降钙素基因相关肽(calcitionin gene related peptide, CGRP)作为一种舒血管物质和神经递质在体内作用广泛。本研究旨在通过测定大鼠心脏移植受者血浆中CGRP的水平, 探讨CGRP与移植急性排斥反应之间的关系。

1 材料和方法 1.1 移植模型的建立 1.1.1  

实验动物健康近交系Wistar大鼠为供体, SD大鼠为受体, 体重180~250g, 雌雄不限。上述动物分别由山东省实验动物中心和山东大学实验动物中心提供。

1.1.2 实验分组

本实验共分2组。对照组:SD大鼠32只, 不行移植, 实验中仅作为正常对照。实验组:共28例, 近交系Wistar大鼠为供体, SD大鼠为受体, 采用大鼠颈部心脏移植模型, 将供心的无名动脉和肺动脉分别与受体的右颈总动脉和右颈外静脉行套管法连接, 将供心移植于受体的右颈部。移植心脏在1min内自动复跳或由室颤转为正常心搏, 膨胀的心脏迅速缩小, 并由充盈时的紫红色转为正常颜色。术后不用免疫抑制剂等。

1.2 标本采集

实验组移植后第3天至排斥终末, 处死受体大鼠, 自大鼠腹主动脉取血液3ml, 注入含EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl的试管中, 混匀, 4℃3000rpm离心10min, 分离血浆, -20℃密封保存待测。对照组直接处死大鼠取血样。

1.3 CGRP测定方法

采用放射免疫分析(RIA)法, CGRP药盒由中国人民解放军总医院放免研究所提供, 实验步骤严格按说明书进行。测量仪器为西安二六二厂产FJ2003型全自动γ免疫计数器。

1.4 数据处理方法

全部数据均用x±S表示, 采用t检验。

2 结果

SD大鼠和Wistar大鼠之间进行心脏移植, 其排斥反应的发生常比较迅速和剧烈, 移植心脏的平均存活时间为(7.21±2. 36)d。在排斥终末时取下移植心脏, 大体观察见移植心脏体积增大明显, 大小为移植前的数倍, 心肌明显增厚、充血、水肿, 移植心脏周围有明显的渗出。正常对照组和实验组血浆CGRP含量检测结果:见表 1。

结果表明, 心脏移植急性排斥反应组血浆CGRP水平明显低于正常对照组(P < 0.05)。

3 讨论

目前认为心内膜心肌活检术(EMB)是诊断移植心脏排斥反应唯一的方法^[1]。但EMB是一种有创检查, 频繁施行会给患者的身心带来极大的负担, 尤其对术后早期患者。因而, 寻求更方便、更敏感的非侵入性手段以减少EMB的应用是非常必要的。

CGRP是在人和哺乳动物内发现的一种神经肽, 广泛分布于神经系统、心血管及肺组织中, 是目前已知最强的舒血管物质, 对心血管系统有着重要的调节作用^[2]。CGRP升高时, 血管处于舒张状态, 静脉注入CGRP可使血压下降, 外周血管阻力降低^[3]。本组结果显示, CGRP在心脏移植急性排斥时明显降低。组织切片可见移植心脏大量的炎性细胞浸润和心肌细胞的变性坏死, 血管内皮细胞肿胀, 内膜水肿、破坏, 有的小血管内可见到血栓形成。说明移植心脏急性排斥反应与血浆CGRP水平存在密切关系, 故可以通过血浆CGRP的浓度变化, 推断移植心脏急性排斥反应的存在, 至于移植心脏急性排斥反应时血浆CGRP降低机理有待于进一步探讨。