中国辐射卫生  2007, Vol. 16 Issue (1): 31-33  

引用本文 

姚贞久, 戴洪修, 韩德义, 杨定才, 李达兵. 血余炭栓塞犬肾动脉的病理组织学改变[J]. 中国辐射卫生, 2007, 16(1): 31-33.
YAO Zhen-jiu, Dai HONG-xiu, HAN De-yi, et al. Histopathologic Manifestationof Crinis Carbonisatusparticulates (CCP) Asa Vascular Embolization Agentby Animal Experiment[J]. Chinese Journal of Radiological Health, 2007, 16(1): 31-33.

基金项目

湖北省科技项目(No.EK050657)

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收稿日期：2006-06-13
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血余炭栓塞犬肾动脉的病理组织学改变
姚贞久 1, 戴洪修 2, 韩德义 3, 杨定才 1, 李达兵 4     
1. 宜昌市中医院, 湖北 宜昌 443003;
2. 三峡大学第一临床医学院暨宜昌市中心人民医院;
3. 秭归县医疗中心;
4. 宜昌市中心人民医院
收稿日期：2006-06-13
基金项目：湖北省科技项目(No.EK050657)
作者简介：姚贞文(1966~), 男, 湖北宜昌人, 主治医师从事放射诊断和介入治疗工作.
摘要：目的 观察中药血余炭栓塞犬肾动脉的病理组织学改变, 为介入治疗提供实验依据。方法 将中药血余炭磨制成200~500μm大小的颗粒, 超选栓塞部分末稍动脉血管。栓塞术后第7、14和56天分别处死1、2和3号犬, 取出双肾固定, 制作病理标本。结果 栓塞术后第7天, 肉眼见栓塞部分肾脏缩小, 切面末梢血管内有栓塞剂; 镜下见血余炭栓塞剂附着于血管壁伴血栓形成; 栓塞术后第14天, 炎性反应明显, 并有少量出血, 血管壁炎性坏死, 血栓逐渐机化。栓塞术后第56天见栓塞部分肾脏明显缩小, 有大面积的缺血性梗死; 镜下见血栓完全机化, 栓塞组织呈缺血性梗死, 栓塞血管有少量再通。结论 血余炭栓塞的病理过程为:血余炭附着血管壁, 诱发血栓形成, 血栓机化, 血管壁炎性坏死管腔闭塞, 栓塞组织缺血性梗死。
关键词：中药    血余炭    动物实验    血管栓塞    组织病理学    
Histopathologic Manifestationof Crinis Carbonisatusparticulates (CCP) Asa Vascular Embolization Agentby Animal Experiment
YAO Zhen-jiu 1, Dai HONG-xiu 2, HAN De-yi 3     
Sanxia University First Clinical Medicine College, Yichang 443003 China
Abstract: Objective The purpose of this study is to evaluate the histopathologic manifestation of Crinis Carbonisatus particulates (CCP) as a vascular embolization agent by animal experiment. Methods A Chinese medicine product, Crinis Carbonisatus was made into particulates with a size 200 to 500μm in diameter.These CCPs were delivered into arterioles in left kidneys of three domestic dogs through 4F Cobra cathter under fluoroscopy.A super selective renal artery embolization was performed in 3 dogs by using these materials.Their six kidneys were removed and prepared for pathological examination and histopathologic study of 3 dogs were performed at different intervals within 8 weeks after embolization (7th, 14th, 56th, days). Results All 3 dogs well tolerated the anesthetic and endovascular procedures.On examination of the gross kidney speciments, thrombosis of the renal arterioles was noted.During the 8 weeks after embolization, a progressive, marked decrease in renal size occurred.Histopathologic evaluation conformed satisfactory of peripheral arteries.Acute or cheronic inflammatory cells were observed in several vessels containing CCP microparticles.The occlusion of vessels by CCP lasted at least for 8 weeks when a little recanalization was observed in the target tissue. Conclusion In the embolization mechanism, CCP attached to intima of target vessels firstly, induced thrombosis and a severe form panarteritis.Organization of the thrombos then took place and a complete occlusion of the vessels occurred, leading to severe ischemia as infaction of embolized area.
Key words: Chinese Medicine    Crinis Carbonisatus    Animal Experiment    Vessels Embolization    Histopathology    

目前已运用的栓塞材料种类繁多,各有优缺点[1~9]。中药 血余炭[9]品性温和,毒副作用小,容易制取。经文献检索,血 余炭作为血管栓塞剂在国内外未见报道。本研究为中药血余 炭作为血栓剂的动物实验,观察中药血余炭栓塞犬肾动脉的病 理组织学改变,为介入治疗提供实验依据 。

1 材料与方法 1.1 实验材料与仪器

实验犬三只, 体重13kg、15.5kg和18kg, 由华中科技大学同济医学院动物实验室提供。自制血余炭栓塞剂300mg, 在湖北省宜昌市中医院中医制剂室炮制(0. 457~0.813mm)(0.018~0.032英寸)导丝, 4FCobra导管。造影剂, 60%复方泛影葡胺注射液。病理试剂, 上海化学试剂制品厂生产。日本产BX50显微图像摄影仪。XB403型500mA胃肠机。

1.2 余炭栓塞剂的制作

本实验参照实用中药辞典[9]中血余炭的炮制方法, 稍作改进。血余炭煅制成黑色胶宽块状, 再磨成200~500μm大下的粉剂[图 1]。装入安瓶并封口。在医院供应室, 10lb(约668.6kPa)/cm2高压蒸气灭菌30min, 备用。

图 1  
1.3 实验动物与动物麻醉

雄性犬三只, 体重分别为13kg、15kg、18kg, 平均15.3kg.先进行动物麻醉。①麻醉前准备:狗禁食12h。②麻醉前用药, 给予阿托品0.01mg×1.88/kg体重, 鲁米那0.02mg×1.88/kg体重。本研究采用腹腔给药麻醉法, 麻醉诱导采用氯胺酮9.5mg/kg肌注, 麻醉维持采用硫贲妥钠5mg/kg腹腔注射。

1.4 肾动脉栓塞的动物实验手术过程

常规备皮、消毒:剪掉右腹股沟毛须; 暴露皮肤约4cm×5cm范围; 用活力碘消毒。铺一次性消毒孔巾和大单。Seldinger穿刺, 定位取点后在右腹股沟行小切口, 用18G空心针穿刺有股动脉。置鞘, 插入4Fcobra导管, 在0.183mm(0.032英寸)导丝引导下, 超选至左肾的上段或下段动脉。插管均顺利。于靶血管内注入自制的血余炭颗粒(约200~500vm), 每肾注入剂量约3mg。血余炭颗粒均以生理盐水加60%泛影葡胺混合, 浓度约为1mg/1ml。在短时间内, 血余炭粉剂不能溶解和混悬, 颗粒大小无膨胀改变。推注时在导管和血管内不能显示血余炭颗粒(500mA普通胃肠机); 因血余炭质量太小, 推注要用一定的压力和速度。在X射线透视下缓慢注入, 直至造影剂速度减慢或靶血管朔形。3只犬双肾均摄取血管造影和栓塞图象(图 2图 3)。

图 2 双肾动脉栓塞术

图 3 栓塞后14d，肾脏明显缩小右肾PVA，左肾血余炭颗粒见之于肾脏末稍血管
1.5 动物处死和取出双肾

三只犬分别于栓塞后第7、14、56d处死。用急性失血法处死动物后, 剖腹取出双肾。取出双肾用10%福尔马林液固定, 制作组织标本16个(图 2), 常规石蜡包埋、HE染色切片63张, 最后用树胶封片。切片由两位病理医生使用普通光镜观察、诊断, 并用BX50显微图像摄影仪分别摄取不同时间处死的三只犬左肾的组织学图象(10~40倍)见图 4图 5

图 4 栓塞后7d血余炭沉着, 血栓形成

图 5 栓塞后56d残存的血管腔内血余炭栓塞剂被机化
2 结果

组织病理表现:1号犬左肾大体标本5.3cm×3.5cm×3. 0cm, 栓塞部位表面见针尖至粟粒大小灰白结节数个, 切开肾皮质、肾髓质、肾盂, 未见明显异常。镜下见小动脉腔内有血余炭附着并血栓形成(血小板、红细胞构成), 肾小管上皮细胞轻度水肿。

2号犬(14d)左肾大体标本7.2cm×3.5cm×3.0cm, 栓塞部位表面凹凸不平, 可见0.2cm至2.5cm类圆形灰白结节。切开肾皮质、肾髓质、肾盂, 见肾上极4.0cm×3.5cm坏死灶, 周围呈灰白或灰黄色, 中心区域呈灰褐色, 似豆渣样。镜下见肾小球、肾小管呈灶状坏死, 周围有大量单核细胞、中心粒细胞。部分动脉血管内有血余炭沉积; 血管周围见纤维母细胞增生及数目不等的中心粒细胞(即增殖性血管内膜炎及血管周围炎); 毛细血管扩张、充血; 肾间质内有大量脓细胞。

3号犬(56d)左肾大体标本6.0cm×4.5cm×3.2cm, 栓塞部位表面呈颗粒状及结节状, 其上有粟粒至黄豆大小的灰白区域。切开肾皮质、肾髓质、肾盂, 切面见肾乳头似有增粗, 呈灰红色。血管腔内有少量血余炭沉积, 血管外膜纤维母细胞增生, 其上有少量淋巴细胞、多核异物巨细胞浸润。栓塞血管腔有少量再通现象, 血管周围有大量的肉芽组织增生。

3 讨论

血余炭化学成份[1]:头发含胱氨酸(Cystine)是角蛋白的一种, 此外, 含有脂类。炮制后血余炭主要为碳素, 既可制成栓塞颗粒, 也有可能消除血余炭的抗原活性。当肾末梢动脉被血余炭阻塞时, 局部组织立即陷于缺氧, 而其所属微血管通透性增高, 病灶边缘侧支血管内的血液可通过该通透性增高的微血管壁逸出于血管外, 由于肾组织致密, 出血量不多。出血的红细胞崩解后, 血红蛋白溶于组织液被吸收, 故梗死灶呈灰白色。在梗死的早期, 梗死灶的周围有明显的充血和出血, 形成暗红色出血带(图 2, 3), 数日后该出血带内的红细胞已被巨噬细胞吞噬后转变为含铁血黄素, 出血带遂变为褐黄色。镜下, 早期的梗死灶内尚见核固缩、核碎裂和核溶解等变化, 细胞浆则均匀一致。

本实验证明血余炭栓塞后血管再通时间为8周, 而起证实了血余炭栓塞机理与中药白芨和PVA相仿[2-5]:栓塞剂进入末稍动脉, 附着于血管壁, 诱发血栓形成(图 3), 管壁呈纤维素样坏死; 在2周左右, 血栓开始机化, 管壁及其周围炎性反应明显, 出现梗死灶和继发脓肿, 血管腔完全闭塞, 在8周左右, 血栓机化(图 4), 梗死灶机化和瘢痕形成, 血管壁呈慢性炎症表现, 闭塞血管腔少许再通。表明血余炭栓塞的病理过程为:血余炭附着血管壁, 诱发血栓形成, 血栓机化, 血管壁炎性坏死, 管腔闭塞, 栓塞组织缺血性梗死, 闭塞血管腔少许再通。

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