苦豆子总碱有抗心律失常、抗病毒、抗肿瘤等作用。前期研究表明, 苦豆子总碱对急性辐射小鼠有一定保护作用, 本研究探讨苦豆子总碱对低剂量照射小鼠的辐射防护效应。

1 材料与方法 1.1 材料

试验药物苦豆子总碱注射液购自绿谷制药有限公司; 黄芪注射液由成都地奥制药集团生产。MDA(丙二醛)测定试剂盒、SOD(超氧化物歧化酶)测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品; ⁶⁰Co源购自加拿大原子能研究院。昆明种小鼠120只, 雌雄各半, 体重(28 ±2) g, 由军事医学科学院实验动物中心提供。

1.2 照射条件

⁶⁰Co治疗机对小鼠进行全身均匀低剂量间断照射119d, 累计吸收剂量为3.11Gy。

1.3 方法

小鼠随机分为苦豆子总碱低、中、高3个剂量组及黄芪对照组、阳性对照(单纯照射)组与正常对照组。每组20只高、中、低3个剂量组腹腔注射苦豆子总碱1、3、5mg /kg, 腹腔注射黄芪注射液的剂量为8g /kg, 正常对照组和照射对照组腹腔注射生理盐水, 剂量均为0.1ml /10g。照射对照组、各用药组小鼠在给药的同期采用⁶⁰Coγ射线低剂量间断照射119d, 累计吸收剂量为3.11Gy。末次照射后第2天将全部小鼠处死, 检测有关指标:体重:在实验开始和结束时各测体重一次, 计算各组小鼠体重变化值。免疫器官脏器指数:处死小鼠后, 解剖各组动物, 电子天平称取脾脏和胸腺重量, 采用脾指数及胸腺指数表示(mg /10g)。血清SOD活力及肝组织匀浆中MDA含量:末次照射后第2d, 采用小鼠眶动脉和眶静脉取血法, 取鼠血并沉淀血清, 用黄嘌呤氧化酶法测定血清中SOD活力; 实验结束制备鼠肝组织匀浆, 采用硫代巴比妥酸比色法检测肝匀浆中MDA含量。

2 结果 2.1 体重变化

照射前各组小鼠体重差异无统计意义, 实验结束时各组小鼠体重均呈现不同幅度的增加, 但照射各组小鼠体重均低于正常对照组, 而苦豆子总碱组体重高于阳性对照组, 见表 1。

2.2 对受照小鼠免疫器官的影响

照射后小鼠脾脏及胸腺萎缩, 苦豆子总碱有提高脾指数及胸腺指数的作用, 其中高剂量用药组此作用表现最为明显, 见表 2。

2.3 血清

SOD活力和肝匀浆MDA含量小鼠受照后SOD活力下降, 而黄芪组及苦豆子总碱中、高剂组SOD活力虽然呈现不同程度地下降, 但与阳性对照组相比, 酶活力仍维持在较高的水平(P < 0.05);正常对照组和阳性对照组小鼠的MDA含量差异有显著性; 同阳性射照组相比, 苦豆子总碱三个剂量组小鼠的MDA水平均有不同程度的降低, 提示苦豆子总碱对受照小鼠的脂质过氧化反应有一定的抑制作用, 见表 3。

3 讨论

电离辐射可使体内所有生物分子电离激发、化学键断裂, 并生成大量的自由基, 诱导生成脂质过氧化物^{[1, 2]}, 进一步造成DNA链断裂, 染色体畸变, 使机体出现各种损伤, 引起突变, 诱发肿瘤, 造成早衰和寿命缩短等现象^{[3, 4]}。MDA是脂质过氧化物的分解产物, 其含量反映了机体细胞受自由基攻击的程度, SOD可催化超氧阴离子发生歧化反应, 其酶活力的高低间接反映机体清除氧自由基能力的大小。本次研究显示阳性对照组血清SOD水平降低、肝匀浆中MDA含量增高, 表明照射后小鼠体内产生氧化损伤, 脂质过氧化物的体内蓄积量增大。苦豆子总碱组的脂质过氧化损伤的程度虽均高于正常对照组, 但比阳性对照组明显降低, 且有剂量反应关系, 说明苦豆子总碱对辐射引发的脂质过氧化损伤有良好的抑制作用。

辐射所致的免疫功能改变是放射损伤的主要表现之一。在实验中我们发现, 照射对照组小鼠脾脏指数及胸腺指数均明显低于正常对照组^[5]。但是, 经苦豆子总碱腹腔注射给药后, 上述指标明显高于阳性对照组, 提示苦豆子总碱对照射损伤后免疫系统的恢复有促进作用。结果还表明, 经⁶⁰Coγ射线照射后, 阳性对照组小鼠体重增加值明显低于正常对照组, 说明低剂量辐射影响了动物的生长发育, 而苦豆子总碱组小鼠体重增加幅度虽然小于正常对照组, 但明显高于阳性对照组。综合本次实验结果可见, 经辐射后动物发生明显损伤, 其免疫器官脏器指数、MDA、SOD等指标均出现异常, 而应用苦豆子总碱的小鼠虽然也受到损伤, 但损伤程度明显低于阳性对照组, 且与苦豆子总碱有明显的剂量-反应关系, 可以认为苦豆子总碱可以减轻低剂量间断辐射小鼠鼠的损伤效应。