淋巴细胞微核率检查同染色体畸变检查一起被认为是两个比较敏感的生物学指标。实验结果表明, 在一定的剂量范围内, 微核发生率与剂量间呈明确的剂量效应关系^{[1, 2]}, 不同的剂量对受照动物外周血淋巴细胞微核率引起不同的影响。

1 实验方法 1.1 动物

雄性健康新白玉兔5只, 体重2000 ±20g, 由山东省实验动物中心提供。在兔背6×8cm²面积内常规脱毛, 饲养2 ~ 3d后, 脱毛区确无损伤方可接受⁶⁰Co γ射线照射。

1.2 照射条件

每天受照剂量为3.3 × 10^-3Gy, 共计照射134d, 累积剂量为0.442Gy, 累积剂量为0.221Gy之前, 采血一次, 最终采血时累积剂量为0.442Gy。

1.3 标本制备

取上述家兔静脉血0.3ml, 肝素抗凝, 每瓶培养液内含RPM I 1640培养基4ml, 小牛血清1ml, PHA 500μg, 肝素0.1ml(含500国际单位/ml), 用3.5%碳酸氢钠调PH至7.2, 将培养液摇匀后置37℃培养箱孵育72h, 细胞培养终止后, 以常规法低渗固定, 空气干燥, CTiemSa染色, 镜检。

1.4 微核判定标准

每例标本在油镜下计数1000个胞体完整已转化的淋巴细胞, 记录有微核的细胞, 判定微核的标准同文献[3]报道的方法, 所有阳性细胞均由两人以上观察鉴定。

2 结果

⁶⁰Co不同剂量照射对家兔外周血淋巴细胞微核的影响, 结果见表 1。

从表 1可见, 随着受照剂量的增高, 微核率相应增高, 受照剂量为0.221Gy前, 微核率变化较小, 各剂量段间差异无显著性(P > 0.05), 受照剂量超过0.221Gy后, 微核率变化明显, 各剂量段间差异有显著性(P < 0.05), 受照剂量达0.442Gy时, 与各剂量段间差异有非常显著性(P < 0.01)。

据文献[4]报道, 随着受照剂量的增加, 微核率明显增高的同时, 家兔将发生病理组织学改变。兔背部皮肤受照剂量达到16.2Gy时, 家兔皮肤出现局部充血及散在丘疹; 当累积剂量达21.9Gy时, 家兔皮肤则出现明显的充血及小丘疹。放射性皮肤癌潜伏期很长, 约20年左右, 当累积剂量为45Gy时, 表皮底层细胞排列不规则, 细胞增大, 核深染及轻度异型性变等, 恶变灶在此基础上发生。