职业茶饮4号是专为放射作业职工开发研制的复合茶饮料, 为观察其辐射防护作用, 我们进行了小鼠X射线一次全身照射实验研究。

1 材料和方法 1.1 材料

(1) 职业茶饮4号, 自制, 由绿茶加精选的各类中药材组成, 绿茶选用山东浮来青茶厂生产春茶, 其他中药材购于济南建联中药店, 均于40℃烘干6 h, 粉碎过40目, 按比例混合。(2)动物:健康雄性昆明种小鼠45只, 由山东大学实验动物中心提供, 重20 ±2 g, 鼠龄6~8周。(3)照射条件, 使用西门子X射线治疗机, 照射源距小鼠100 cm, 射野为30 cm ×30 cm, 各组总吸收剂量为6 Gy, 吸收剂量率为2 Gy/min, 一次性全身照射。(4) T细胞亚群检测试剂盒由军事医学科学院生物制剂发展中心生产。

1.2 方法

实验小鼠适应性喂养3 d, 称重随机分成3组, 每组15只。①组正常对照组, 不照射, 自由饮食。②组放射模型组:实验第4天(T4)给予一次性X射线照射, 自由饮食。③组茶饮实验组:与②组同条件X射线照射, 实验全程给予职业茶饮4号, 用量按成人日常用量的10倍计算, 每日给予2.0 mg/g体重, 组量加水煮沸, 浓缩至100 ml, 纱布过滤, 每日新鲜配制。每日观察并记录各组小鼠的生存情况。每3 d测体重一次, 调整给茶饮量。T6、T12分两次尾静脉取血, 测白细胞(WBC)、血小板(PLT)。T15称重, 摘眼球取血, 肝素(25 U/ ml)抗凝, 用单克隆抗体APAAP法测定T-C亚群。

统计学处理:采用PEMS统计软件进行χ²、F分析。

2 结果与分析 2.1 小鼠生长情况

① 组小鼠活跃, 毛发光泽, 食欲好, 无脱毛及腹泻现象, 实验末全部存活。②、③组小鼠照射前无异常反应, ③组体重增长略快, 照射后②组小鼠明显倦怠、活动减少、行动迟缓、食欲减退、厌食、皮毛粘滞、脱落、腹泻或稀便, 死亡7只。③组小鼠上述反应明显减轻, 仅表现倦怠, 食欲减退, 且照射3 d后逐渐恢复, 无毛发脱落或腹泻现象, 死亡3只。两组15 d存活率分别是53.3%(8/15)和80.0%(12/15), 两者差异有显著性。各组体重变化见表 1。实验开始(T0)各组小鼠体重无差异, F=0.1482, P=0.8627, 照射后②③组均有下降, 茶饮组下降程度较小, 且恢复较快; 实验末3组小鼠体重差异均有非常显著性, F=35.38, (P < 0.01)。

2.2 血细胞结果分析

照射后, 小鼠外周血WBC、PLT急骤下降, 10 d后仍不能恢复, 而饮用茶饮组白细胞下降幅度明显减小, 复升较快, 方差分析, 差异均有非常显著性。见表 2。

2.3 免疫指标分析

放射致免疫损伤首先表现为细胞免疫损伤, 而T-C亚群正是反映细胞免疫的敏感指标。T15, 摘眼球取血, 观察小鼠总T细胞(CD₃)、辅助T细胞(CD₄)、抑制T细胞(CD₈)的百分比、CD₄与CD₈比值。见表 3。结果表明, X射线照射可使小鼠T-C亚群明显异常, 主要表现为辅助T细胞(CD₄)下降, 而抑制T-细胞(CD₈)不下降, 进而导致总T细胞及CD₄/CD₈比值下降, 免疫功能紊乱, 而茶饮实验组CD₄与放射组比较明显升高, 差异有非常显著性, CD₄/CD₈可维持正常, 说明茶饮有很好的免疫保护作用。

3 讨论

辐射对生物体造成的损伤主要是细胞DNA损伤、生物膜损伤、免疫功能损伤和造血功能损伤。T淋巴细胞是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群, 在正常情况下, 各类T-淋巴细胞亚群相互作用, 维持着机体的正常免疫功能, 当不同亚群的数量和功能发生异常时, 就可导致机体免疫紊乱而产生一系列病理变化, 因此T淋巴细胞亚群的检测是反映机体免疫功能的重要指标。辐射对造血系统的影响, 最敏感的是白细胞, 其次是血小板, 红细胞相对不敏感, 因此我们选择外周血WBC、PLT作为反映造血功能指标。

本研究结果表明:职业茶饮4号具有明显的抗辐射效应, 能显著改善小鼠受照引起的生长发育迟缓、胃肠道反应, 提高存活率, 减少机体免疫、造血功能损伤, 并促进其辐射反应的恢复。职业茶饮4号组方中以绿茶、绞股蓝、黄芪等为主要成分, 文献表明^[1~5], 其有效药理成分绿茶多酚(GTP)、绞股蓝多甙、黄芪总黄酮、黄芪多糖等活性物质均有很强的清除自由基、保护细胞膜、抗氧化、调节免疫功能等作用, 复配后兼具益气固表, 补肝益肾, 扶正固本等功效, 综合抗放射效应大大增强。