中国辐射卫生  2008, Vol. 17 Issue (4): 405-406  DOI: 10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2008.04.081

引用本文 

王月英, 李德冠, 吴红英, 刘强, 路璐, 王勇, 孟爱民, 王彦, 王汝勤, 张良安, 史元. E838提高肿瘤化疗药物疗效及抗免疫抑制作用的研究[J]. 中国辐射卫生, 2008, 17(4): 405-406. DOI: 10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2008.04.081.
WANG Yue-ying, LI De-guan, WU Hong-ying, et al. Studies of Reducing Poison and Increasing Effects of E838 on Immune Function of Tumor-Bearing Mice[J]. Chinese Journal of Radiological Health, 2008, 17(4): 405-406. DOI: 10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2008.04.081.

基金项目

天津市自然科学重点基金项目(043802411)

通讯作者

孟爱民, 研究员, 博士生导师

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收稿日期：2008-07-05
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E838提高肿瘤化疗药物疗效及抗免疫抑制作用的研究
王月英 , 李德冠 , 吴红英 , 刘强 , 路璐 , 王勇 , 孟爱民 , 王彦 , 王汝勤 , 张良安 , 史元     
中国医学科学院放射医学研究所, 天津市分子核医学重点实验室, 天津 300192
收稿日期：2008-07-05
基金项目：天津市自然科学重点基金项目(043802411)
作者简介：王月英(1957~), 女, 副研究员, 研究方向:放射生物学、实验动物学.
通讯作者：孟爱民, 研究员, 博士生导师.
摘要：目的 观察E838联合环磷酰胺(CTX)抗淋巴瘤(LM)及其对CTX的减毒作用。方法 建立LM荷瘤小鼠模型, 实验分对照组、CTX、不同浓度E838组、不同浓度E838+CTX组, 比较各组间的差别。结果 所有E838治疗组瘤重明显小于对照组, 联合用药组各项实验指标均好于CTX组。结论 E838对LM有抑制作用, 并对CTX有增效及提高机体免疫作用。
关键词：E838    抗肿瘤    环磷酰胺    协同作用    IRM-2小鼠    
Studies of Reducing Poison and Increasing Effects of E838 on Immune Function of Tumor-Bearing Mice
WANG Yue-ying , LI De-guan , WU Hong-ying , et al     
Institute of Radiation Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, Tianjin Key laboratory of Molecular Nuclear Medicine, Tianjin 300192 China
Abstract: Objective To observe the inhibitory effect of E838 combined with cyclophosvnamide (CTX) on lymphoma (LM), and the E838 reducing poison influence to CTX.Methods the mice with LM were separated into 8 groups treated with control, different E838 concentration, different E838 concentration combined with CTX, CTX.The therapy effects in each group were compared.Results The tumor weights in all E838 treated groups were significantly lower than that of control group.All indexes in combination groups were better CTX group.Conclusion E838 showed inhibitory effects on LM, could increase CTX therapy effects and elevate mice immune system function.
Key words: E838    Tumorinhibitory Effects    CTX    Synergistic Effects    IRM-2 Mouse    

恶性肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能降低密切相关。目前, 化疗仍是对恶性肿瘤较为有效而又普遍使用的一种治疗方法。然而众多的抗肿瘤化学药物也是免疫系统的抑制剂。最常见的不良反应就是剂量依赖性的骨髓抑制。E838是一种新型辐射防护剂, 在以往我们进行的药效学实验已证实:E838具有放射防护效价高[1]、毒副作用小的特点, 能显著提高受照射小鼠30d存活率和保护指数[2], 具有提升白细胞作用, 本试验按照国家一类新药报批要求[3], 利用IRM-2荷瘤小鼠作为肿瘤模型, 进一步观察E838单独用药及联合化疗药物CTX对荷瘤小鼠的抑瘤增效作用及对免疫、造血功能的影响, 为E838在肿瘤化疗中的作用提供实验依据。

1 材料和方法 1.1 实验材料

动物及瘤株, 由我所自己培育的IRM-2近交系小鼠, 雌雄兼用, 体重为26~27g。细胞株为IRM-2小鼠自发淋巴瘤(LM)。

1.2 试剂

用注射茶油将E838配制成低、中、高(5、7.5、10mg/kg)剂量组。环磷酰胺(CTX)为江苏恒瑞医药股份有限公司产品, 批号06022221, 用生理盐水配制成25mg/kg剂量。

1.3 实验方法 1.3.1 建立动物模型

选择肿瘤生长良好且无溃破的IRM- 2荷瘤小鼠, 无菌条件下取出肿瘤, 用生理盐水按1:3比例制成细胞悬液, 每只小鼠前肢腋窝下皮下接种0.2m1, 随机分8组, 每组10只。设对照组, 单独给药组, 单独化疗组, 化疗加给药组, 24h后开始给药, 1次/d, 连续7d, 单独化疗和化疗加给药组, 同时腹腔注射化疗药, 隔日1次, 共4次。

1.4 观察指标 1.4.1 肿瘤体积

每日称体重, 测量肿瘤体积, 根据公式V= ab2/2(a-长径, b-短径)计算体积。实验第11天时处死小鼠, 剥离瘤体测瘤重、计算抑瘤率、胸腺和脾指数、观察生存期。

1.4.2 骨髓有核细胞计数

取小鼠单侧股骨, 冲洗骨髓腔, 收集骨髓细胞制成悬液, 用台盼蓝鉴定细胞活性在95%以上, 计数骨髓有核细胞数。

1.5 统计方法

根据金氏公式评价协同效果[4], q=EA+B (实测合并效应)/EA+EB-EA·EB(预期合并效应), EA、EB为A、B两药单独用时产生的效应; EA+EB为A、B两药联合应用时产生的效应, q值为0.85~1.15, 两药合用作用单纯相加; q值大于1.15, 两药合用作用增强; q值小于0.85, 两药合用作用互相拮抗。数据统计结果用x±SD表示, 两组比较用t检验。

2 结果 2.1 E838对荷瘤小鼠的抑瘤作用结果(表 1)
表 1 E838、E838+Cy对小鼠LM生长的抑制作用

E838(低、中、高)的抑瘤率分别为38.78%、46.51%和42.09%, CTX为61.73%, 与对照组比较差异有显著性(P＜0.001), E838+CTX各组的抑瘤率分别为81.68%、82.7%和82.14%, 与对照组和CTX组比较差异有显著性(P＜0.001)。q值分别为1.07、1.04和1.06, 与CTX合用有相加作用。E838各组荷瘤小鼠平均生存期高于对照组, 但差异没有显著性。E838+CTX各组均高于对照组差异有显著性(P＜0.001), E838+CTX低剂量组平均生存期高于单用CTX组, 较差异有显著性(P＜0.05)。

2.2 E838对荷瘤小鼠的生命延长率结果见(图 1)
图 1 荷瘤小鼠的生命延长率

E838、E838+CTX各组荷瘤小鼠生命延长率均高于对照组, E838+ CTX各组荷瘤小鼠生命延长率高于CTX组, E838(低)+CTX组效果最好, 生命延长率达50%。

3 讨论

化疗已成为晚期恶性肿瘤患者最重要的治疗方法之一, 但是化疗药物的毒、副作用却是限制化疗药物的用量、阻碍疗效发挥的障碍。降低化疗药物的毒、副反应, 提高肿瘤患者的免疫功能, 充分发挥化疗药物的治疗作用, 日益成为国内外专家学者研究和努力的方向[5、6]。

我们的实验证明, E838在一定剂量范围内, 能明显抑制IRM -2荷瘤小鼠淋巴瘤的生长, 在抑瘤的同时, 对小鼠造血功能有促进作用。E838治疗各组BMNC的数量均高于对照组和CTX组, 差异有显著性(P＜0.001);荷瘤小鼠的体重均有所增加, 而CTX组小鼠体重明显减轻。说明E838除对肿瘤细胞的生长有抑制作用外, 对小鼠的免疫器官无明显损害, 有促进荷瘤小鼠机体恢复、改善荷瘤小鼠免疫功能的作用。这也体现了E838治疗肿瘤毒副作用小于化疗药的优势之一。

E838与化疗药物联合应用时抑制作用加强, 可明显恢复化疗所引起的免疫功能低下, 并能协同化疗药物提高疗效, 其抑瘤率高于单独使用CTX, 抑瘤效果呈相加作用, 并能延长荷瘤小鼠的存活时间, 从而提示E838与CTX联合应用将对于提高化疗疗效、减轻大剂量化疗的毒副作用和进一步提高肿瘤的治愈率和延长患者的生存期、提高患者生存质量具有十分重要的指导意义。

参考文献
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李秀娟, 刘福英, 毛宇湘, 等. 复肝春6号对荷H22小鼠抑瘤作用的实验研究[J]. 中国比较医学杂志, 2006, 16(2): 107-110. DOI:10.3969/j.issn.1671-7856.2006.02.012
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李墨林, 李传刚, 舒晓宏, 等. 荷EIA肿瘤小鼠模型的建立及美法仑抑瘤作用免疫机制的探讨[J]. Chin J Cell Mol Immuno1, 2006, 22(2): 235-238.
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于洪升, 费从合, 沈方臻, 等. 低剂量辐射联合环磷酰胺对肿瘤细胞凋亡、细胞周期以及骨髓增殖的影响的治疗研究[J]. 中华放射医学与防护杂志, 2004, 24(2): 117-119. DOI:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2004.02.009