微核是由淋巴细胞有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片形成与主核染色一致的核块, 微核实验是用快速检测体内染色体畸变的细胞遗传学方法, 并以简便、快速等为优点, 应用于放射工作人员的体检测中。2007年卫生部颁布的《放射工作人员职业健康管理办法》中将外周血淋巴细胞微核测定作为其在职期间与离岗健康体检的必检项目之一^[1]。

2010年4月到6月, 我们对廊坊市各级医疗单位的放射工作人员外周血淋巴细胞微核率进行了检测。

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 调查样本

以廊坊市各级医疗单位的739名放射工作人员为研究对象, 男558人, 女181人, 男女性别比为3.1/1, 最大年龄为73岁, 最小年龄为19岁, 平均年龄35.8岁, 放射工龄1~35a, 平均放射工龄12.62a。

1.1.2 仪器材料

一次性注射器、一次性试管、一次性吸管、恒温培养箱、离心机、校准显微镜、计数器。

1.1.3 试剂

500个单位/ml的肝素、0.5%的甲基纤维素、瑞氏染液(分甲、乙液, 甲液由碱性美蓝、酸性伊红和甲醇组成, 乙液为pH值在6.4 ± 0.3的缓冲液)。

1.2 检测方法

采用甲基纤维素浓集细胞法(简称甲纤法)。

1.2.1 采样

用注射器直接抽取研究对象1ml外周静脉血, 将血注入加入肝素(7号针头2滴)的一次性塑料试管中(去除针头), 混匀。

1.2.2 处理

往血样中加0.5ml甲基纤维素试剂, 充分混匀后放入恒温培养箱中, 37℃培养40min, 取出后用一次性吸管吸取上清液(含大量白细胞)放入另一个一次性试管中, 用离心机以2000转/min, 离心10min, 去除上清液, 只留下底部的沉淀物(大量的白细胞聚集而成)和少量的液体, 将其震荡使细胞散开、混匀, 吸取一小滴均匀涂在玻璃片上, 晾干后用瑞氏染液染色, 首先用甲液均匀滴于标本上, 待1min后滴加稍多的乙液, 用洗耳球吹匀, 染色15min后用清水将染液清洗掉, 将标本放于滤纸上自然风干。

1.2.3 观察计数

用校准显微镜在油镜下观察细胞, 并用计数器记录观察的细胞个数, 每个标本计数细胞1 000个。

1.3 微核标准及判定

微核应位于完整的淋巴细胞浆内, 且与主核完全分开(如与主核相切应见到各自的核膜), 呈圆形或椭圆形, 边缘光滑, 结构与主核相同, 嗜色性与主核一致或略浅, 大小为主核的1/3以下^{[2, 3]}。采用盲法阅片, 在显微镜下选择细胞完整、染色形态清晰及铺展良好的细胞进行分析。每张片子计数1 000个胞体完整的淋巴细胞, 计算微核率(用‰表示), 微核阳性率、超标率(%表示)。发现可疑的微核需要两个观察者共同确认。

1.4 统计学分析

数据采用Excel建立数据库, 用SPSS软件进行分析, 主要分析方法采用χ²检验。

2 结果 2.1 不同放射工龄的工作人员外周血淋巴细胞微核的检测结果

见表 1。经统计学分析, 各组之间的平均微核率、微核阳性率、超标率均有差异(P < 0.05), 与放射工龄成正相关性。

2.2 各级医院放射工作人员淋巴细胞微核的检测结果

见表 2。经统计学分析, 以乡级卫生院、县级医院、市级医院的不同分为三组进行统计, 结果表明, 各级医院之间工作人员外周血淋巴细胞微核率、微核阳性率差异有统计学意义(P < 0.01)。但就县级医院与市级医院的微核阳性率进行统计处理, 差异无统计学意义(P>0.05), 无统计学意义。

2.3 按性别分组比较淋巴细胞微核的检出结果

见表 3。经统计学分析, 两组之前在平均微核率、微核阳性率、超标率中差异无统计学意义(P>0.05)。

2.4 与2008年的检测结果相比的检测情况

见表 4。经统计学分析, 两年之间相比微核率、阳性率、超标率差异(P>0.05)均无统计学意义。

3 讨论

微核率的检测应用于放射工作人员健康监护、检测及放射损伤的评价^[4]。通过对廊坊市放射工作人员微核率的现状调查, 得到的结果是平均微核率为0.4547‰, 超过我国成人微核均值0.1~0.3‰^[5]。说明长期从事放射工作的人员, 可引起外周血淋巴细胞微核细胞的增多, 故微核实验为放射工作人员体检的必检项目之一。

调查表明, 外周血淋巴细胞微核与放射工龄有明显的联系, 随着放射工龄的不断增加, 外周血淋巴细胞微核率、阳性率、超标率均呈上升趋势, 与以前的相关报道相一致^[6]。廊坊市、县、乡三级医院的淋巴细胞微核率、微核率阳性率有显著差异。这可能是因为乡级卫生院防护条件差、个人累积剂量大; 同时, 乡级卫生院的工作人员与县、市级工作人员相比, 对放射线的危害认识相对不足, 个人防护意识较差。

4 小结

利用甲基纤维素浓集法调查了廊坊市739名放射工作人员的外周血淋巴细胞微核率现状。调查结果表明长期从事放射工作, 可造成微核细胞的增多, 微核同放射工龄、防护措施、个人防护意识有关, 因此我们应提高防护措施, 加强对放射工作人员的培训, 增强个人的防护意识, 适当减少接触放射线时间, 定期体检, 以保护放射工作人员的健康。