近年来新近发展起来的次黄嘌呤—鸟嘌呤转磷酸糖基酶位点(HPRT)检测是一种快速、灵敏测定人体细胞突变的方法，人体外周血淋巴细胞中抗6-硫代鸟嘌呤(6-TG)突变体是在HPRT基因位点上的突变细胞，具有稳定的6-TG表型。当胞体中HPRT基因改变时，通过检测人体外周血中抗6-TG细胞出现的频度，就可确定体细胞的突变频度。1988年Norman等^[1]建立的一种既能测T细胞、又能测B细胞松弛素B (CB法)的简便方法。即利用CB阻断胞质分裂、使6-TG具有抗性的突变体在72小时培养中形成双核或多核细胞，测定其含双核或多核细胞数，就可了解体细胞的突变频度。现把测定30例献血员的HPRT值报道如下：

1 材料与方法 1.1 血样的采集和培养

血样采取济南市血站的30例健康成人献血员，平均年龄30.6岁(22~40岁)，男女比例为16: 14。每例采集1ml肝素抗凝血，接种两瓶，每瓶0.3ml血接种在含有3ml培养基中(80% RPMI1640, 20%小牛血清，适量肝素和PHA, pH7.2), 其中一瓶加入0.1ml×10^-6mol浓度的6-TG。置37℃恒温培养至32小时时，每瓶加入浓度为60μg/ml的细胞松弛素B (CytochalasinB)工作液0.3ml, 使CB终浓度为6ng/ml, 混勻后继续培养72小时。终止培养后，吸去上清液，加入预温至37℃的0.15M KC14ml, 混勻，立即加入lml新配制固定液(甲醇：冰醋酸=3:1)，混勻后置37℃恒温10分钟。1500转/分，离心8分钟，弃上清液后加入固定液5ml, 固定20分钟，离心，再反复固定一次，离心，弃上清液，加入0, 2ml固定液，混勻，滴入预冷的冰玻片上，待干后，Giemsa染色。

1.2 阅片与统计

每例计数2000个转化淋巴细胞(包括加6-TG和不加6-TG的各1000个转化细胞)在同一胞浆内具有完整核膜的双核或多核淋巴细胞(包括相压、相切和分离的双核或多核淋巴细胞。统计分析每2000个存活淋巴细胞中含有6-TG的1000个淋巴细胞中的双核或多核细胞数被除以不含6-TG的1000个淋巴细胞中的双核或多核细胞数，其值为HPRT突变频率(‰)。用t检验进行统计处理。

2 结果与讨论

实验结果见附表。

由附表可知，检测30例正常人中，16例男性的HPRT基因突变频率为1.039×10^-3，14例女性的HPRT基因突变频率为1.064×10^-3, 男女之间无显著性差异(P＞0.05)根据文献报道^[2]，性别不影响突变频度，从我们的实验结果也证实了这点。30例HPRT基因位点突变频率均值为1.052×10^-3 (范围0.932~1.170×10^-3)和王知权^[3]等人报道的28例健康成人献血员的HPRT均值1.05×10^-3相一致。至于年龄与突变率的关系，据Morley等^[4]报道，年龄是一影响因素，新生儿淋巴细胞突变率很低出生后20年内迅速增加，由于我们检测的30例健康献血员中年龄组集中在30岁(22~42岁)上下，未能统计年龄的影响。

HPRT为淋巴细胞的正常组份，当6-TG经该酶转化时，可参与DNA合成，能导致细胞死亡。细胞突变引起该基因结构或功能改变时，影响其表达，表现为HPRT缺陷型。离体培养下可抵抗6-TG的细胞毒性而存活，故测定淋巴细胞中抗6-TG细胞可反映出人体细胞的突变频度。因此，可用于测定某些肿瘤患者、肿瘤病人化疗后和电离辐射者等，其突变频度都可增高，且可用于急性和慢性小剂量长期照射的剂量分析，与剂量之间有一定的依赖关系，与染色体畸变具有良好的线性关系，即随染色体畸变的增加，HPRT基因突变频率也增加^[5]。