免疫系统对辐射极其敏感, 辐射暴露会导致免疫功能紊乱。IRM-2小鼠是我所自己培育的近交系小鼠。该小鼠对辐射有较强的抗性, 并对多种移植性肿瘤易感^[1-3], 因此其独特的免疫学特点值得深入探讨。本研究拟对IRM-2、ICR、615三种小鼠的Th、SP细胞对辐射敏感性的差异进行比较, 进一步研究IRM-2小鼠辐射抗性的免疫学机制, 为该小鼠的应用提供基础数据。

1 材料和方法 1.1 动物和材料

IRM-2小鼠、ICR小鼠由本所动物房提供, 615小鼠由中国医学科学院血液病研究所提供。6~8周龄, 雄性。RPMI1640培养基为美国Gibco公司产品。FITC-Annexin V/PI凋亡检测试剂盒购自美国Beckman公司。

1.2 仪器

¹³⁷Csγ射线照射源(加拿大原子能有限公司, USD, Autocell40, 剂量率0.80Gy/min), 倒置显微镜, CoulterAltra流式细胞仪(美国Beckman), GloMaxTM发光检测仪(美国Promega)。

1.3 方法 1.3.1 外周血细胞分型检测

将每只小鼠的外周血样品分别加入抗体标记, (CD4、CD8、CD25、B220、NK1.1), 上流式细胞仪检测。

1.3.2 Th、SP细胞凋亡测定

Ficoll分离脾细胞, 无菌取小鼠胸腺研磨, 制成细胞浓度为106/ml细胞悬液。0、1、4Gy照射, 将照射后的细胞接种于24孔板, 37℃、5% CO₂饱和湿度培养6 h, 离心收集细胞。细胞使用Annexin-V凋亡试剂盒标记后, 流式检测。

1.4 数据统计

结果用x±SD表示, 两组比较用t检验, 以P < 0.05为有统计学意义。

2 结果 2.1 外周血分型检测结果(表 1)

IRM-2小鼠的CD4/CD8比值低于ICR、615小鼠, CD25/CD4高于615小鼠, 差异有统计学意义(P < 0.05), 低于ICR小鼠, B220介于ICR和615小鼠之间, 差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 SP、Th细胞辐射暴露后6h凋亡检测结果(表 2)

从表 2可以看出, IRM-2小鼠SP细胞经1、4 Gy照射后其凋亡率分别低于ICR和615小鼠, 差异有统计学意义(P < 0.05, P < 0.01), IRM-2小鼠Th细胞凋亡率亦低于ICR和615小鼠, 照射剂量在4Gy时与615小鼠比较, 差异有统计学意义(P < 0.01)。

3 讨论

放射损伤救治仍然是困扰着目前医学界的一个难题, 尤其是对于免疫系统的损伤, 症状出现早, 调节变化复杂, 持续时间长^{[5, 6]}。IRM-2小鼠对辐射有较强的抗性, 免疫学特性也极其突出, 因此, 是难得的辐射免疫学研究的实验动物模型。本研究结果表明, 用不同剂量的¹³⁷ Csγ射线照射后, IRM-2小鼠的脾细胞及胸腺细胞凋亡率明显低于ICR和615小鼠, 说明IRM-2小鼠的免疫细胞对辐射有一定的耐受性, 对辐射损伤有较强的修复机制^[4]。IRM-2小鼠独特的免疫学特性, 将为更广阔的研究领域提供实验材料。