孢西丁药敏纸片扩散法耐药的金黄色葡萄球菌鉴定为甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌，其他金黄色葡萄球菌则为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌耐药≥ 3种抗生素则定义为多耐药菌株（multi-drugresistant，MDR）^[7]。

数据采用 Epi Data 3.1双录入，并用 Stata 13.1进行统计分析。采用率来描述金黄色葡萄球菌对各种抗生素的耐药情况，用χ²或 Fisher确切概率法比较甲氧西林耐药与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的耐药率，以及不同场所金黄色葡萄球菌的耐药率，P < 0.05为差别有统计学意义。

从6所小学1 040份环境样品中共分离鉴定出98株金黄色葡萄球菌，其中36株（36.73 %）为甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。结果显示，88.78 %（87/98）金黄色葡萄球菌为多重耐药菌株。金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高（97.96 %，96/98），其次是红霉素（89.80 %，88/98）和替考拉宁（88.78 %，87/98）。甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌对7种抗生素，包括利奈唑胺、青霉素、替考拉宁、红霉素、利福平、四环素和克林霉素的耐药率均高于88.89 %，而甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌主要对青霉素（96.77 %）、替考拉宁（85.48 %）和红霉素（83.87 %）3种抗生素耐药。不仅如此，甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的多重耐药率和对6种抗生素（利奈唑胺、红霉素、莫西沙星、利福平、四环素和克林霉素）的耐药率均高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌，差异有统计学意义（P < 0.05）。

表 1

表 1 金黄色葡萄的耐药率及甲氧西林耐药与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌耐药率比较 抗生素 金黄色 葡萄球菌 甲氧西林 耐药 甲氧西林 敏感 χ2 值 P 值 n % n % n % 利奈唑胺 67 68.37 32 88.89 35 56.45 11.08 < 0.05 青霉素 96 97.96 36 100.00 60 96.77 – 0.53a 庆大霉素 12 12.24 4 11.11 8 12.90 – 1.00a 替考拉宁 87 88.78 34 94.44 53 85.48 – 0.32a 红霉素 88 89.80 36 100.00 52 83.87 – < 0.05a 复方新诺明 18 18.37 8 22.22 10 16.13 0.56 0.45 氯霉素 18 18.37 8 22.22 10 16.13 0.56 0.45 莫西沙星 20 20.41 12 33.33 8 12.90 5.85 < 0.05 利福平 73 74.49 34 94.44 39 62.90 11.92 < 0.05 四环素 73 74.49 36 100.00 37 59.68 19.49 < 0.05 克林霉素 69 70.41 32 88.89 37 59.68 9.33 < 0.05 MDR 87 88.78 36 100.00 51 82.26 – < 0.05a 注：a 为用 Fisher 确切概率法计算的结果。

表 1 金黄色葡萄的耐药率及甲氧西林耐药与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌耐药率比较

98株金黄色葡萄球菌分别来源于厕所（20株）、课室（60株）和走廊或扶梯（18株）。厕所金黄色葡萄球菌对5种抗生素（青霉素、替考拉宁、红霉素、利福平和四环素）的耐药 > 80.00 %，而课室和走廊或楼梯的金黄色葡萄球菌对3种抗生素（青霉素、替考拉宁和红霉素）的耐药率 > 80.00 %。不同场所金黄色葡萄球菌对庆大霉素、复方新诺明、氯霉素和莫西沙星的耐药率较低，为5.00 % ～25.00 %。厕所和课室金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率均为100.00 %，高于走廊或扶梯（88.89 %），差异有统计学意义（ P < 0.05）。而不同场所金黄色葡萄球菌对其他11种抗生素的耐药率差异无统计学意义（ P > 0.05）。

表 2

表 2 不同环境场所金黄色葡萄球菌的耐药率比较 抗生素 厕所 课室 走廊或楼梯 χ2 值 P 值 n % n % n % 头孢西丁 8 40.00 24 40.00 4 22.22 2.00 0.37 利奈唑胺 15 75.00 42 70.00 10 55.56 1.85 0.40 青霉素 20 100.00 60 100.00 16 88.89 － < 0.05a 庆大霉素 2 10.00 8 13.33 2 11.11 － 1.00a 替考拉宁 17 85.00 54 90.00 16 88.89 － 0.82a 红霉素 17 85.00 55 91.67 16 88.89 － 0.64a 复方新诺明 3 15.00 13 21.67 2 11.11 － 0.66a 氯霉素 5 25.00 10 16.67 3 16.67 － 0.71a 莫西沙星 5 25.00 14 23.33 1 5.56 － 0.24a 利福平 17 85.00 46 76.67 10 55.56 4.71 0.10 四环素 16 80.00 45 75.00 12 66.67 0.91 0.64 克林霉素 15 75.00 43 71.67 11 61.11 0.99 0.61 注：a 为用 Fisher 确切概率法计算的结果。

表 2 不同环境场所金黄色葡萄球菌的耐药率比较

金黄色葡萄球菌可引起各种疾病，严重危害儿童的身心健康^{[8 – 9]}。研究小学学校环境金黄色葡萄球菌的耐药谱，为进一步了解小学生日常活动场所的设施或物品表面金黄色葡萄球菌耐药现况，以及相关卫生政策的实施提供了参考依据，对促进儿童身心健康具有重要意义。

本研究为国内首次关于小学学校环境金黄色葡萄球菌的耐药谱研究，并发现小学学校环境金黄色葡萄球菌的多重耐药率高于广州市地铁葡萄球菌（88.78 % 比79.75 %）^[5]。与 Zhou 等^[10] 的研究结果比较发现，小学学校环境金黄色葡萄球菌对6种抗生素，包括青霉素、庆大霉素、红霉素、四环素、克林霉素和利福平的耐药率均高于上海地铁、医院及公园环境。同时，对红霉素、四环素和庆大霉素3种抗生素的耐药率均高于肯尼亚中学厕所及课室的门把手金黄色葡萄球菌（89.80 % 比0.00 %，74.49 % 比0.00 %，12.24 % 比0.00 %）^[11]。此外，不同场所对红霉素、四环素、克林霉素的耐药率均高于美国托儿所（18.20 %，0.00 %，4.60 %，0.00 %）^[12]。小学学校环境金黄色葡萄球菌的高多重耐药率以及相对其他公共场所更严重的耐药特征，一方面可能是学校环境消毒的力度不够或者方法不合适^[13]，另一方面可能与家长滥用抗生素为学生治疗有关^{[14 – 15]}。除青霉素外，不同场所金黄色葡球菌对其他抗生素的耐药率差异均无统计学意义，说明小学学校不同场所金黄色葡萄球菌的耐药特征相似，同时不同抗生素耐药的金黄色葡萄球在各场所的分布比较均匀。

本研究发现小学学校环境金黄色葡萄球菌中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的比例为36.73 %，高于肯尼亚中学厕所及课室的门把手（15.00 %）^[11]和葡萄牙公交（16.07 %）^[16]，但低于美国西部海滩（60.00 %）^[17]。同时，甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的多重耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌，这与广州市地铁的检测结果一致^[5]。不仅如此，甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌对6种抗生素的耐药率均高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌，说明一旦感染甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌，其可选治疗药物更少，无效治疗的风险增加。因此，为更好的促进小学生的身心健康，寻找新的处理或杀灭小学学校环境金黄色葡萄球菌的消毒措施非常重要。

综上所述，小学学校环境金黄色葡萄球菌的多重耐药率高，对多种抗生素耐药，并且甲氧西林耐药菌株的耐药问题比甲氧西林敏感菌株更严峻。