为了进一步贯彻实施《放射工作人员职业健康管理办法》^[1]相关规定, 规范全国放射工作人员健康监护工作, 提高放射卫生服务机构染色体非稳定性畸变的分析能力和水平, 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所(以下简称组织者)组织开展全国生物剂量估算考核工作。现将2014年生物剂量质量控制比对结果报告如下:

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 组织者提供

2份经过不同剂量照射的离体外周血样品。

1.1.2 制备

由潍坊市康华生物技术有限公司生产的淋巴细胞培养基, 0.075 mol/L KCl低渗液; 固定液(V_甲醇:V_冰乙酸=3:1), pH=6.8缓冲液, 2.5 μg/ml秋水仙素, 8%的Giemsa染液, 载玻片, GNP-9160隔水式恒温培养箱, TGL-20M离心机, CX31RTSF生物显微镜。

1.2 方法 1.2.1 比对方法

外周血样取自非放射工作者、近期内无急慢性疾病, 半年内无射线和化学毒物接触史, 近一个月无病毒感染史的人员。将外周静脉血分装到肝素抗凝管中。血样由组织者在二级标准剂量学实验室分不同剂量进行⁶⁰Co γ射线分批照射, 并将样品统一编号。标本照射后37℃放置2 h后, 采用双盲法向各参比单位发放血样。一部分参比单位取血样回单位进行培养、制片、分析, 另一部分不能及时带回血样的参比单位, 可利用辐射所流行病学实验室的条件进行血样的培养、制片, 分析工作回参加单位进行。

1.2.2 实验方法 1.2.2.1 取样品

技术人员直接从组织者处取回血样坐动车返回本实验室。

1.2.2.2 细胞培养与标本的制备

依据《染色体估算生物剂量方法》^[2]。

1.2.3 分析方法

依据《染色体估算生物剂量方法》^[2]。在显微镜油镜下(×100)选择中期分裂相中染色体为46±1条, 形态完整, 分散度较好, 长短适中者进行分析。用于辐射生物剂量估算的是非稳定性畸变, 主要为双着丝粒体(dic)、着丝粒环(r), 无着丝粒体(ace)。其中又以dic和r估算受照剂量较为准确。本次估算以dic+r畸变率(百分率表示)计算。

1.2.4 分析细胞数

依据《2014年生物剂量估算质量控制比对方案》要求, 按公式n=[(1-p)×96.04]/p, 式中p为dic+r畸变细胞率, n为应分析的细胞数, p可在计数分析到一定数量畸变细胞后求出。或每个样本至少分析100个dic+r, 或1000个有丝分裂相。

1.3 判定标准 1.3.1 结果判定

根据相对偏差计算公式:相对偏差= |估算剂量-照射量|/照射量×100%, 照射量≥1 Gy。总分设定为80分。相对偏差在0~5%以内, 为80分; 相对偏差在5~10%以内, 为75分; 相对偏差在10~15%以内, 为70分; 相对偏差在15~20%以内, 为65分;

1.3.2 合格判定

相对偏差≤20%内视为合格。两样品畸变率计算合格, 估算剂量的平均值与照射值的相对偏差在规定的范围之内为合格; 未给出任何一个样本剂量结果的视为不合格; 两个估算剂量中有一个合格另一个不合格的, 视为不合格。

1.3.3 优秀判定

在合格的参比单位中, 依据2014年度生物剂量估算质量控制分值Q评分, 由组织者进行评判计算得分, 总分为20分。根据结果判定和Q值评分两项计算结果, 总分在90分以上为优秀。

2 结果 2.1  

本实验室采用组织者提供的剂量效应曲线, 估算生物剂量。2014年度生物剂量估算质量控制比对结果见表 1。

由表 1可看出, A组、B组分析细胞数分别为1445个、1382个, Dic+r畸变率为25.67%、11.07%, 估算剂量分别为1.73 Gy、1.08 Gy, 照射剂量分别为2.1Gy、1.1 Gy, 相对偏差分别为-17.62%、-1.82%, 各组估算结果得分为65分、80分, 估算结果平均分为72.5。

2.2 2014年度生物剂量估算质量控制分值Q评分表

见表 2。

Q值评定是依据设定的评分原则及细则对质量控制比对报告进行量化打分所得的分, 由表 2可知, 比对质量控制报告Q值得分为20分, 其评分项均为满分。

2.3 比对结果

本次比对为满分制, 质量控制比对结果判定占80分; Q值评定分占20分; 总分90分以上者的为优秀。本实验室生物剂量质量控制比对结果为72.5分, Q值评定分为20分, 经综合判定总分为92.5分, 评为优秀。

3 讨论

外周血染色体畸变分析是目前国际上公认的可靠而灵敏的生物剂量计^[3]。用非稳定性染色体畸变进行电离辐射剂量估算是放射生物剂量学的主要技术, 也是“金标准”。Dic和r是判断辐射损伤的最好指标^[4]。该估算法在国内外重大的辐射事故中起了相当重要的作用, 所估算的剂量与临床表现相符, 为临床诊断与治疗提供依据, 且与物理剂量有较好的一致性, 从而使生物剂量和物理剂量互相补充、验证。在物理剂量难以估算时, 生物剂量估算就更显示出了优越性^[4]。

本实验室此次生物剂量估算质量控制比对结果优秀, 说明本实验室从取样到染色体培养、制片、阅片分析到生物剂量估算的过程质量控制措施良好, 良好的结果与下面几方面直接相关:①培养基的选择, 实验所用试剂的配制, 实验时每种试剂的用量均严格质量控制; ②实验设备定期校准及厂家维修保养; ③实验室在比对前进行了充分的预实验准备, 保证比对实验过程和预实验一致; ④阅片分析, 统一分析标准; ⑤整个比对工作由经过相关技术培训且有多年实践经验的实验室技术人员担任。