重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)是应用重组D NA技术所生产, 其基本原理是将人类粒细胞集落刺激因子的基因插入大肠杆菌内, 使大肠杆菌生产人类G-CSF, 临床主治急性粒细胞减少, 造血功能障碍等症。本实验观察了该药对小鼠受60Co照射所致造血损伤的影响, 现报告如下。
1 实验材料 1.1 动物C57小鼠, 体重20 ±2g, 购于中国医科院动物中心。
1.2 药物实验用G-CSF由济南金鲁生物工程公司提供.阳性对照品G-CSF, 美国安进公司生产。
2 方法与结果 2.1 静脉注射G-CSF对60Co照射致小鼠白细胞降低的影响。
取C57小鼠50只, 雌雄各半, 取血测其白细胞计数及分类作为药前值, 按白细胞计数随机分为5组, 每组10只, 将5组小鼠均用60Co放射源一次性照射、照射剂量6.5Gy(剂量率0.402Gy/min)。照射后各组分别静脉注射G-CSF120, 48, 12μg/kg, 阳性组48μg/kg, 对照组注射等容积的溶媒, 每日一次, 连续15天, 给药后第10天, 15天取血测其白细胞计数及分类, 停药后24小时处死各组动物, 取脾称重计算其系数, 脾脏置于Bouin氏液中固定24小时后, 取出用自来水冲洗24小时, 然后计脾表面造血灶(CF U-S)数, 取一侧完整的股骨, 计数其骨髓有核细胞数, 结果见表 1、表 2。
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表 1 对60Co照射所致小鼠白细胞, 中性粒细胞数减少的影响(×109/L) x±s |
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表 2 对60Co照射所致小鼠CF U-S骨髓有核细胞计数等的影响x±s |
结果表明:G-CSF120 48μg/kg及阳性组对60Co照射所致白细胞、中性粒细胞下降有明显的升高作用(P＜0.05), 在此剂量下可使骨髓有核细胞总数、脾表面造血灶及脾脏系数与对照组比较均有明显升高(P＜0.05)。实验结果表明:静脉注射G-CSF能刺激白细胞, 中性粒细胞的生长, 使其成熟细胞数目增多, 对辐射所致小鼠白细胞、中性粒细胞降低起到了促进恢复的作用。
3 讨论G-CSF与干细胞表面的特异受体相结合后, 刺激干细胞的生长和分化, 并能刺激嗜中性粒细胞系列的功能, 其主要作用于中性粒细胞系的原始细胞增殖与分化, 选择性地刺激血终未细胞的功能。本实验表明, G-CSF对60Co辐射所致小鼠的白细胞计数中性粒细胞总数骨髓有核细胞计数, CF U-S, 脾脏系数降低均有明显升高作用。